王亚东
- 作品数：15 被引量：147H指数：7
- 供职机构：安徽中医药大学更多>>
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- 肝豆灵抑制Notch信号通路干预铜负荷致肝纤维化大鼠肝脏上皮-间质转化被引量：7
- 2018年
- 目的探讨肝豆灵抑制Notch信号通路干预铜负荷大鼠肝纤维化上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用机制。方法将雄性SD大鼠40只随机分为正常组,模型组,肝豆灵小、中、大剂量组,除正常组给予正常饲料外,其他各组喂饲硫酸铜饮食复制铜负荷大鼠肝纤维化模型。检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)水平及肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;分别采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察肝组织病理损伤及胶原沉积状况;采用RT-PCR检测肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、Jagged1、Notch1、Notch3、Snail mRNA,采用Western blot检测Hes1、E-cadherin蛋白表达水平,采用免疫组织化学法检测α-SMA表达水平。结果与正常组比较,模型组血清ALT、AST、ALP、HA水平及肝组织Hyp、胶原纤维含量均显著升高(P<0.05),肝组织TGF-β1、Jagged1、Notch1、Notch3、Snail mRNA表达水平以及肝组织Hes1、α-SMA蛋白表达水平显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,肝豆灵中、大剂量组E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),其余上述指标均显著降低(P<0.05)。结论肝豆灵通过抑制Notch信号通路,干预EMT环节,减少肌成纤维细胞转化生成及活化增殖,降低胶原纤维沉积而抗肝纤维化。
- 吴鹏王亚东方颖李茂涛蒋怀周鲍远程
- 关键词：NOTCH信号通路肝纤维化上皮-间质转化
- 基于NLRP3炎症小体研究白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌定植下小鼠溃疡性结肠炎的作用机制被引量：16
- 2022年
- 目的研究白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌异常定植下的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,以及对Dectin-1/脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路的影响。方法将105只C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS组、DSS+白念珠菌组及BAEB低、中、高剂量(20、40、80 mg/kg)组和美沙拉嗪(200 mg/kg)组。对照组小鼠每日自由饮水;DSS组予3%DSS溶液,自由饮用连续7 d;其他组在DSS组基础上,在第1、3、5、7天ig白念珠菌(1×108 CFU/只)。第8天开始分别ig相应药物,1次/d,连续7 d。每天称定小鼠质量,观察一般状态,收集粪便,采用平板培养法检测粪便真菌载荷。末次给药次日,处死小鼠,测量结肠长度,苏木素-伊红(HE)染色法进行结肠组织学分析;ELISA法检测结肠组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18水平;免疫组化法检测结肠组织Occludin和闭锁连接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)表达;Western blotting检测结肠组织Dectin-1、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、Syk、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cleaved cysteinasparate protease-1,cleaved Caspase-1)和NLRP3蛋白表达。结果与对照组和DSS组比较,DSS+白念珠菌组小鼠粪便培养出更多的白念珠菌(P<0.01);结肠黏膜损伤程度严重(P<0.01);结肠组织炎症因子IL-1β、IL-18水平明显升高(P<0.01);结肠组织Occludin和ZO-1蛋白表达明显下降(P<0.05);结肠组织NLRP3、NF-κB和Dectin-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),ASC、cleaved Caspase-1和Syk蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。与DSS+白念珠菌组相比,BAEB组小鼠肠道白念珠菌显著减少(P<0.01);结肠组�
