华颖
- 作品数：9 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 植物耀素凝胶对阴道常见微生物生长的影响
- 2021年
- 目的研究植物耀素凝胶对阴道常见微生物生长增殖的影响,为阴道炎症的预防提供理论依据。方法将植物耀素凝胶加入培养基中,采用比浊法和菌落计数测定其对微生物生长的影响;采用3,5-二硝基水杨酸法测定不同微生物对培养基中的碳源消耗量;通过菌落计数测定植物耀素凝胶对混合培养的鼠李糖乳杆菌和致病菌生长的影响。结果单独培养条件下,植物耀素凝胶可促进鼠李糖乳杆菌生长,其活菌浓度由(1.79±0.42)×10^(9) CFU/mL增加至(8.27±1.80)×10^(9) CFU/ml(P<0.01);抑制其他微生物生长,其中大肠埃希菌活菌浓度由(3.06±1.54)×10^(9) CFU/ml降至(9.40±0.07)×10^(3) CFU/ml(P<0.01),阴道加德纳菌活菌浓度由(3.34±1.02)×10^(7) CFU/ml降至(1.98±0.98)×10^(5) CFU/ml(P<0.01),白色假丝酵母菌生长活菌浓度由(3.00±1.17)×10^(7) CFU/ml降至(75.00±0.11)CFU/ml(P<0.001),干燥棒状杆菌无单菌落生长。鼠李糖乳杆菌对培养基中碳源相对消耗量为50.26%,呈中等消耗程度,其余菌对碳源消耗量为低或基本无消耗;混合培养条件下,植物耀素凝胶促进鼠李糖乳杆菌生长(P<0.05),进而抑制其他微生物生长:金黄色葡萄球菌活菌浓度由(4.39±0.45)×10^(15) CFU/ml降至(2.05±0.22)×10^(12) CFU/ml(P<0.01),大肠埃希菌活菌浓度由(1.27±0.70)×10^(9) CFU/ml降至(6.95±2.75)×10^(5) CFU/ml(P<0.01),干燥棒状杆菌无单菌落生长,白色假丝酵母菌活菌浓度由(3.95±1.72)×10^(7) CFU/ml降至(1.95±0.26)×10^(5) CFU/ml(P<0.01)。结论植物耀素凝胶能促进鼠李糖乳杆菌生长,从而抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、干燥棒状杆菌和白色假丝酵母菌的生长,有利于维持阴道微生态平衡,可应用于阴道炎症预防。
- 吴佳莉许仲田华颖张志凯付牧青万成松戴开金
- 关键词：鼠李糖乳杆菌
- 肠出血型大肠埃希菌O104∶H4转运蛋白AatA单克隆抗体制备及鉴定
- 2017年
- 目的表达肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的融合蛋白GST-Aat A,获得单克隆抗体。方法人工合成肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的转运蛋白基因aat A,连接至p MDl8-T载体,转化E.coli DH5α,双酶切回收,构建原核表达质粒PGEX-6P-1-GST-Aat A,测序鉴定后,转化E.Coli BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot分析目的蛋白的表达并纯化该重组蛋白。将纯化后的融合蛋白GST-Aat A免疫Balb/c小鼠,制备相应单克隆抗体;并对该单克隆抗体的纯度、亚型、效价、特异性进行鉴定和分析。结果构建的原核表达载体PGEX-6P-1-GST-Aat A能表达融合蛋白GST-Aat A;亲和层析纯化后融合蛋白GST-Aat A纯度达到95%,免疫小鼠后得到相应特异性单克隆抗体。结论成功制备出一株抗转运蛋白Aat A的单克隆抗体,该抗体为Ig G1亚型,特异性好,效价高,纯度可达97%。
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- 关键词：抗体特异性
- 沙眼衣原体荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2018年
- 目的建立沙眼衣原体实时荧光定量PCR检测技术,以期用于沙眼衣原体的感染检测。方法针对沙眼衣原体ompA基因序列保守区域设计引物和TaqMan探针,构建标准质粒并制作标准曲线,建立沙眼衣原体实时荧光定量检测方法,通过对人型支原体等的检测评价方法的特异性。结果建立的沙眼衣原体荧光定量PCR体系能特异性检测沙眼衣原体,与人型支原体、解脲脲原体、淋球菌、大肠埃希菌EDL933、金黄色葡萄球菌无交叉反应;标准曲线在3.9×109～3.9×103 copies/μl之间线性关系良好(r2=0.99);方法的灵敏度高,检测最低拷贝数为3.9copies/μl;组内及组间变异系数均<5%。结论建立的检测沙眼衣原体实时定量PCR方法特异、灵敏,可用于沙眼衣原体感染的早期筛查和临床快速诊断。
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- 关键词：沙眼衣原体实时荧光定量PCR
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 EspF蛋白与宿主Anxa6蛋白相互作用及其致病机制研究
- 肠出血型大肠埃希菌(Enterohaemorrhagic Escherichia coli，EHEC)O157∶H7是一种人类肠道病原菌，致病性强，可引起严重的出血性结肠炎、腹泻和溶血性尿毒综合症。1982年，O157∶...
- 华颖
- 关键词：致病机制
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株和回补株的构建被引量：1
- 2015年
- 目的利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的esp F基因及其核苷酸片段;建立以p BAD 33质粒为载体的esp F基因回补实验平台。方法设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD 46介导的重组系统帮助下,打靶片段和菌体esp F基因发生同源重组,PCR和测序验证;PCR扩增esp F及其核苷酸片段的整个ORF区序列,将其克隆入p BAD33质粒,分别将重组质粒转入相应的缺失株,以构建出相应的回补突变株。采用RT-PCR的方法验证在相应的回补突变株中esp F及其核苷酸片段是否转录。结果构建了esp F基因及其核苷酸片段缺失的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株和相应的回补株,且esp F基因及其核苷酸片段在回补株中均发生转录。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 esp F基因缺失株,并建立以p BAD33质粒为载体的EHEC O157:H7基因回补方法,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中esp F基因的调控机制奠定了基础。
- 华颖孙琦王湘雨杜艳丽邵娜张其威赵卫万成松
- 关键词：同源重组突变株
- 巢式-荧光定量PCR技术快速检测生殖支原体
- 2019年
- 目的建立生殖支原体巢式-荧光定量PCR快速检测技术。方法针对生殖支原体MgPa基因的保守片段(1414~1561bp),利用Primer express3.0设计引物及探针,巢式PCR扩增临床样本,纯化后克隆到载体,制备阳性标准品。优化PCR反应条件,研究其特异性、灵敏性和重现性。结果构建了含MgPa基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在101~109拷贝数之间有较好的线性关系。该方法检测阳性率高达15.4%,能特异性检测生殖支原体,而人型支原体、解脲脲原体、沙眼衣原体等检测为阴性;灵敏度高,可检测到10个拷贝数;3组重复试验的变异系数均小于3%。结论本研究建立了生殖支原体的快速检测技术,具有检测阳性率高、特异性强、灵敏度高、重现性好等特点。
- 付牧青薛耀华李以圣牛丛王湘雨华颖唐时幸万成松
- 关键词：生殖支原体
- 肠出血型大肠埃希菌O157∶H7EspF蛋白不同结构域诱导细胞凋亡机制研究
- 王湘雨华颖万成松
- 基于双分子荧光杂交技术筛选肠出血型大肠埃希菌O157∶H7 EspF蛋白的宿主结合蛋白
- 华颖王湘雨万成松
