罗怡琳
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 兔出血症病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 为建立快速检测兔出血症病毒(RHDV)的TaqMan荧光定量PCR方法,根据RHDV VP60基因保守序列设计1对特异性引物和1条探针,进行条件优化,检测重复性、敏感性和特异性,建立了RHDV TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,标准品浓度在2.8×10~6~2.8×10~2 copies/L范围内具有良好的线性关系,最低可检测到2.8×10~1copies/L的标准品阳性质粒,变异系数小于2%。结果表明,建立的TaqMan荧光定量PCR方法的特异性、敏感性、重复性均达到试验设计要求,能快速检测临床样品中的RHDV,为我国RHDV的检测及其定量检测的相关研究提供了一种可靠的技术工具。
- 蒙正群李桂黎周丽军冷依伊罗怡琳刘亚东王印姚学萍杨泽晓
- 关键词：兔出血症病毒TAQMAN荧光定量PCR
- 兔脾脏成纤维型细胞RS-17系的建立及其生物学特性被引量：1
- 2019年
- 采用胰酶消化法培养技术,对乳兔脾脏组织的细胞进行原代培养,从脾脏组织中分离出1株成纤维型细胞,命名为RS-17。通过对细胞传代培养条件优化,细胞标志性蛋白检测,细胞生长曲线分析,细胞核型以及细胞致瘤性等测定,结果显示,RS-17细胞具有血清依懒性,成纤维细胞标志性蛋白检测阳性,具有正常的核型,无致瘤性,且目前细胞传至95代仍可稳定生长。这为RHDV(兔出血症病毒)感染机制等相关研究提供了细胞材料。
- 罗怡琳蒙正群周丽军王印姚学萍杨泽晓罗燕耿毅
- 关键词：脾脏组织细胞系生物学特性
- 一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法
- 本发明公开了一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法，该培养基由以下原料制备而成：琼脂粉3g；氯化钠0.5‑1g；蒸馏水或超纯水150mL；DMEM培养液50‑100mL；葡萄糖0.175‑0.35g，双抗2‑3mL...
- 杨泽晓王印姚学萍李岩耿毅蒙正群张晗刘亚东徐秋梅罗怡琳周丽军
- 文献传递
- 2株兔出血症病毒全基因测定与遗传进化分析
- 2018年
- 对2株兔出血症病毒(RHDV)SCH04、Sch07进行全基因组序列测定,并进行同源性及遗传进化分析。按照病毒核酸组成,将病毒基因分7段进行RT-PCR扩增,将分段扩增产物分别克隆到p MD-19T载体进行测序,用DNAStar进行拼接,得到全基因组序列;参照Gen Bank上登陆的31株RHDV毒株全基因核苷酸序列、VP60基因核苷酸序列以及ORF2编码基因核苷酸序列对2株病毒进行同源性和遗传进化分析。结果显示,SCH04基因组全长7 439 bp,Sch07基因组全长7 438 bp,2株病毒全基因的核苷酸序列同源性为99.8%,与31株参考毒株全基因的核苷酸序列同源性为78.3%~97.0%;2株病毒的VP60基因核苷酸序列同源性为99.7%,ORF2编码基因核苷酸序列同源性为99.2%。进化树显示2株病毒同属于抗原变异株RHDVa(GI.1a)基因群,且亲缘关系最近。VP60基因核苷酸序列与ORF2编码基因核苷酸序列均可以作为RHDV遗传进化分析。
- 蒙正群周丽军罗怡琳冷依伊张鹏飞王印姚学萍耿毅杨泽晓
- 关键词：兔出血症病毒全基因遗传进化
- 兔脾脏成纤维型细胞RS17-2的建系及RHDV基因组SYBR Green qRT-PCR检测方法的建立
- 兔病毒性出血症(RHD)也被称为兔瘟。兔瘟是一种急性的、败血性的、高度传染性及高致死性的疾病,以兔全身实质性脏器出血为主要临床特征。兔出血症病毒(RHDV)为单股正链RNA病毒,基因组全长约7.5 Kb。目前,对于该RH...