- 王亚东徐志庆徐志庆张梦翔夏丹邵菁张梦翔
- 关键词：白念珠菌溃疡性结肠炎
- 日本血吸虫可溶性虫卵抗原对体外培养大鼠腹腔巨噬细胞活化及TNF-α表达的影响
- 2015年
- 目的:观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞(PMCs)中TNF-α活化及表达的影响。方法:体外培养大鼠PMCs,利用苏木素-伊红染色(HE染色)、免疫细胞化学染色(IHC)、RT-PCR以及放免法,对SEA作用后的大鼠PMCs形态变化和TNF-α表达进行观察;同时,制备SEA活化腹腔巨噬细胞条件培养基(SEA-MCM),利用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法,对经过SEA-MCM作用后的HSC-T6细胞增殖及胶原合成结果进行检测。结果:1大鼠PMCs在LPS(10 mg/L)和SEA(10 mg/L)分别作用3 h、6 h和9 h后,可以使PMCs活化增加,并促进大鼠PMCs TNF-α蛋白表达(P<0.05);2LPS(10 mg/L)和SEA(10 mg/L)分别作用6 h,大鼠PMCs TNF-αmRNA表达增加(P<0.05);3LPS(10 mg/L)和SEA(10 mg/L)分别作用3 h、6 h和9 h,培养上清中TNF-α含量高于阴性对照组(P<0.05);6 h和9 h组均高于3 h组(P<0.05),6 h和9 h组间无明显差别(P>0.05);4SEA-MCM促进HSC-T6细胞增殖和胶原合成(P<0.05)。结论:体外实验证实SEA与LPS在活化大鼠PMCs、促进TNF-α表达和分泌中有相似的作用,这可能与SEA活化大鼠PMCs能明显促进HSC-T6细胞增殖和胶原合成有关。
- 胡敏王亚东黄顺钱琛
- 关键词：腹腔巨噬细胞胶原合成
- 白头翁汤正丁醇提取物通过激活BMP信号通路治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究被引量：2
- 2024年
- 该研究旨在探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol extract of Pulsatilla Decoction,BEPD)通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路发挥对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用。C57BL/6小鼠分为6组:对照组、模型组、美沙拉嗪组及BEPD低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立UC模型,然后进行不同浓度的BEPD和美沙拉嗪灌胃治疗。记录各组小鼠体质量和疾病活动指数(disease activity index,DAI)。处死小鼠后,取结肠组织进行组织学分析,采用阿利新蓝/过碘酸雪夫(AB/PAS)染色法检测杯状细胞的数量及黏液分泌状况,免疫组化法检测结肠组织中增殖标志物ki67、活化半胱天冬酶3(cleaved caspase-3)、粘蛋白2(mucin 2,Muc2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,免疫荧光法检测结肠组织中紧密连接蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的水平,Western blot检测小鼠结肠组织中与BMP通路相关蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠结肠杯状细胞分化相关基因表达。在体外细胞学实验中,进一步验证BEPD含药血清对脂多糖(LPS)诱导下的LS174T杯状细胞屏障功能的保护作用及其机制。结果表明,BEPD显著缓解UC小鼠的一般症状,恢复杯状细胞分化功能,促进Muc2分泌和紧密连接蛋白的表达,并抑制炎症因子的分泌,同时激活BMP信号通路。因此,该研究提示BEPD可能通过激活BMP信号通路发挥治疗UC的作用,为药物干预UC提供了新的思路。
- 蒋晓娟王亚东孙娟孙娟马克龙邵菁吴大强汪长中
- 关键词：肠黏膜屏障杯状细胞
- 基于高通量转录组测序探讨参苓白术散缓解小鼠溃疡性结肠炎的作用机制被引量：11
- 2022年
