杨琨 作品数:11 被引量:36 H指数:4 供职机构: 遵义医学院附属口腔医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省自然科学基金 贵州省卫生厅科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
牙源性间充质干细胞促进牙周组织再生的可能性与前景 被引量:8 2019年 背景:近年来,牙源性间充质干细胞在牙周炎模型牙周组织再生中取得了突破性进展,被认为是牙周组织再生的种子细胞,也是目前牙周组织重建的研究热点。目的:综述牙源性间充质干细胞在牙周组织再生中的研究进展,并提出牙源性间充质干细胞促进牙周组织再生的潜在机制。方法:以"牙周炎、牙源性间充质干细胞、牙周组织再生、多向分化能力、增殖、自我更新、迁移、归巢、免疫调节、衰老、牙周组织修复"为中文检索词;以"periodontitis,odontogenic mesenchymal stem cells/dental-derived mesenchymal stem cells,periodontal tissue regeneration,multidirectional differentiation,proliferation and self-renewal,migration and homing,immune regulation,aging,repair of periodontal tissue"为英文检索词,检索CNKI与PubMed数据库1995至2018年间相关文献,纳入61篇文献进行综述,分析牙源性间充质干细胞的相关特性、修复牙周组织的潜在机制及研究进展。结果与结论:在牙周炎动物模型及细胞模型中植入牙源性间充质干细胞,可形成牙周组织。牙源性间充质干细胞是重建牙周组织的一种新型治疗方法,但目前在牙周组织再生中的应用仍处于初期阶段,还面临干细胞增殖、分化、迁移和归巢、衰老以及新生物与体内功能相适应等挑战。 都沙沙 蔡智国 杨琨 刘琪关键词:牙周炎 细胞迁移 细胞归巢 牙周组织再生 国家自然科学基金 OPG、RANKL在2型糖尿病伴牙周炎大鼠牙槽骨中的表达 被引量:9 2017年 目的:探讨骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子(RANKL)在2型糖尿病伴牙周炎大鼠模型中的表达水平。方法:46只Wistar雄性大鼠,随机分为健康组10只;单纯牙周炎组12只;2型糖尿病组12只;2型糖尿病牙周炎组12只;分别建模,免疫组织化学方法检测牙槽骨OPG、RANKL蛋白表达。结果:与健康组相比,OPG在2型糖尿病组、单纯牙周炎组、2型糖尿病伴牙周炎组表达水平依次降低,RANKL的表达水平依次增强;OPG及RANKL的表达除2型糖尿病牙周炎组与单纯牙周炎组间比较无差异外,其余组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论:炎症可能导致破骨细胞及免疫细胞中RANKL的上调和成骨细胞中OPG的下调。 钟雯怡 杨琨 高丽 杨孟雪 向文安 刘琪关键词:牙周炎 2型糖尿病 骨保护素 MAGE-D1对大鼠牙胚来源外胚间充质干细胞增殖迁移能力的影响 被引量:4 2018年 目的研究黑色素瘤相关抗原D1(Melanoma associated antigens,MAGE-D1)对大鼠牙胚来源的外胚间充质干细胞(Ectomensenchymal stem cells,EMSCs)增殖及迁移能力的影响。方法取SD大鼠孕19. 5 d胎鼠牙胚组织,组织块法培养牙胚来源外胚间充质干细胞,流式细胞仪进行外胚间充质干细胞表面分子鉴定CD14、CD29、CD44、CD45、CD90、CD105、CD146、CD166和p75NTR,MAGE-D1 siRNA转染入外胚间充质干细胞,实验组分为:对照组(Control)和MAGE-D1 siRNA组(MAGEsiRNA-EMSCs),CCK8法和划痕法分别检测两组细胞增殖能力与迁移能力,Real Time-PCR及Western blot检测迁移及WNT通路相关基因MAGE-D1、β-catenin、E-cadherin的mRNA及蛋白表达量。