王大维
- 作品数：11 被引量：44H指数：4
- 供职机构：浙江中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程化学工程更多>>
- 迷迭香酸抑制人多发性骨髓瘤ARH-77细胞增殖的作用机制被引量：2
- 2018年
- 目的研究迷迭香酸(rosmarinic acid,RosA)对ARH-77细胞的抑制作用及其机制。方法采用CCK-8法检测RosA对ARH-77细胞增殖的影响,并由该结果确定实验组用药浓度分别为:20、40、80μmol·L^(-1),作用时间48 h;通过流式细胞术检测凋亡率;采用qPCR法检测Fas、caspase-8、caspase-9 mRNA表达;采用分光光度法检测caspase-8的活性;Western blot法检测t Bid、Fas、活性caspase-3和活性caspase-9的蛋白水平。结果 RosA能明显抑制ARH-77细胞的增殖;与对照组相比:各实验组均主要发生早期凋亡(P<0.01);各实验组活性的caspase-3、caspase-9水平均明显升高(P<0.01),caspase-8 mRNA表达也明显上调,但其蛋白活性仅在Ros A 80μmol·L^(-1)时明显升高(P<0.01);在Ros A(40、80μmol·L^(-1))组,caspase-9 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),t Bid的蛋白表达也明显升高(P<0.01);Fas mRNA和蛋白表达仅在Ros A 80μmol·L^(-1)组明显升高(P<0.01)。结论 RosA诱导ARH-77细胞早期凋亡而导致了增殖抑制,死亡受体途径和线粒体途径可能共同参与了Ros A诱导的ARH-77细胞凋亡。
- 娄诤赵肖涯杜丽君王大维
- 关键词：迷迭香酸TBIDFASCASPASE-3CASPASE-9CASPASE-8
- 从风邪探讨回纹型风湿病的中医辨治被引量：3
- 2017年
- [目的]从风邪的致病特点及属性探讨回纹型风湿病的病因病机及证治思路。[方法]结合风邪的致病特点和回纹型风湿病的临床表现,探讨风邪在回纹型风湿病发病中的作用,并从风邪作为切入点指导其辨证分析、化裁用药,并探索其治疗效果。[结果]回纹型风湿病属于中医"行痹",在营卫虚弱的基础上,风邪为主挟带寒湿热之邪闭阻筋脉关节发为本病,营卫虚弱是其发病之本,风邪为主挟带寒湿热之邪侵犯是其发病之标。病性本虚标实,治疗上急性期以风为核心,祛风通络为主;缓解期以本为要,治疗上尤重调补营卫。[结论]本文以风为核心,从风邪的致病的角度对回纹型风湿病的病因病机进行分析与阐发,使回纹型风湿病的发病机制得以清晰,为回纹型风湿病的临床证治提供新的思路和方法。
- 何莉娇赵艳霞李海昌王大维温成平
- 关键词：行痹风邪
- 马钱子碱诱导KG-1细胞凋亡及其机制研究被引量：8
- 2018年
- 目的:考察马钱子碱对人急性髓系白血病KG-1细胞凋亡的影响,并探究相关机制。方法:采用CCK-8法检测马钱子碱对KG-1细胞增殖的影响,确定实验组的用药浓度分别为40、158、276μg/mL,作用时间为48 h;通过流式细胞术检测KG-1细胞的凋亡率;采用RT-qPCR法检测Bax、Akt、Bim mRNA表达;通过Western-blot法检测Bim、p-Akt、Bax、Active Caspase-3、Active Caspase-9蛋白表达。结果:马钱子碱能抑制KG-1细胞的增殖,40、158μg/mL组主要是早期凋亡,而276μg/mL组则以晚期凋亡为主。与对照组比较,158、276μg/mL组的Bim、Bax mRNA表达显著升高,而Akt mRNA表达显著降低,各给药组Bax、Active Caspase-3蛋白表达均显著升高,158、276μg/mL组Bim、Active Caspase-9蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:马钱子碱对KG-1细胞具有显著的增殖抑制作用,该作用通过诱导凋亡实现,其机制可能为上调Bax、Bim表达,触发凋亡的线粒体途径,使Caspase-9激活,导致KG-1细胞凋亡。
- 娄诤王大维
- 关键词：马钱子碱凋亡BIMBAXACTIVECASPASE-9
- 中性粒细胞胞外诱捕网在系统性红斑狼疮发病机制中的作用
- 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是中性粒细胞受到刺激后释放产生的网状物,由DNA骨架、组蛋白、颗粒蛋白以及胞浆蛋白组成,近年来有研究表明NETs能诱导产生多种自身抗原参与多种自身免疫病,如系统性红斑狼疮(Systemic...