- 利用高通量转录组测序技术研究参苓白术散缓解葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的作用机制。实验研究利用DSS诱导小鼠UC模型,并给予参苓白术散灌胃治疗;观察各组小鼠的一般状态、疾病活动指数(disease activity index, DAI)和结肠长度变化;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining, HE)染色法观察小鼠结肠黏膜组织病理改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清和结肠组织中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和抗炎因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平;高通量转录组测序分析空白组、模型组和参苓白术散组的差异表达基因,GO和KEGG pathway富集分析各组差异表达基因。结果显示,经参苓白术散灌胃治疗后,UC小鼠的腹泻、便血等症状得到改善,DAI评分显著降低;参苓白术散可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的丢失,并明显降低血清和结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平,同时显著升高IL-4、IL-10的水平。参苓白术散组vs模型组差异基因有25个,显著富集于免疫反应(immune response)、免疫系统过程(immune system process)和免疫球蛋白合成(immunoglobulin production)等生物学过程;KEGG pathway分析提示差异基因富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用,新霉素、卡那霉素和庆大霉素生物合成,原发性免疫缺陷和肠免疫网络IgA合成等信号通路。该研究表明,参苓白术散可能主要通过免疫调节发挥抗UC的作用。
- 孙娟蒋晓娟王亚东马克龙李姿慧王天城汪天明邵菁汪长中
- 关键词：参苓白术散溃疡性结肠炎转录组测序免疫调节
- 小檗碱对铜负荷大鼠肝纤维化组织Notch信号通路的作用研究被引量：8
- 2018年
- 目的:探讨小檗碱对铜负荷大鼠肝纤维化组织Notch信号通路的作用。方法:雄性SD大鼠40只随机分为5组:正常组、模型组、小檗碱50mg/kg组、小檗碱100mg/kg组、小檗碱200mg/kg组。喂饲含硫酸铜1.5g/kg的粉状饲料和0.185%硫酸铜去离子水24周制备铜负荷大鼠肝纤维化模型,各小檗碱治疗组在造模同时灌胃干预。24周实验结束处死各组动物,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量;取肝组织采用苏木精-伊红(HE)及Masson染色观察肝脏的一般形态及纤维增生情况;RT-PCR检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Notch1、Notch3、Hes1、Hes5mRNA表达,免疫组化方法检测Notch3、Hes1及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量。结果:与正常组比较,模型组肝功能及肝纤维化血清学指标升高(P﹤0.01),形态学纤维化改变明显,Notch3、Hes1、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著升高(P﹤0.01);与模型组比较,小檗碱治疗组随着剂量增加可降低增高的肝功能及肝纤维化指标,改善肝纤维化形态学异常,降低Notch3、Hes1、α-SMA mRNA及蛋白表达。结论:大剂量小檗碱可对抗铜负荷所致的大鼠肝纤维化,其作用机制可能与下调Notch3/Hes1信号通路表达有关。
- 吴鹏王亚东蒋怀周鲍远程
- 关键词：小檗碱肝纤维化NOTCH信号通路
- 黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠血清IL-1β、TNF-α、NGF和坐骨神经NGF mRNA的影响被引量：30
- 2020年
- 目的通过建立糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠模型,研究黄芪桂枝五物汤对DPN大鼠血清白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和坐骨神经组织NGF mRNA的影响,探讨黄芪桂枝五物汤治疗DPN的可能机制。方法连续4周以高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素诱导模型法复制DPN大鼠模型,自第5周开始,黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组每日分别采用黄芪桂枝五物汤19.40、4.85、2.43g/kg灌胃,连续给药12周;甲钴胺组每日采用甲钴胺0.25mg/kg灌胃。采用RT-PCR技术检测大鼠坐骨神经中NGF mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β、TNF-α、NFG水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05),NGF水平显著降低(P<0.05),坐骨神经中NGF mRNA表达水平下降(P<0.05)。黄芪桂枝五物汤呈剂量依赖性降低血清IL-1β、TNF-α水平,升高血清NGF水平和坐骨神经中NGF mRNA表达水平。结论黄芪桂枝五物汤可减轻周围神经组织炎症损伤,促进损伤神经的修复与再生,其机制可能与降低糖尿病大鼠血清IL-1β、TNF-α水平,上调坐骨神经NGF mRNA的表达水平有关。