结果组织块法成功培养出牙胚来源的外胚间充质干细胞,经流式细胞仪检测细胞阳性表达CD14(92. 16%)、CD29(94. 53%)、CD44(99. 51%)、CD90(95. 18%)、CD105(34. 22%)、CD146(92. 39%)、CD166(98. 15%)和p75NTR(88. 56%),阴性表达CD45(0. 5%);CCK8法检测MAGE-D1 siRNA组EMSCs增殖能力受到抑制;划痕试验法检测MAGE-D1 siRNA组细胞48 h迁移量高于对照组细胞;Real Time-PCR检测Mage-D1、β-catenin和E-cadherin表达量,MAGE-D1 siRNA组EMSCs MAGE-D1和E-cadherin表达较对照组低,而β-catenin表达较高,Western blot检测MAGE-D1、β-catenin和E-cadherin表达水平趋势与Real Time-PCR结果相一致。结论抑制EMSCs中MAGE-D1的表达上调β-catenin,下调E-cadherin,能够提高细胞的迁移能力,但是其导致增殖能力降低,MAGE-D1可能作为EMSCs迁移增殖能力的关键因子。 杨琨 李骏 丰奇昊 沈梦杰 陈谦谦 罗雅馨 刘琪 温秀杰关键词:外胚间充质干细胞 增殖 迁移 WNT信号通路 不同来源干细胞在口腔骨再生中的应用 被引量:2 2019年 背景:近年来,随着干细胞与再生技术的不断进步,骨组织工程得到了迅速的发展。虽然应用于骨组织工程中的种子细胞已经有很多,但对于不同的疾病,研究人员和临床工作者仍然面临着最佳种子细胞选择的问题。口腔骨组织重建是近年来研究的一个热点,目前应用于口腔骨组织修复的方法很多,但还没有一种方法能够取得满意的临床效果。因此,充分利用干细胞在骨再生过程中的潜能将为口腔骨组织缺损修复提供一种新思路。目的:对不同来源干细胞促进口腔骨组织再生的潜能进行综述,进而为组织工程选择种子细胞提供依据。方法:以"干细胞,骨修复,牙槽骨再生,成骨,骨组织""stem cell, bone repair, alveolar bone regenerate,osteogenesis,bonetissue"为关键词,检索中国生物医学文献数据库(CBM)、CNKI、PubMed、Elsevier以及Web of Science等数据库,通过阅读文题和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入81篇文献进行结果分析。结果与结论:组织工程为口腔骨再生修复提供了新的方法,但是对于干细胞的选择还没有标准化。应用于骨组织再生的干细胞种类有很多,但因其来源不同在体内发挥的作用也不尽相同,对于特定组织损伤的修复,选择一种合适的干细胞就显得很重要。文章对胚胎干细胞、间充质干细胞以及诱导多能干细胞在口腔骨组织再生中的优缺点进行了比较,旨在为口腔骨组织再生修复种子细胞的选择提供一种参考。 沈梦杰 杨琨 刘琪关键词:干细胞 胚胎干细胞 诱导多能干细胞 牙槽骨修复 骨再生 骨组织 寻找牙周膜干细胞特异性标志物的现状与展望 被引量:1 2019年 背景:牙周膜干细胞是牙周组织工程中重要的种子细胞,然而干细胞的异质性决定了其在移植治疗中的复杂性和效果的不确定性,寻找特异性表型标志物纯化牙周膜干细胞,发挥其最大的治疗效果是现今科研人员不断尝试的方向。目的:旨在总结牙周膜干细胞异质性的来源和亚群的甄别,指导合适的方法寻找特异性标志物。方法:由第一作者检索中国知网、中国生物医学文献数据库、爱思唯尔数据库、PubMed数据库2013至2018年相关文献。在标题、摘要、关键词中以"periodontal ligament stem cells,heterogeneous,surface marker,subsets,differentiation,isolation,characteristics,extracellular microenvironment"为关键词检索英文数据库;以"牙周膜干细胞,异质性,表面标志物,子集,分化,分离,特征,细胞外微环境"为关键词检索中文数据库。