- 林笑颖周明倩李海昌王大维
- 关键词：系统性红斑狼疮自身抗原
- 蛇床子素诱导Hela细胞凋亡及其机制研究
- 2014年
- 目的:探讨蛇床子素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制。方法:采用MTT法检测各浓度蛇床子素对Hela细胞增殖的抑制作用;光学显微镜观察细胞的形态学变化;凝胶电泳分析DNA的片段化改变;采用RT-PCR检测Hela细胞fas和bcl-2基因mRNA的表达水平。采用10μg/mL的蛇床子素作用于Hela细胞24h后的培养上清称为ost-La;洗去蛇床子素,用新鲜培养液进行24h再培养的Hela细胞培养上清称为ost-Lb;不经蛇床子素处理的Hela细胞同步培养上清作为对照,称为control-L;定量Elisa法测定各上清中TGF-β1含量。结果:蛇床子素可显著抑制Hela细胞的体外增殖,诱导Hela细胞的凋亡,且均呈剂量依赖性。RT-PCR:凋亡相关基因fas的表达量升高,而bcl-2的表达量下降,表达量的变化与蛇床子素的浓度有关。Elisa:TGF-β1的含量在ost-La中为16.732±3.068 ng/mL(P<0.01);在ost-Lb中为2.031±0.112 ng/mL(P<0.01);在control-L中为385.282±42.613 ng/mL。结论:子素可诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能与促进Fas基因表达,抑制Bcl-2基因表达和TGF-β1含量改变有关。
- 王大维梅丽君温成平
- 关键词：蛇床子素HELA细胞凋亡
- 迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响及分子机制研究被引量：9
- 2018年
- 目的研究迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,并探究相关机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度迷迭香酸作用不同时间后HCT-8细胞的增殖情况;根据CCK-8法结果确定迷迭香酸15、45、75μmol/L作用72 h,考察HCT-8细胞的凋亡和相关基因及蛋白的表达;通过流式细胞术检测HCT-8细胞的凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测p53、Bax和Puma基因的m RNA表达;通过Western blotting法检测p53、Bax、Puma和active Caspase-9的蛋白表达水平。结果迷迭香酸能够抑制HCT-8细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性。15、45μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞早期凋亡(P<0.01),75μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞晚期凋亡(P<0.01)。迷迭香酸可以使Puma的m RNA表达上调,并呈浓度依赖性;45、75μmol/L的迷迭香酸可以使p53和Bax的m RNA表达升高(P<0.05)。迷迭香酸可以上调Puma、Bax和active Caspase-9的蛋白表达水平,并呈浓度依赖性;75μmol/L的迷迭香酸可以使p53的蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论迷迭香酸对HCT-8细胞具有明显的增殖抑制作用,并且是通过诱导凋亡实现的,促凋亡蛋白p53、Puma、Bax和active Caspase-9诱导了凋亡的发生。
- 娄诤陆仲夏俞雅蓉王大维
- 关键词：迷迭香酸HCT-8细胞PUMABAXCASPASE-9
- 狼疮定对系统性红斑狼疮活动期肝肾阴虚证患者外周血单个核细胞中pDC含量及TLR7/TLR9/MyD88通路的影响被引量：6
- 2020年
- 目的探讨狼疮定治疗系统性红斑狼疮(SLE)活动期肝肾阴虚证的可能作用机制。方法收取SLE活动期肝肾阴虚证患者及正常人全血分离外周血单个核细胞(PBMC),并将SLE活动期肝肾阴虚证患者PBMC分为模型组、狼疮定组(狼疮定冻干粉2μg/μl)、狼疮定+地塞米松组(狼疮定冻干粉2μg/μl+地塞米松注射液10μg/ml)、地塞米松组(地塞米松注射液10μg/ml)。用药24h后收集细胞,采用流式细胞术检测正常人与活动期SLE患者及各组PBMC中浆细胞样树突状细胞(pDC)含量。采用Realtime-PCR法检测各组PBMC细胞Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体9(TLR9)、髓样分化因子88(MyD88) mRNA表达水平,Western blotting检测TLR7、TLR9、MyD88、核因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达,ELISA法检测其上清中干扰素α(IFN-α)含量。结果与正常人比较,SLE活动期患者外周血PBMC中pDC含量减少(P<0.01)。与模型组比较,狼疮定组pDC含量、NF-κB p65蛋白表达增多,MyD88 mRNA及TLR7、TLR9蛋白表达、培养上清中IFN-α含量减少(P<0.05或P<0.01);狼疮定+地塞米松组TLR9、MyD88 mRNA及TLR9、MyD88、NF-κB p65蛋白表达,培养上清中IFN-α含量减少(P<0.05或P<0.01)。与地塞米松组比较,狼疮定组pDC含量增多,TLR7、MyD88 mRNA表达降低,培养上清中IFN-α含量降低;狼疮定+地塞米松组TLR7、TLR9、MyD88 mRNA表达及MyD88、NF-κB p65蛋白表达,培养上清中IFN-α含量均降低(P<0.01)。与狼疮定组比较,狼疮定+地塞米松组NF-κB p65蛋白表达减少(P<0.01)。结论狼疮定及狼疮定联合地塞米松可能通过增多活动期SLE患者PBMC中pDC含量,抑制其PBMC的TLR7/TLR9/MyD88信号通路,进而抑制SLE病情进展,且狼疮定联合地塞米松效果更好。
