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邱健健

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：集美大学食品与生物工程学院更多>>
发文基金：国家海洋公益性行业科研专项更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇丝氨酸
  • 1篇丝氨酸蛋白酶
  • 1篇球石
  • 1篇微藻
  • 1篇克隆
  • 1篇活性
  • 1篇活性分析
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇海洋微藻
  • 1篇氨酸
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇集美大学

作者

  • 1篇蔡艺钦
  • 1篇李丽华
  • 1篇于鹏
  • 1篇刘静雯
  • 1篇邱健健

传媒

  • 1篇海洋学报

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
一种新的海洋微藻病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其活性分析被引量：1
2014年
从海洋球石藻 Emiliania huxleyi 病毒 EhV99B1的基因组中克隆了丝氨酸蛋白酶（Sp）基因（GenBank 登录号：KC161207），对该基因的开放阅读框（ORF）进行系统的生物信息学分析，并在大肠杆菌中融合表达，通过亲和层析法获得了纯化的重组 Sp。结果表明：EhV99B1-Sp 基因的 ORF 为1110 bp，编码368个氨基酸，蛋白相对分子质量为39．5 kDa；该基因片段与 GenBank 中 EhV86-Sp 的同源性很高，核苷酸及其对应的氨基酸序列同源性分别为95％和97％，而与其他物种 Sp 序列的同源性仅为28％～32％，说明其可能是丝氨酸蛋白酶家族中的一个新成员；预测的二级结构特征显示EhV99B1-Sp 的蛋白结构域中具有典型的 LTAGHC （组氨酸活性位点区域）和 AICNGDSGGPLF（丝氨酸活性位点区域）两个丝氨酸蛋白酶催化活性位点的氨基酸基序，是一个两次跨膜蛋白；将该基因在大肠杆菌中进行低温诱导表达，得到分子量为60 kDa 的重组蛋白，经鲤鱼肌肉丝氨酸蛋白酶（MB-SP）抗体检测证实为 Sp，且重组蛋白在大肠杆菌细胞中具有明显的生物学活性。本研究结果为进一步探讨 EhV99B1-Sp 在病毒与宿主相互作用过程中的调节作用及其功能与应用奠定基础。
李丽华邱健健蔡艺钦于鹏刘静雯
关键词：丝氨酸蛋白酶基因克隆活性分析
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