结果与结论:牙周膜干细胞是具有不同间充质细胞来源的异质性群体,现有的基于细胞表面标志物分选牙周膜干细胞的方法,因为抗体的不稳定性以及重叠表达等问题,无法真正准确地鉴别细胞亚群,牙周膜干细胞因为缺少特异性标志物,无法做到真正的识别和分离干性细胞群,未来需要利用蛋白质组学和基因芯片等新技术进一步寻找特异性标志物。 丰奇昊 沈梦杰 杨琨 刘琪关键词:牙周膜干细胞 表面标志物 牙周膜 干细胞 miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化能力的影响 2018年 目的观察miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化能力的影响。方法通过细胞转染技术分别上调和下调3T3-L1前脂肪细胞中的miR-3077-5P表达,将其分为对照(control)组、模拟物(mimics)组及抑制物(inhibitor)组;将各组3T3-L1前脂肪细胞成脂诱导10 d,以逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测其相关成脂基因PPAR-γ和LPL mRNA表达水平,用免疫蛋白印迹(Western Blot,WB)法检测其相关成脂基因PPAR-γ和FABP4蛋白水平;采用油红O染色观察脂滴形成情况并作定量分析。结果成脂诱导10 d,miR-3077-5P mimics组成脂基因PPAR-γ和LPL mRNA的表达水平及PPAR-γ和FABP4蛋白水平均升高,而miR-3077-5P inhibitor组则相反(P均<0. 05);成脂诱导10 d,miR-3077-5P mimics组脂滴形成最大,脂滴形成量存在升高现象,miR-3077-5P inhibitor组脂滴较小且形成量较少(P均<0. 05)。结论 miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程具有促进作用。 杨晓红 杨琨 廖立 金岩关键词:成脂分化 3T3-L1前脂肪细胞 骨组织工程研究中P75神经营养因子受体的作用及应用价值 被引量:2 2018年 背景:P75神经营养因子受体属于低亲和力神经营养因子受体,它不仅在神经生长、发育和维持功能完整性等方面具有重要作用,而且与骨组织修复、增强干细胞特性等方面也密切相关。目的:对目前P75神经营养因子受体在骨组织修复及再生中的研究进展以及价值进行综述。方法:计算机检索中国生物医学文献数据库、CNKI数据库、PubMed数据库以及Elsevier数据库的相关文献,检索词为"骨修复,骨再生,P75,P75NTR,bone repair,bone regenerate,tooth development,facialnerve,stemcell"。查阅1987年9月至2018年4月期间收录的P75神经营养因子受体在骨组织再生修复方面的相关文章,最终纳入47篇文献进行结果分析。结果与结论:(1)研究报道P75神经营养因子受体能促进牙齿的发育和面神经的修复,促进骨组织的矿化和缩短骨愈合的时间,还能通过调节干细胞的特性来间接促进骨愈合;(2)也有研究者认为P75神经营养因子受体诱导的细胞凋亡可能会阻碍骨折的愈合,甚至导致骨折不愈合;(3)对于P75神经营养因子受体在骨组织修复方面所表现出双重作用的通路机制,未来还需要更深入的研究;(4)目前关于P75神经营养因子受体在骨组织修复的研究还仅仅局限于基础研究,临床应用的报道还很少。 沈梦杰 杨琨 刘琪关键词:骨修复 P75神经营养因子受体 P75NTR 骨组织工程 牙发育 面神经 消退素E1抑制牙周炎及促进牙周组织重建的作用 被引量:3 2019年 背景:E-系列消退素1(Resolvin E1,RvE1)能有效抑制炎性细胞浸润、诱导巨噬细胞吞噬体内有害物质等,促进炎症消退的作用,在实验性牙周炎病理转归中的效果已经得到初步证实。目的:综述了消退素E1对牙周炎病理转归的促进作用及潜在的意义。方法:以"消退素E1,牙周炎,白细胞,血小板,活性氧,巨噬细胞,炎性因子,成骨细胞,破骨细胞"和"Resolvin E1, Periodontitis,leukocyte,platelet,reactive oxygen species,Macrophages,inflammatory factor,osteoblast,osteoclast"为关键词,检索PubMed数据库、中国生物医学文献库(CBM)和中国知识资源总库(CNKI)系列数据库1996年至2018年间收录的消退素E1与牙周炎相关文献33条,分析消退素E1对牙周炎修复和再生的研究进展。