马晓东
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:宁夏自治区人民医院更多>>
- 发文基金:宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 迁移侵袭抑制蛋白MIIP基因K167E位点突变体的构建和表达
- 2014年
- 目的构建人迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白K167E突变体的原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP(K167E)并进行表达和纯化,为MIIP的后续功能研究提供有效工具。方法以pGEX-4T-1-MIIP重组质粒为模板,PCR扩增得到人MIIP基因(K167E)突变体的cDNA全长,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建获得pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体,经酶切鉴定及测序验证完全正确后,将其转化至大肠杆菌BL21细胞中诱导表达,纯化获得GST-MIIP(K167E)融合蛋白。结果酶切鉴定和测序结果显示,pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体表达载体构建成功。经诱导表达及纯化后,成功获得的GST-MIIP(K167E)融合蛋白。结论成功构建了pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体表达载体,并获得了GST-MIIP(K167E)融合蛋白。
- 高玉婧马晓东芦晓红姚青裴秀英杨怡李建宁张茜孙玉宁
- 关键词:融合蛋白