葛欣 作品数:14 被引量:47 H指数:4 供职机构: 河北大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省高等学校科学技术研究指导项目 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
趋磁细菌AMB-1生物矿化相关蛋白Mms6参与磁小体的合成 被引量:2 2015年 【目的】研究趋磁细菌AMB-1生物矿化相关蛋白Mms6与磁小体合成的关系。【方法】在液体静置培养条件和好氧条件下对AMB-1进行培养,分析基因mms6在不同培养条件下转录水平的变化;对基因mms6进行基因敲除,分析突变株的生长和产磁变化。【结果】基因mms6的转录水平随着磁小体的合成逐渐升高;mms6的突变导致菌株在液体静置培养条件下趋磁性降低约50%,但不会影响菌株的生长水平。【结论】基因mms6参与了趋磁细菌AMB-1胞内磁小体的合成。 王宽 葛欣 刘巍峰 陈冠军关键词:生物矿化 磁小体 食甲基菌吡咯喹啉醌生物合成相关基因的筛选及表型鉴定 被引量:1 2020年 目的:通过Tn5转座诱变筛选食甲基菌中吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成相关基因。方法:通过Tn5转座诱变食甲基菌J1-1,筛选PQQ合成水平变化明显的突变株,利用质粒拯救法鉴定突变位点,进而敲除对应基因验证其与PQQ合成的关系,再检测野生菌及敲除菌的NADH和NAD+含量。结果:构建了库容量为1.0×105的Tn5转座突变体库,筛选得到1株PQQ合成水平显著下降的突变株5-179,经鉴定Tn5转座子插入染色体第705454位,位于mpq-0708基因内部(705337~705933),该基因编码NADH醌氧化还原酶亚基C;通过同源重组敲除J1-1中mpq-0708基因,敲除菌在高产培养基中PQQ合成水平显著下降,仅为野生菌的3.15%,与5-179突变株表型相符;野生菌及敲除菌NADH与NAD+测定结果表明,NADH/NAD+比值代表的菌体能量代谢状态与PQQ生物合成及菌体生长显著关联。结论:mpq-0708基因可能通过能量代谢参与PQQ生物合成。 薄明井 寇航 陈静 张惟材 葛欣 熊向华关键词:吡咯喹啉醌 能量代谢 一株吡咯喹啉醌产生菌的筛选和初步鉴定 被引量:4 2018年 目的:筛选新的吡咯喹啉醌(PQQ)产生菌株。方法:收集土壤样品富集培养,分离菌株,NBT染色法快速筛选PQQ产生菌,经Native-PAGE复筛,NBT-Gly法和分光光度法相结合测定菌株PQQ产量;选取产量最高的1株菌考察菌株生长条件,扩增16S rDNA并测序,Blast比对分析确定菌株分类位置。结果:从500余份土壤样品中筛选得到1株PQQ产生菌T28,PQQ产量达13.3 mg/L。该菌株16S rDNA序列与生丝微菌的同源性为96%,确定了T28的最适生长培养基配方。结论:从土壤中筛选到1株新的PQQ产生菌,命名为生丝微菌T28。 杨亚欣 刘天 李彤 孙晓宇 汪建华 熊向华 张惟材 葛欣关键词:吡咯喹啉醌 接合菌蓝光受体蛋白研究进展 被引量:4 2018年 光信号是一种重要的环境因子,尤其是蓝光可以调控真菌的生长发育、生理周期、基因表达及多种代谢活动。接合菌亚门的真菌对环境信号特别是对光刺激感应灵敏,具有明显的趋向性,是研究真菌信号感应的理想材料,而同时具有无性生殖和有性生殖的特点也使之成为研究性别决定的模型。接合菌处于真菌进化的早期,进化地位低,其多拷贝的蓝光受体蛋白在长期进化过程中形成了完善的光受体系统,能够感应不同波长、光强和方向的蓝光和近紫外光,在接合菌的趋光性和类胡萝卜素合成以及无性生殖和有性生殖等光响应过程中发挥承上启下的重要作用。以接合菌中的代表菌株为例,总结了目前在接合菌中报道的蓝光受体蛋白,从基因发现、功能鉴定、光化学特性和调控途径等方面进行了比较分析,进而从3个方面详细阐述了与高等植物不同的接合菌中光受体蛋白调控的特殊生理过程;最后对以后接合菌蓝光受体蛋白的研究重点和难点进行了思考和展望,旨为相关研究者系统了解接合菌蓝光受体蛋白的功能和发展趋势提供线索和参考。 葛欣 崔天琦 李兴旺 谢录翰 辛琪关键词:趋光性 基于提高学生综合能力的生物化学实验考评体系建设 被引量:4 2016年 实验考评是研讨教学规律、检查教学质量的重要依据。本文根据河北大学生命科学学院生物化学实验课程教学的具体情况,建立了适合本院的考评体系,该体系能全面、客观、公平地反应学生的实验情况,有利于提高学生的综合能力,也利于教师对教学效果进行评估。 倪志华 周艳芬 张瑞英 张晗 孙磊 葛欣 武金霞关键词:生物化学实验 考评体系 教学改革 利用常压室温等离子体诱变选育三孢布拉氏霉菌类胡萝卜素产量差异菌株 被引量:1 2019年 为筛选β-胡萝卜素产量差异菌株,通过常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,简称ARTP)诱变三孢布拉氏霉菌孢子,研究不同处理时间对三孢布拉氏霉菌存活率的影响,建立有效的筛选方案,经由洛伐他汀筛选,菌丝产生不同的颜色差异,初步获得β-胡萝卜素产量差异菌株。