结果与结论:目前临床途径尚不能有效解决牙周组织炎性反应、不可逆性丧失等难题,迫切需要有效途径控制炎症反应、恢复牙周重建。近年来大量研究显示消退素E1在牙周炎动物及细胞模型病理转归中具有良好的效果。消退素E1作为特定G蛋白偶联受体(趋化素受体23,白三烯B4受体1)的激动剂或部分激动剂,可以引发一系列细胞特异性反应,反向调节炎症进展,将可能为牙周炎病理转归提供新的方向。 蔡智国 刘琪 都沙沙 杨琨关键词:牙周炎 炎症因子 整合素 细胞外基质 细胞骨架 炎症 氧化铁纳米粒子在骨组织修复再生中的研究与应用 被引量:5 2019年 背景:氧化铁纳米粒子是一种磁性纳米材料,具有优良的特性,使其在医学上的应用越来越广泛,尤其在骨组织再生修复方面起到了积极作用。目的:综述氧化铁纳米粒子在骨组织修复再生中的研究进展及应用。方法:应用计算机检索中国生物医学文献数据库、CNKI数据库、PubMed数据库及Elsevier数据库中发表的相关文献,检索词为"骨修复,骨再生,氧化铁纳米粒子,磁性纳米粒子;IONPs,bone repair,bone regenerate,iron oxide nanoparticles,osteogenesis,stem cell",查阅2004年5月至2018年1月期间收录的氧化铁纳米粒子在骨组织再生医学方面的相关文章。结果与结论:近年来,磁性纳米粒子在医学研究中得到了广泛应用,例如靶向给药、磁共振成像(MRI)、局部组织热疗和肿瘤治疗、生物分离和生物传感等,目前较为常用的磁性纳米粒子是氧化铁纳米粒子。研究已证明氧化铁纳米粒子与干细胞归巢有密切关系,并且能够携带药物进入特定的靶向部位及促进骨组织再生修复。虽然氧化铁纳米粒子促进骨组织修复研究取得了初步成效,但对于其促进骨愈合机制尚未完全阐明,大部分研究仅局限于基础研究,未来还需加强关于氧化铁纳米粒子促进骨组织愈合通路机制的研究及临床研究。 沈梦杰 杨琨 刘琪关键词:磁性纳米粒子 骨修复 成骨 骨再生 四氧化三铁 AGEs和TNF-α对人牙周膜干细胞骨向分化能力的协同抑制作用 2018年 本实验旨在研究糖基化终末产物(AGE-BSA)和TNF-α对人牙周膜干细胞增殖及骨向分化能力的影响。本实验通过体外组织块酶消化法和有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,使用流式细胞仪检测细胞表型分子stro-1、CD146、CD44、CD90的表达而对其进行干细胞鉴定后,取第3代人牙周膜干细胞在100μg/mLAGE-BSA及10ng/mLTNF-α刺激下进行增殖能力检测;同时矿化诱导,设A组(AGE-BSA刺激组),T组(TNF-α刺激组),AT组(AGE-BSA/TNF-α共同刺激组),不含AGE-BSA/TNF-α的常规矿化诱导组作为对照;于诱导的21d茜素红染色观察钙结节形成情况,诱导7d,碱性磷酸酶染色观察ALP活性、实时定量聚合酶链反应(realtimePCR)和Western blotting检测成骨相关基因及蛋白表达情况。流式细胞仪显示细胞阳性表达STRO-1、CD146、CD44、CD90;成骨诱导21d后茜素红染色和定量分析显示,AT组骨结节形成量最低,A组及T组相对于对照组骨结节形成量存在下降;差异均有统计学意义(p<0.05)。成骨诱导7d后ALP染色,ALP活性变化趋势与茜素红定量分析相同。成骨诱导7d后RT-PCR检测成骨相关基因BSP、OCN、ALPmRNA表达,AT组表达水平最低,A组及T组有下降趋势,差异均有统计学意义(p<0.05)。Western blotting检测显示,各组总蛋白BSP蛋白表达趋势与RT-PCR趋势相同。AGEs与TNF-α均具有对HPDLSC的骨向分化能力的抑制作用,两者共同刺激对HPDLSC骨向分化能力存在协同抑制作用。 杨晓红 杨琨 崔晓霞 刘琪 金岩关键词:糖基化终末产物 肿瘤坏死因子 人牙周膜干细胞 骨向分化