- 周雯方颖储全根王亚东黄万秋张澳门梁雯孙玉敏
- 关键词：糖尿病周围神经病变神经生长因子黄芪桂枝五物汤
- 以精品课程建设促进病理学教学改革探讨被引量：5
- 2017年
- 精品课程建设作为教学改革工程的重要内容,是高等医学院校教学质量和人才培养的重要组成部分。文章以安徽中医药大学病理学省级精品课程建设为契机,从师资队伍建设、教学体系改革、实验室建设等方面进行实践与探索,以期提高教学质量,推动优质课程建设。
- 胡敏韩要武钱琛马琳王亚东吕磊张道芹
- 关键词：病理学教学改革精品课程
- 白头翁汤正丁醇提取物主要组分对中性粒细胞趋化抑制作用的比较研究被引量：5
- 2021年
- 比较白头翁汤正丁醇提取物主要组分秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对中性粒细胞趋化抑制作用的影响。将HL60细胞培养于配制好的1640完全培养基中培养,按2×105个/mL细胞密度置于6孔板中,每孔4 mL,按体积分数1.3%加入DMSO培养5 d,于倒置显微镜检查细胞形态变化;流式细胞术分析DMSO诱导后细胞CD11b的表达;采用CCK8法检测秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞增殖的影响;采用Transwell法检测秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞迁移的影响;采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测秦皮甲素,盐酸小檗碱,白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞F-actin的产生及其极化的调节;Western blot检测PI3K/Akt的表达。结果表明,HL60细胞经DMSO诱导后,细胞呈典型的中性粒细胞形态。流式细胞术分析表明诱导后细胞CD11b的表达水平明显增加。100μg·mL^(-1)秦皮甲素,8μg·mL^(-1)盐酸小檗碱,80μg·mL^(-1)白头翁皂苷B4可有效地抑制中性粒细胞的迁移,明显降低F-actin的表达;其中盐酸小檗碱可显著地降低磷酸化PI3K/Akt蛋白水平。上述结果表明,BAEB 3种主要组分对中性粒细胞趋化均有抑制作用,其中盐酸小檗碱的作用最明显,该作用可能与抑制F-actin及PI3K/Akt通路相关。
- 云云姜晶晶王亚东王亚东张梦翔徐志庆邵菁张梦翔
- 关键词：秦皮甲素白头翁皂苷B4中性粒细胞趋化
- 白头翁汤正丁醇提取物对外阴阴道念珠菌病小鼠阴道黏膜上皮屏障的影响被引量：8
- 2020年
- 探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)小鼠阴道黏膜上皮屏障的影响。雌性SPF(specific pathogen free)级昆明种小鼠72只,随机分为空白组、VVC模型组、阳性药氟康唑组、BAEB治疗组(高、中、低剂量组)。隔天皮下注射苯甲酸雌二醇,于假发情期向小鼠阴道接种白念珠菌(2×106 CFU·mL-1)连续7 d,以构建VVC模型,之后药物治疗7 d。革兰染色观察小鼠阴道分泌物中白念珠菌形态;平板法检测小鼠阴道真菌载荷量;HE(hematoxylin-eosin staining)染色法观察小鼠阴道黏膜组织病理状况;MT(Masson′s trichrome staining),HE及PAS(periodic acid-schiff staining)染色法观察小鼠阴道黏膜上皮屏障的完整性;免疫组化法检测小鼠阴道黏膜上皮细胞mucin-1和mucin-4蛋白表达;Western blot法测定第0,3,7天黏膜上皮细胞mucin-1和mucin-4蛋白表达水平。结果发现,VVC模型组小鼠阴道内有大量白念珠菌丝生成及较高真菌载荷量,阴道黏膜结构不完整,外层角化层脱落,阴道上皮细胞增生,炎症浸润加剧,以及上皮细胞表面mucin-1和mucin-4蛋白表达显著增多;经BAEB治疗后,小鼠阴道内菌丝减少,真菌载荷量显著下降,炎症浸润减少,阴道黏膜组织损伤改善,上皮屏障修复并恢复完整性,mucin-1和mucin-4蛋白水平下调。上述结果表明,BAEB可能通过重塑阴道黏膜上皮屏障的完整性而发挥治疗VVC的作用。
- 赵婷王亚东章康张梦翔张梦翔汪天明邵菁汪天明
- 关键词：外阴阴道念珠菌病黏蛋白
