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韩丽英
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1
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供职机构:
中国医科大学附属盛京医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王鸿雁
中国医科大学附属盛京医院
郑博
沈阳市妇婴医院
高爽
沈阳市妇婴医院
刘畅
中国医科大学附属盛京医院
卢颖
锦州医科大学基础医学院
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人巨细胞病毒Han株US12基因缺失株的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的复制
2017年
目的构建人巨细胞病毒(HCMV)Han株US12基因缺失的BAC毒株,研究US12产物对HCMV Han株在人胚肺成纤维细胞(HELF)中复制的影响。方法以侧翼含有US12基因同源序列的PCR引物扩增卡那霉素抗性基因,电转至含有Han株BAC质粒的大肠杆菌DY380-Han-wt-BAC,PCR及DNA测序验证US12缺失的病毒序列。将缺失突变质粒Han-ΔUS12-BAC-P电转至HELF,获得感染性病毒颗粒Han-ΔUS12-BAC。以MOI为0.1的Han-ΔUS12-BAC毒株及Han-wt-BAC毒株感染HELF,TCID50法测定上清中病毒滴度,绘制病毒增殖曲线。结果成功构建了Han-ΔUS12-BAC克隆,转染HELF后成功获得感染性病毒。生长曲线实验结果表明,ΔUS12缺失和野生型毒株在HELF中复制增殖与扩散水平无明显差异。结论 US12为HCMV临床株Han在HELF中增殖和扩散过程中的非必需基因。
卢颖
马艳萍
柳中洋
王鸿雁
齐莹
韩丽英
高爽
郑博
刘畅
黄郁晶
阮强
关键词:
巨细胞病毒
细菌人工染色体
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