- 罗怡琳
- 关键词：细胞感染
- 文献传递
- 鸡柏氏禽刺螨感染的初步研究
- 2017年
- 为探索四川某鸡场近年来肉鸡每年夏季均发生以腹部、腿部皮肤出现丘疹与痂皮为特征性病变的疫病病因,根据送检病鸡的临床症状、剖检病变和疾病流行特点进行初步诊断,并采用常规实验室诊断方法和PCR技术进行寄生虫检查、细菌分离鉴定、鉴别诊断和治疗的初步研究。结果显示,从病鸡体表检查到的禽刺螨为柏氏禽刺螨,PCR扩增其线粒体细胞色素氧化酶亚单位1(CO 1)基因的576 bp大小靶片段与柏氏禽刺螨OB株核苷酸序列的同源性为99%;同时从丘疹病变组织中分离到1株阿尼蒂斯葡萄球菌,该葡萄球菌分离株不致死昆明小鼠,耐受青霉素、阿莫西林、环丙沙星、头孢他啶、复方新诺明、卡那霉素和强力霉素等13种受试药物;确定此疫病由鸡柏氏禽刺螨感染引起,灭鼠、杀螨和敏感药物抗菌措施具有良好防治效果。这是国内鸡发生柏氏禽刺螨感染的首次报道,为鸡禽刺螨感染的防控及相关研究提供了科学参考。
- 杨泽晓刘亚东李俐睿姚学萍王印周丽军蒙正群罗怡琳李岩
- 关键词：皮炎葡萄球菌
- 一株羊源海藻糖比伯斯坦菌的分离鉴定及生物学分析被引量：6
- 2018年
- 海藻糖比伯斯坦菌(Bibersteinia trehalosi)为人兽共患菌,但在我国的研究报道转少。本研究从病死羔羊肺脏组织中分离到一株革兰阴性短杆菌,对其进行了细菌分离、生化试验、16S rDNA和ropB基因的PCR扩增、小鼠致病性试验、药敏试验及四环素抗生素类与产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)等6种耐药基因的PCR检测。结果显示,该菌16S rDNA扩增序列与GenBank中B.trehalosi同源性达99%;其特异性rpoB基因PCR扩增条带与预期一致;对小鼠致病性强;对头孢哌酮、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素等多种抗生素均敏感,对青霉素、丁胺卡那、头孢拉啶耐药,仅扩增出约1 900 bp的BCT耐药基因片段,与公布的BCT基因序列同源性达99%,耐药表型与耐药基因检测结果一致,证明该分离菌株为B.trehalosi。本研究为该菌的有效防控与致病机理的研究奠定了基础,也为养殖临床用药提供参考。
- 罗怡琳蒙正群周丽君冷依伊尹清清王印姚学萍杨泽晓
- 关键词：药敏试验耐药基因
- 支气管败血波氏杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2018年
- 为建立支气管败血波氏杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,本研究根据波氏菌属毒力基因DNT设计一对特异性引物,通过优化,确定最佳反应条件,建立了支气管败血波氏杆菌荧光定量PCR检测方法。并对其进行敏感性、特异性、重复性试验以及临床样品的检测。以支气管败血波氏杆菌标准质粒为模板,建立标准曲线结果显示:标准品浓度在1.13×10~8拷贝/μL～1.13×10~2拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,相关数R^2=0.997;该方法的灵敏度可达1.13×10~1拷贝/μL。建立的荧光定量PCR方法与副猪嗜血杆菌、猪链球菌、金黄色葡萄球菌等12种细菌和伪狂犬病毒、猪瘟病毒等4种病毒无交叉反应,具有良好的特异性;批内变异系数(CV)均小于2%,批间变异系数均小于4%,具有良好的稳定性。对临床样品的检测结果显示该方法检测的阳性率为57.7%,与普通PCR的符合率为93.24%。本研究建立的方法可以用作支气管败血波氏杆菌感染的早期诊断、快速检测与定量分析。
- 尹清清德西措姆罗怡琳邬旭龙邬旭龙张鹏飞杨泽晓姚学萍
- 关键词：支气管败血波氏杆菌荧光定量PCR
