张又莉
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：武汉大学第二临床学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组腺病毒载体pAd-NY-ESO-1-EGFP的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的:利用细菌内同源重组法构建含人肿瘤特异性抗原的腺病毒质粒。方法:设计NY-ESO-1 cDNA扩增引物,从pET15b-NY-ESO-1质粒中扩增NY-ESO-1的DNA序列,与pShuttle-IRES-hrGFP-2进行连接,PCR和EcoRⅤ酶切鉴定重组质粒pShuttle-NY-ESO-1-EGFP,经Pm eⅠ酶切线性化后,转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183大肠杆菌,细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-NY-ESO-1-EGFP;质粒经PacⅠ酶切鉴定,DNA测序。结果:线性化的pShuttle-NY-ESO-1-EGFP转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183大肠杆菌,重组质粒经酶切获得一大于23 kb的大片段和4.5 kb的片段,PCR反应扩增出了340 bp的片段。结论:用细菌内同源重组法成功地构建了含NY-ESO-1的重组腺病毒质粒,为进行表达NY-ESO-1的重组腺病毒的制备及肿瘤特异性抗原NY-ESO-1的核酸疫苗在肿瘤方面的研究奠定了基础。
- 张又莉徐少勇王家宁黄永章王斌宋军郭凌郧
- 关键词：同源重组肿瘤特异性抗原NY-ESO-1腺病毒增强型绿色荧光蛋白
