蔡亚飞
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：安徽师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达被引量：6
- 2008年
- 以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况。试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×108TU.mL-1(TU:转染单位),在C127细胞中为5×107TU.mL-1,在鸡胚胎成纤维细胞(CEF)中约为1×106TU.mL-1,病毒在鸡原生殖细胞(cPGC)中转染效率最低为1×102TU.mL-1。病毒的感染可引起细胞表型的不利改变。用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53%;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征。
- 徐世永丁红梅孙岩王蒙蔡亚飞刘红林
- 关键词：慢病毒载体转基因鸡绿色荧光蛋白
- 狼山鸡-AA肉鸡嵌合体的制作及其转基因鸡研究被引量：5
- 2007年
- 试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体。共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%。获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%。对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾丸发育异常。PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,2只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞。结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因鸡是可行的。试验Ⅱ:利用脂质体介导法,在体外将外源pEGFP质粒转入到鸡X期胚胎细胞中,培养8 h开始有外源基因的表达,体外培养12 h后获得了21.43%的转染效率。将转染后的鸡胚盘细胞移入到受体AA肉鸡的胚下腔,孵化6 d后在8个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为40%(8/20)。
- 李建许陈杰蔡亚飞刘健徐世永刘红林
- 关键词：胚盘细胞嵌合体转基因狼山鸡AA肉鸡
