目的·探讨鲨肝醇(batyl alcohol,BTA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的病理学改变的改善作用及其作用机制。方法·将孕16.5d的SD大鼠随机分为Saline组、LPS组、LPS+BTA组,羊膜腔注射LPS建立新生鼠BPD模型;LPS+BTA组在注射LPS同时及出生后1~7d每日注射BTA干预,其他2组注射等体积生理盐水。取出生第1、3、7日新生鼠肺组织,通过苏木精-伊红(H-E)染色和间苯二酚碱性品红染色观察肺泡化阻滞的改变;利用荧光定量PCR和ELISA法分别检测新生鼠肺组织中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)mRNA水平及蛋白表达量。体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,检测LPS诱导及BTA干预后IL-1βmRNA水平及蛋白表达量。分离SD大鼠骨髓巨噬细胞,给予LPS刺激和BTA干预,利用全转录组测序技术筛选BTA抑制炎症的可能靶点。结果·H-E染色结果显示,出生后第1、3、7日LPS+BTA组较LPS组肺泡数量增多、次级间隔数量增多、平均内衬间隔减小(均P<0.05);且经BTA干预后肺组织IL-1βmRNA及蛋白表达量均较LPS组下调(均P<0.05)。体外实验结果显示,LPS刺激后巨噬细胞IL-1βmRNA和蛋白均较Saline组显著增加(均P=0.000),加入BTA后两者均较LPS组减少(均P<0.05)。全转录组测序结果显示,BTA抑制血小板应答蛋白1(thrombospondin,Thbs1)、髓样细胞触发受体1(triggering receptor expressed on myeloidc ells1,Trem1)、表面抗原分化簇274(cluster of differentiation 274,Cd274)等促炎症因子基因的表达,促进补体C1qC链(complement C1q Cchain,C1qc)、RT1-Da(RT1 class Ⅱ,locus Da)、RT1-Db1(RT1 class Ⅱ,locus Db1)等抗炎因子基因的表达。结论·BTA可下调巨噬细胞中IL-1β的表达,抑制炎症反应,进而改善LPS诱导的BPD新生鼠肺组织病理学改变。
目的·探讨黄芪多糖APS-Ⅱ-2对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致绒毛膜羊膜炎诱发的肺泡化阻滞的改善作用及可能机制。方法·对孕16.5 d SD大鼠羊膜腔注射LPS,构建支气管肺发育不良模型。根据羊膜腔注入药物,将孕鼠随机分为对照组(Saline组)、LPS+Saline组、LPS+APS-Ⅱ-2组。LPS+APS-Ⅱ-2组新生鼠出生后第1~3日腹腔注射APS-Ⅱ-2溶液[50 mg/(kg·d)];Saline组和LPS+Saline组腹腔注射等体积生理盐水。取第1、3日新生鼠肺组织,苏木精-伊红(H-E)染色观察病理改变。SD大鼠骨髓巨噬细胞培养,分为PBS组、LPS+PBS组、LPS+APS-Ⅱ-2组,利用全转录组测序技术(RNA-sequence)筛选APS-Ⅱ-2抑制炎症的可能靶点。结果·APS-Ⅱ-2可改善新生鼠肺组织病理状态,LPS+APS-Ⅱ-2组大鼠出生第1日肺泡数较LPS+Saline组增多(P=0.033),第1、3日次级突起增多(P=0.002,P=0.026),第1、3日平均内衬间隔减小(P=0.006,P=0.004)。RNA-sequence结果显示APS-Ⅱ-2抑制一些炎症因子表达,如Toll样受体Tlr3、Tlr7、Tlr8;也促进一些有抗炎作用因子的表达,如花生四烯酸15-脂加氧酶Alox15和CD74。结论·APS-Ⅱ-2可通过调节炎症反应减轻LPS诱发的绒毛膜羊膜炎,进而改善支气管肺发育不良模型肺组织病理状态。
