周翔
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：福建农林大学园艺学院园艺产品贮藏保鲜研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 中国水仙遗传转化研究进展(综述)被引量：4
- 2013年
- 中国水仙是我国传统名花,其栽培种一直存在三个问题:品种单一,繁殖速度有限,病毒积累严重。生物技术的发展为解决中国水仙目前存在的问题提供了新的途径。本文从外植体的预处理、愈伤组织和小鳞茎的诱导与分化、生根及移栽等方面概述中国水仙的组织培养进展,较详尽地阐述中国水仙基因工程的研究进展,并对中国水仙未来研究方向进行展望。
- 周翔冯莹潘东明
- 关键词：中国水仙
- 中国水仙ZDS反义基因表达载体的构建与转基因植株的获得被引量：2
- 2015年
- 【目的】构建中国水仙ZDS反义基因表达载体,为进一步研究ZDS基因的功能、改良中国水仙花色、培育花色新品种提供参考。【方法】以中国水仙花为材料,采用RT-PCR方法克隆其ZDS基因,通过PCR、双酶切、连接等方法将ZDS基因反向互补插入到pCAMBIA1301双GUS植物表达载体中,构建ZDS反义基因表达载体P1301-ZDS,再通过冻融法将重组质粒P1301-ZDS导入根癌农杆菌。采用根癌农杆菌介导法将ZDS反义基因转化中国水仙带盘鳞茎,通过直接、间接、延迟筛选法3种方法对侵染的带盘鳞茎进行抗性筛选,采用直接筛选法和逐步降低选择压(质量浓度)方法对抗性鳞茎进行增殖和分化培养,采用GUS组织化学和hyg基因的PCR检测方法对中国水仙转基因植株进行鉴定。【结果】成功构建了中国水仙ZDS反义基因表达载体P1301-ZDS;延迟筛选法为根癌农杆菌侵染带盘鳞茎的有效筛选方法,转化效率达到28.54%;逐步降低选择压法为抗性小鳞茎增殖和分化培养的有效培养方法;将65株抗性小苗在1/2 MS+0.2mg/L NAA+10mg/L Hyg+100mg/L Cef生根培养基中培养,获得了12株再生植株,转化率达到18.46%;检测结果表明,10株抗性植株hyg基因和gus基因已经整合到中国水仙的基因组中并稳定表达;1株抗性植株稳定表达hyg基因但gus基因未稳定表达,1株抗性植株2个基因均未稳定表达。【结论】构建中国水仙ZDS反义基因表达载体并侵染中国水仙带盘鳞茎,经抗性筛选后获得12株中国水仙转基因植株。
- 冯莹周翔潘腾飞郭志雄潘东明
- 关键词：中国水仙
