魏畅
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鮰爱德华氏菌Ⅵ型分泌系统hcp基因的克隆及重组表达
- 通过克隆获得鮰爱德华菌LH51六型分泌系统溶血素共调节蛋白(HCP)编码基因hcp,该基因全长492bp,编码163个氨基酸。hcp编码蛋白的理论分子量为17.8kDa,等电点为5.21。氨基酸序列分析表明,鮰爱德华菌h...
- 李华魏畅叶仕根李强
- 关键词：HCP
- 文献传递
- 鮰爱德华氏菌Ⅵ型分泌系统hcp基因的克隆及重组表达
- 通过克隆获得鮰爱德华菌LH51六型分泌系统溶血素共调节蛋白(HCP)编码基因hcp,该基因全长492bp,编码163个氨基酸.hcp编码蛋白的理论分子量为17.8kDa,等电点为5.21.氨基酸序列分析表明,鮰爱德华菌h...
- 李华魏畅叶仕根李强
- 关键词：HCP
- 鮰爱德华菌Ⅵ型分泌系统hcp基因缺失株的构建
- 在成功克隆到鮰爱德华菌Ⅵ型分泌系统hcp基因的基础上,扩增得到hcp基因的上、下同源臂并分别与自杀质粒PDM4连接,成功构建了重组自杀质粒PDM4-hcp,将其转入S17-1λ(pir)并与带有Kan抗性的鮰爱德华菌共培...
- 魏畅叶仕根李华李强
- 关键词：HCP基因缺失
- 文献传递
- 鮰爱德华菌hcp基因的克隆及重组表达被引量：4
- 2013年
- 通过克隆获得鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluri LH51溶血素共调节蛋白(Hcp)编码基因hcp,该基因全长为489 bp,编码163个氨基酸,hcp编码蛋白的理论相对分子质量为17 800,等电点为5.21。氨基酸序列分析结果表明,鮰爱德华菌hcp基因与迟钝爱德华菌Edwardsiella tarda毒力蛋白EvpC(Hcp同源物)、发光杆菌Photorhabdus luminescens hcp基因等具有高度同源性。将鮰爱德华菌Hcp氨基酸序列连接至pGS-21a表达载体中,成功构建了pGS-21 a-hcp原核表达质粒;再将表达质粒转化至BL21(DE3)菌株后,经IPTG诱导、镍柱层析纯化获得大量携带GST和组氨酸双标签的融合蛋白。经SDS-PAGE和Western blot分析,确认获得了相对分子质量约为45 000的融合蛋白,并成功制备了具有较高效价的多克隆抗体。
- 魏畅李华叶仕根李强
- 关键词：基因克隆原核表达
- 鮰爱德华菌Ⅵ型分泌系统hcp基因缺失株的构建
- 在成功克隆到鮰爱德华菌Ⅵ型分泌系统hcp基因的基础上,扩增得到hcp基因的上、下同源臂并分别与自杀质粒PDM4连接,成功构建了重组自杀质粒PDM4-Δhcp,将其转入s17-1λ(pir)并与带有Kan抗性的鮰爱德华菌共...
- 魏畅叶仕根李华李强
- 关键词：HCP基因缺失
