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何首乌ISSR-PCR反应体系的建立与优化被引量：12: 2008年; 目的建立和优化ISSR-PCR反应体系。方法通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响。结果建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100 ng模板、1.5 UTaqDNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs。扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45 s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。结论这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序。; 赵振华严萍焦旭雯赵树进; 关键词：何首乌

基于rDNA ITS序列的何首乌PCR-RFLP分子鉴别被引量：7: 2009年; 对何首乌及其常见混淆品的核糖体DNA内转录间隔区（rDNAITS）序列进行了测序分析．结果表明：何首乌与其混淆品毛脉蓼、翼蓼及耳叶牛皮消ITSI区的差异率分别为6．91％、18．10％和42．20％，ITS2区的差异率分别为10．00％、19．40％和43．90％；而何首乌种内各居群间ITS1和ITS2区的差异率分别为0．00％～2．13％和0．00％～1．03％．基于何首乌及其混淆品的rDNAITS序列的差异，找出一个位于ITS2间隔区的何首乌特征性M6I酶切位点，用M6I酶对何首乌rDNAITS序列扩增产物酶切后得到含约531bp和109bp的两片段的聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）图谱，而其混淆品的rDNAITS序列扩增产物不能被NsbI酶切，故图谱呈单一条带．利用建立的PCR．RFLP方法可以很好地区分何首乌及其混淆品．; 郑传进赵树进赵振华呙军; 关键词：何首乌分子鉴别

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赵振华