郭鑫
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:西安交通大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人巨细胞病毒微小RNAmiR-UL70-5P靶向抑制人即刻早期反应蛋白3的表达被引量:1
- 2014年
- 目的寻找人巨细胞病毒微小RNA mi R-UL70-5P调控的靶m RNA,检测mi R-UL70-5P对靶m RNA蛋白质表达的调节作用。方法采用Hybrid-PCR方法从人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞总RNA中筛选候选靶m RNA;采用荧光素酶实验验证mi R-UL70-5p与候选靶m RNA的结合能力;采用Western blot方法检测转染mi R-UL70-5P对部分靶m RNA蛋白质表达的调节作用。结果筛选并鉴定了人即刻早期反应蛋白3(IER3)等7种靶m RNA可与mi R-UL70-5P特异性结合;在293T细胞中过表达的IER3可以被转染的mi R-UL70-5P下调30%。结论人巨细胞病毒表达的mi R-UL70-5P在病毒感染宿主过程中具备抑制IER3蛋白质表达的能力。
- 柳中洋齐莹郭鑫蒋树娟黄郁晶邵耀中阮强
- 关键词:人巨细胞病毒微小RNAS
- 人巨细胞病毒微小RNA miR-US4-5p靶向抑制PAK2的表达被引量:2
- 2017年
- 目的寻找人巨细胞病毒微小RNA miR-US4-5p调控的靶mRNA,检测miR-US4-5p对靶mRNA PAK2蛋白质表达的调节作用。方法采用Hybrid-PCR方法及Targetscan软件分析从人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞总RNA中筛选候选靶mRNA;应用荧光素酶实验,通过构建PMIR-PAK2报告基因,将其和miR-US4-5p、miRNA阴性对照共转染到HEK293细胞中,验证miR-US4-5p与候选靶mRNA的结合能力;应用Western blot方法,通过将miR-US4-5p、miRNA阴性对照分别转染到HEK293细胞、HELF细胞、THP-1细胞中,验证转染miR-US4-5p对靶mRNA蛋白质表达的调节作用。结果通过HybridPCR方法及Targetscan筛选出12个miR-US4-5p的待选靶mRNA;荧光素酶实验表明:与转染miRNA阴性对照相比,转染miRUS4-5p可以显著地下调PMIR-PAK2的荧光素酶活性,从而验证了miR-US4-5p与PAK2的结合性,在HEK293细胞、HELF、THP-1细胞中PAK2可以被过表达的miR-US4-5p造成不同程度的下调。结论人巨细胞病毒表达的miR-US4-5p在三种不同细胞系中具备抑制PAK2蛋白质表达的能力。
- 邵耀中齐莹郭鑫蒋树娟黄郁晶柳中洋阮强解立怡
- 关键词:人巨细胞病毒微小RNAS