结果表明,随着ARTP诱变处理时间的增加,其致死率逐渐增高,较为理想的处理时间为160~200 s;洛伐他汀扩大了突变体之间的颜色差异,促进了正突变株的产生;传代并纯化突变体,获得洛伐他汀筛选菌株10株,其中深黄4株、黄色3株、浅黄2株、白色1株,正突变菌株β-胡萝卜素产量上升48.6%,负突变株产量下降16.5%。 谢录翰 康春婷 孙菊鲜 侯婕 葛欣关键词:三孢布拉氏霉菌 洛伐他汀 Β-胡萝卜素 诱变选育 通过突变甲醇脱氢酶启动子提高甲基营养菌吡咯喹啉醌产量 被引量:2 2019年 目的:考察甲基营养菌J1-1甲醇脱氢酶启动子活性与吡咯喹啉醌(PQQ)产量的相关性。方法:通过定点突变甲醇脱氢酶P0771启动子,利用lacZ作为报告基因检测突变启动子的转录水平,筛选出活性下降的突变启动子在J1-1中替换天然启动子获得突变菌株,检测突变菌株甲醇脱氢酶表达、酶活以及菌体生长和PQQ产量。结果:定点突变了7个P0771启动子,利用lacZ作为报告基因筛选出2个启动活性较天然启动子下降的突变启动子P0771-1、P0771-5,替换J1-1中天然启动子获得的突变菌株甲醇脱氢酶酶活都低于J1-1,在增菌培养基中其PQQ的合成水平分别提高约9.76%、11.6%。结论:通过启动子突变,降低甲醇脱氢酶启动子活性可以提高J1-1的PQQ产量。 孙晓宇 薄明井 杨亚欣 张惟材 葛欣 熊向华关键词:甲基营养菌 定点突变 甲醇脱氢酶 吡咯喹啉醌 细菌单杂交方法在筛选甲基营养菌甲醇脱氢酶启动子结合蛋白中的应用 被引量:2 2018年 为了构建甲基营养菌转录因子亚文库及筛选与甲醇脱氢酶启动子DNA相互作用的蛋白质,对甲基营养菌MP688的基因组和转录组数据进行分析,使用关键词对全基因注释信息和转录组结果进行搜索,找到相关基因的核苷酸序列,通过PCR获得目的片段并构建一系列转录因子亚文库,利用细菌单杂交系统筛选转录因子亚文库找到与甲醇脱氢酶启动子具有相互作用的调控因子。成功构建完成含有32个转录因子的亚文库,建立了甲基营养菌中细菌单杂交筛选方法,通过该方法筛选出2个与甲醇脱氢酶启动子具有强相互作用的转录因子基因。对于基因组已测序的细菌来说,构建转录因子亚文库筛选效率要优于构建基因组文库和c DNA文库,细菌单杂交系统能成功用于甲基营养菌,并能快速高效地筛选与启动子具有相互作用的转录因子。这一方法的建立,为阐明甲醇脱氢酶在甲基菌生长和代谢产物合成中的调控机制奠定了基础。 邹琪琪 齐姗姗 谢录翰 辛琪 李俊乐 张梦宁 葛欣关键词:文库构建 建立趋磁螺菌AMB-1非产磁突变株的筛选和新功能筛选方法的 趋磁螺菌AMB-1是一株微好氧的磁细菌,生长缓慢,条件比较苛刻,对氧气敏感,遗传操作相对比较复杂。利用自主转移自杀型转座子质粒随机整合到基因组上的方法,对大肠杆菌和趋磁螺菌AMB-1的接合条件进行了优化,然后对大量的接合... 葛欣 薄涛 张小葵 刘巍峰 陈冠军文献传递 5种内生真菌对玉米幼苗抗干旱的胁迫作用 被引量:4 2018年 为了研究干旱胁迫下内生真菌对玉米幼苗生长的影响和筛选具有提高玉米抗旱潜能的优良菌种,在温室盆栽条件下,将分离自新疆荒漠盐生植物根系的5种内生真菌Curvularia inaequalis、Fusarium avenaceum、Neocamarosporium sp.AS65231、Pleosporales AS29261和Ulocladium sp.AS91282分别接种到玉米幼苗根系,进行干旱胁迫培养6周,测定苗期玉米的株高、生物量、可溶性糖含量、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量。研究结果表明:干旱胁迫下,与不接菌对照相比,接种C.inaequalis、F.avenaceum、Pleosporales AS29261和Ulocladium sp.AS91282可显著提高玉米幼苗地下生物量(P<0.05),而接种Neocamarosporium sp.AS65231对其影响不显著;接种F.avenaceum和Ulocladium sp.AS91282可极显著提高玉米根系可溶性糖含量(P<0.01);接种C.inaequalis、Pleosporales AS29261和Ulocladium sp.AS91282对根系POD活性影响不显著,而F.avenaceum和Neocamarosporium sp.AS65231显著降低了根系POD活性;接种Neocamarosporium sp.AS65231和Ulocladium sp.AS91282显著降低根系的MDA含量(P<0.01)。然而,与不接菌对照相比,接种5种内生真菌对玉米幼苗的株高、地上生物量和总生物量,以及叶片的可溶性糖含量、POD活性和MDA含量等均无显著影响。综合比较来看,干旱胁迫下接种内生真菌Ulocladium sp.AS91282对促进玉米幼苗抗干旱能力优于其他4种菌。 胡美玲 郑勇 孙翔 姚慧 李家龙 葛欣 郭良栋关键词:内生真菌 盐生植物 POD MDA