李怀强
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰Livin基因表达增强骨肉瘤MG-63耐药细胞对多柔比星的化疗敏感性被引量：3
- 2017年
- 目的:研究凋亡抑制蛋白基因Livin在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法:应用多柔比星逐步诱导法诱导人骨肉瘤MG-63细胞建立耐药细胞株,MTT实验检测耐药细胞株的耐药指数,Western blotting法检测MG-63细胞和耐药细胞中Livin蛋白表达的差异。构建Livin shRNA真核表达载体,应用LipofectmineTM2000转染至耐药骨肉瘤细胞中,Real-time PCR和Western blotting分别检测Livin shRNA转染前后MG-63耐药细胞中Livin基因和蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,MTT法检测对多柔比星化疗敏感性的变化。结果:成功构建重组质粒p Silencer3.1-H1 neo-Livin si。诱导的耐药细胞MG-63/R对多柔比星的耐药指数为81.32±5.33。Livin shRNA可抑制MG-63细胞中Livin基因和蛋白表达,明显低于空白对照组和非特异性转染组(分别下调72%和69%,P<0.05)。特异性转染Livin shRNA组MG-63/R细胞的凋亡率显著高于未转染组和非特异性转染组[(22.4±3.2)%vs(4.2±1.1)%、(4.7±0.6)%,P<0.05]。3组细胞在加入多柔比星后增殖均受到不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但特异性转染组细胞的存活率均显著低于其他两组(P<0.05)。结论:应用RNA干扰技术下调Livin的基因表达可有效促进耐药MG-63骨肉瘤细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性。
- 孙廓袁初平李怀强廖琦
- 关键词：骨肉瘤LIVIN基因RNA干扰多柔比星耐药
- 人骨肉瘤组织中Livin和Caspase-7蛋白的表达及其临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的:分析Livin和Caspase-7蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨两者在骨肉瘤的临床诊断、治疗及预后中的意义。方法:收集2001年2月至2012年12月我院骨科收治的51例骨肉瘤患者的石蜡切片标本及12例正常骨痂组织标本,采用免疫组化法检测标本中Livin和Caspase-7蛋白的表达,并分析两者表达的相关性及与骨肉瘤各临床病理指标和预后之间的关系。结果:与正常骨痂组织相比,骨肉瘤患者组织中Livin蛋白的阳性表达率明显增高[66.7%(34/51)vs 8.3%(1/12),P<0.01];而Caspase-7蛋白的阳性表达率则明显降低[49.0%(25/51)vs 100.0%(12/12),P<0.01]。Livin和Caspase-7蛋白的阳性表达与骨肉瘤的大小、Enncking分期及患者5年生存率显著相关(P<0.01),与患者年龄、性别、病理分型及肿瘤的部位无相关性(P>0.05);Livin蛋白的阳性表达和Caspase-7蛋白的阳性表达之间呈负相关性(r=-0.305,P=0.029)。结论:Livin蛋白在骨肉瘤组织中高表达,而Caspase-7蛋白在骨肉瘤组织中低表达,两者表达呈负相关性;Livin可能通过某种机制调控Caspase-7的表达,从而抑制了骨肉瘤细胞凋亡并促使骨肉瘤的发生与发展。
- 李怀强孙廓蔡风彭源祥刘春龙廖琦
- 关键词：骨肉瘤LIVINCASPASE-7免疫组织化学