- 汪梅姣谢志军王大维李海昌
- 关键词：浆细胞样树突状细胞TOLL样受体7TOLL样受体9髓样分化因子88
- 氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞抑制作用及机制研究被引量：4
- 2019年
- 目的探讨氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Eca109细胞的增殖抑制率。依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、5、10、15μmol/L,药物作用时间为48 h。以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;以实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测Caspase-3、Caspase-9和Noxa的m RNA表达;采用Westernblotting法检测cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53和Noxa的蛋白表达水平。结果氯化两面针碱对Eca109细胞具有增殖抑制作用,一定范围内呈时间和浓度依赖性。流式细胞术结果显示,5μmol/L的氯化两面针碱主要诱发早期凋亡(P<0.01);10、15μmol/L的氯化两面针碱主要诱发的是晚期凋亡(P<0.01)。q RT-PCR结果显示,Caspase-3、Caspase-9和Noxa的m RNA表达均随氯化两面针碱的浓度增加而升高,其中10、15μmol/L组升高比较显著。Western blotting法结果显示,cleaved Caspase-3、p53和Noxa的蛋白水平均随氯化两面针碱浓度的增加而升高(P<0.01),但Noxa的升高在5μmol/L组不显著,在10、15μmol/L组升高明显(P<0.01);Bcl-2蛋白的表达随着氯化两面针碱浓度的升高而降低,10、15μmol/L组较为显著(P<0.05、0.01)。结论氯化两面针碱对Eca109细胞的增殖抑制作用主要是通过诱导凋亡实现的,氯化两面针碱诱导Eca109细胞的凋亡与p53和Noxa的表达升高和Bcl-2的下调以及Caspase-3的活化有关。
- 袁翠林娄诤谢璐迪王大维
- 关键词：氯化两面针碱ECA109细胞CASPASE-3NOXA
- 大蒜素对KG-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制被引量：9
- 2018年
- 大蒜素是大蒜中主要的生物活性物质,具有抗菌、降血脂等多种药理作用。该研究通过凋亡相关指标的检测,来探讨大蒜素对KG-1细胞增殖抑制的分子生物学机制。采用流式细胞术检测大蒜素诱导KG-1细胞的凋亡率;采用RT-q PCR法检测大蒜素对KG-1细胞Bax,Bcl-2,survivin,ERK基因mRNA表达水平的影响;通过Western blot法检测大蒜素对KG-1细胞caspase 3,cleaved caspase 3,ERK1/2,p-ERK1/2,survivin蛋白表达水平的变化。结果表明,与对照组相比,大蒜素能够显著抑制KG-1细胞的增值活性,并且呈显著浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞术检测显示大蒜素能够诱导KG-1细胞的凋亡,并且主要是晚期凋亡。RT-q PCR结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后,与凋亡相关的基因Bax的mRNA表达升高,Bcl-2,survivin,ERK基因的mRNA表达降低;Western blot法结果显示,大蒜素作用于KG-1细胞后执行凋亡的蛋白caspase 3及其活性形式cleaved caspase 3升高,促生存的相关蛋白survivin,ERK1/2和其活性形式p-ERK1/2表达下降,其中p-ERK1/2的下调呈剂量依赖性。以上结果提示,大蒜素主要通过诱导KG-1细胞的晚期凋亡来抑制其增殖;凋亡的执行有cleaved caspase 3的参与;凋亡的诱导涉及到蛋白水平,ERK1/2,survivin表达的降低和p-ERK1/2剂量依赖性的减弱;mRNA水平涉及到Bax的升高,survivin,Bcl-2,ERK1/2的下调。
- 娄诤魏庆庆王大维谷焕鹏
- 关键词：大蒜素凋亡CASPASEP-ERK
- 从雌激素受体探讨解毒祛瘀滋阴药对SLE的治疗机制被引量：3
- 2017年
- 目的观察解毒祛瘀滋阴药含药血清对雌激素受体α和β及其相关通路的调节作用,从而探讨解毒祛瘀滋阴药治疗系统性红斑狼疮(SLE)的机制。方法 CCK-8法检测研究解毒祛瘀滋阴药含药血清对MCF-7细胞增殖的影响;以FITC-Annexin V/PI双染法流式细胞术检测10%解毒祛瘀滋阴药含药血清诱导MCF-7细胞的凋亡率;Realtime-PCR法检测ERα和PI3KmRNA的表达;Western blot法检测雌激素受体相关信号通路蛋白ERα、p-ERα、ERβ、ERK、p-ERK的表达。结果 10%和15%的解毒祛瘀滋阴药含药血清与空白血清相比均能较轻的抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.01)。与空白血清相比,10%的解毒祛瘀滋阴药含药血清:使MCF-7细胞的早期凋亡较多;使ERα和PI3K的mRNA相对表达量明显降低(P<0.05或P<0.01);使ERα的蛋白表达和磷酸化水平降低;使ERβ的蛋白表达水平升高;使ERK的蛋白表达和磷酸化水平降低。结论下调ERα的表达和其磷酸化水平,促进ERβ的表达,下调ERK及其磷酸化进而影响MAPK/ERK信号通路也许是解毒祛瘀滋阴药治疗SLE的部分机制。
- 王大维汪梅姣谷焕鹏温成平
- 关键词：雌激素受体信号通路系统性红斑狼疮
