刘殿辰
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山东理工大学生命科学学院发育与进化生物学实验室更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- EdU标记涡虫体内多能干细胞neoblast的方法被引量：1
- 2013年
- BrdU(5-Bromo-2-deoxyuridine)是涡虫再生过程中成体多能干细胞(neoblasts)最常用的分子标记物,然而BrdU标记存在诸多缺陷.EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridne)是胸腺嘧啶核苷的类似物,可以标记分裂期的细胞.通过对涡虫注射EdU和基于Apollo荧光染料的染色,利用激光共聚焦扫描显微镜检测到了EdU阳性信号.形态学观察确定其为涡虫成体干细胞neoblasts,从而证明了EdU可以作为neoblasts的分子标记物.同时对涡虫中部再生3h、6h和12h时体内neoblasts的数量进行了统计分析.
- 刘殿辰王玲燕赵博生
- 关键词：东亚三角涡虫多能干细胞EDU激光扫描共聚焦显微镜
- 东亚三角涡虫Djtraf3基因的时空表达模式被引量：1
- 2015年
- 肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)作为TRAF家族的成员之一,通过介导TLRs信号通路,参与动物的免疫反应。通过构建东亚三角涡虫Djtraf3的cDNA文库获得Djtraf3基因并分析基因结构。结果发现,该最大开放阅读框为564bp,编码的蛋白质含187个氨基酸,含有1个TRAF结构域。进化分析表明,DjTRAF3和果蝇的TRAF3聚群,位于进化树的基部;整体原位杂交结果显示,在涡虫成体及不同再生阶段,Djtraf3在整个肠部表达。这些结果为进一步探究其功能提供了依据和方向。
- 范晓静周鲁明刘殿辰赵博生
- 关键词：东亚三角涡虫RNA探针原位杂交
- 东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析被引量：2
- 2012年
- 通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry氨基酸序列比对分析,发现保守的催化三联体结构中第一位的His被Lys所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响,文章构建了原核表达重组质粒pET-28a-Djtry,转化到E.coli BL21中,利用IPTG诱导表达,对表达的重组蛋白进行变性、复性、纯化以及Westernblotting鉴定,获得成分均一的活性蛋白。利用牛胰蛋白酶为标准品,胰蛋白酶特异性底物BAEE,检测Djtry酶活力与比活力。SDS-PAGE电泳表明诱导表达的融合蛋白为包涵体,分子量约为26 kDa,Western blotting结果显示为目的蛋白,对复性纯化的目的蛋白进行酶活检测发现,突变型胰蛋白酶Djtry仍然保持了胰蛋白酶催化性质,但是催化活性相对较弱。
- 周鲁明刘殿辰孙欢欢赵博生
- 关键词：东亚三角涡虫胰蛋白酶蛋白表达酶活
