肖琳
- 作品数：15 被引量：16H指数：3
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金潍坊市科技局资助课题更多>>
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- 核糖核酸干扰沉默survivin基因对A549细胞增殖及顺铂敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果:成功构建pGenesil1。1-survivin重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性。
- 董俊红王振明王平肖琳黄焕生
- 关键词：SURVIVIN顺铂肺腺癌细胞
- 土拉菌套式PCR检测技术的研究被引量：4
- 2007年
- [目的]为快速诊断土拉菌病拟建立套式PCR技术。[方法]设计出2对特异引物,取1986年1月收集的13名土拉菌病患者的抗凝血及对照组细菌,提取DNA并进行套式PCR扩增。[结果]套式PCR检测到患者血液中土拉菌阳性率为84.6%,对照组细菌均为阴性。用直接PCR能观察到10条位于900 bp的暗带。而行套式PCR后能观察到11条亮度较高为于550 bp处的条带。[结论]套式PCR方法检测土拉菌具有特异性强、敏感性高,简便快速的特点。
- 宫英强新李金海张劲峰王雪鹤肖琳
- 关键词：套式PCR微孔板杂交
- 一种换液式多细胞共培养模拟失重实验装置
- 本发明公开了一种换液式多细胞共培养模拟失重实验装置，涉及多细胞培养技术领域，包括底座和培养单元；底座：左侧面固定有主电机，所述底座的内部转动连接有固定架，所述底座内部的左侧面安装有电刷滑环，所述主电机输出轴与固定架的左侧...
- 肖琳
- 沉默Survivin基因抑制SW480细胞的增殖及下调hTERT基因表达
- 目的观察生存素(SURVIVIN)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带Survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-Survivin,转染...
- 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训
- 关键词：SURVIVINHTERTSP1
- 文献传递
- 枸杞多糖对人肺癌A549细胞凋亡及Survivin表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨枸杞多糖(LBP)诱导人肺癌A549细胞的凋亡的作用及其作用机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的LBP,应用流式细胞仪FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法分析加药前后凋亡抑制基因Survivin mRNA和蛋白表达情况。结果流式细胞仪FITC/PI双染法检测结果显示LBP可诱导人肺癌A549细胞凋亡,并且随着LBP浓度增加,凋亡率逐渐增加;LBP可使Survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,并成一定的量效关系。结论 LBP可显著诱导人肺癌A549细胞凋亡,其作用机制可能与LBP抑制A549细胞凋亡抑制基因Survivin表达有关。
- 肖琳王平崔涛王守训
- 关键词：肺癌LBP细胞凋亡SURVIVIN
- 联合转染Survivin和hTERT对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响
- 目的:探讨联合转染Survivin短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)和hTERT shRNA对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据.
- 肖琳王平王守训董俊红
- 在SW480细胞中沉默survivin基因抑制细胞增殖及hTERT表达被引量：4
- 2013年
- 目的观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、hTERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性。构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性。结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44%(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P<0.01)。hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P<0.01)。Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P<0.01)。结论靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关。
- 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训
- 关键词：HTERTSP1
- hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素(survivin)基因表达的RNA共干扰载体,并检测其对人结肠癌SW480细胞中hTERT基因和survivin基因的干扰作用。方法根据Genbank提供的hTERT和survivin cDNA序列,设计、筛选出高效、特异性强的干扰序列,构建特异性干扰hTERT基因和survivin基因的重组体pGenesil-1.1-survivin、pGenesil-1.2-hTERT,酶切、测序鉴定正确后,两个重组体均用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,将pGenesil-1.1-survivin回收大片段,pGenesil-1.2-hTERT回收小片段,将回收大、小片段用T4 DNA连接酶定向连接,即构建成重组体pGenesil1.1-survivin-hTERT。将3个重组体分别转染SW480细胞,RT-PCR检测细胞中hTERT和survivin基因表达水平,MTT检测对SW480细胞增殖的影响。结果构建的各质粒经限制性酶切及DNA测序均证明其质粒构建正确,RT-PCR检测hTERT和survivin基因表达水平明显降低(P<0.05),各干扰质粒重组体对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。结论靶向survivin和hTERT基因的双干扰载体构建成功,为后续的结肠癌基因治疗研究奠定理论基础。
- 王平肖琳董俊红孙凤祥蒋吉英王守训
- 关键词：SURVIVINHTERT
- 具有碘吸附作用聚轮烷化共价有机框架材料及其制备方法和应用
- 本发明公开了具有碘吸附作用聚轮烷化共价有机框架材料及其制备方法和应用，属于化工技术领域。本发明将催化剂、β‑环糊精芳香族二胺包合物和芳香族三醛或芳香族四醛通过研磨进行预聚合，将研磨后的产物加入均三甲苯、1,4‑二氧六环和...
- 肖琳胡超超周宝龙彭福军徐龙武岳琪马莹莹张彬
- RNAi技术对A549细胞survivin基因表达及顺铂敏感性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的利用RNA干扰(RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入到载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR及免疫荧光法分析转染前后A549细胞survivin mRNA及蛋白的表达情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果成功构建pGenesil1.1-survivin重组质粒。转染重组质粒后,A549细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显降低;转染前顺铂对A549细胞的IC50明显高于转染后(P<0.05)。结论靶向survivin的RNAi表达载体能下调survivin基因表达,增强顺铂对A549细胞的药物敏感性。
- 董俊红王振明肖琳王平
- 关键词：RNA干扰SURVIVINA549细胞顺铂
