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石建军
作品数:
2
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供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院
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发文基金:
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
蔡东晖
苏州大学生命科学学院
叶荣
苏州大学生命科学学院
陈学进
上海交通大学医学院附属新华医院
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石建军
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苏州大学学报...
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2008
1篇
2007
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一种改进的从细菌人工染色体中亚克隆DNA片段的方法
2008年
目的运用基于PCR的重叠区延伸法构建缺口修复载体,通过同源重组的方式从细菌人工染色体(BACs)中亚克隆DNA片段。方法用基于PCR的重叠区延伸法将线性化质粒骨架分子、较长的上游和下游同源臂(200~500bp)串联起来构建成缺口修复载体。将此载体电击转入含有BAC的EL350菌中,经热激诱导Red重组酶瞬时表达,使缺口修复载体与BAC发生同源重组。结果重叠区延伸法构建的两个缺口修复载体分别成功地从BAC中亚克隆得到目的DNA片断。结论该方法省去了酶切、连接、转化等繁琐的克隆步骤,大大缩短了实验周期,提高了实验效率,为基因组BAC测序过程中的缺口封闭及复杂的打靶载体构建提供了较为便捷的方法。
蔡东晖
石建军
叶荣
陈学进
关键词:
细菌人工染色体
基因改造兔技术平台的建设
兔是使用非常广泛的实验动物和经济动物。与小鼠相比,兔个体中等,血液量大,是研究心血管系统,肺部疾病,眼科疾病,药物毒性试验,代谢疾病的合适动物模型。因此,通过基因改造产生的兔变异株有着良好的应用前景和市场价值。首先,通过...
石建军
关键词:
基因改造
打靶载体
克隆胚胎
成纤维细胞
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