方海红
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同培养条件下鼠疫菌PhoP/PhoQ的自调控模式研究
- 2017年
- 目的研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系。方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株(WT)和phoP突变株(ΔphoP)中,通过测定二者中β-半乳糖苷酶活性差异来判定PhoP对YPO1635的调控关系。提取WT和ΔphoP的总RNA,采用引物延伸实验研究phoP的转录起始位点,并根据产物的丰度判断PhoP对phoP的调控关系。结果 LacZ结果表明,在低Mg^(2+)TMH和BHI培养基中,PhoP能激活YPO1635的转录,而在高Mg^(2+)TMH中,PhoP对YPO1635的转录无调控作用。引物延伸结果显示,phoP有两个转录起始位点G(-90)和A(-118)(分别记为P1和P2,翻译起始位点为+1),在低Mg^(2+)TMH中,PhoP能激活P1的转录,而对P2无调控作用;在高Mg^(2+)TMH中,PhoP对二者均无调控作用;在BHI中,PhoP对二者的转录均具抑制作用。结论PhoP/PhoQ的自调控关系随周围环境的变化而表现出不同的模式,这有利于鼠疫菌快速适应外界生存环境的改变。
- 张义全方海红刘磊黄新祥杨瑞馥周冬生杨慧盈
- 关键词：鼠疫耶尔森菌PHOP
- blaCTX-M-55介导的宋内志贺菌耐药机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的研究bla_(CTX-M-55)介导的宋内志贺菌#1083的耐药机制。方法双纸片协同扩散法验证#1083是否为产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株;PCR方法鉴定其耐药基因;接合转移实验验证携带ESBL基因的质粒是否具有可转移性;VITEK 2仪器检测菌株对多种抗生素的MIC值;基因组测序鉴定介导耐药基因转移的移动元件;引物延伸实验鉴定耐药基因转录起始位点。结果 #1083为bla_(CTX-M-55)介导产ESBL的菌株,携带bla_(CTX-M-55)的耐药质粒可通过接合转移的方式进入受体菌EC600,并使受体菌具有相应的耐药谱;介导bla_(CTX-M-55)转移的转座单元为ISEcp1-bla_(CTX-M-55)-Δorf477,且其上游的插入序列ISEcp1为耐药基因提供强启动子区,促进耐药基因表达,且此表达为恒定表达,不受抗生素的诱导作用影响。结论质粒携带的bla_(CTX-M-55)为#1083的主要耐药基因,插入序列ISEcp1介导此基因的表达与传播。
- 蒋晓圆刘东徐丽方海红冯娇殷喆周冬生王丽张德福宋亚军
- 关键词：宋内志贺菌耐药基因
