王方方
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 根皮素引起前列腺癌LNCaP细胞发生凋亡的机制研究被引量：1
- 2017年
- 根皮素是存在于苹果、梨等水果及多种蔬菜汁液中的天然活性物质,具有抗肿瘤活性,能够有效地诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖.本研究初步探讨了根皮素诱导前列腺癌LNCaP细胞的凋亡和相关分子机制.通过形态学观察、噻唑蓝(MTT)比色实验、CCK-8实验测定前列腺癌细胞活性;采用DAPI染色法测定细胞核凝缩破裂;运用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定前列腺癌细胞的凋亡率;再通过PI单染流式细胞术测定前列腺癌细胞的周期变化;以及采用Western blot检测PI3K/AKT信号通路及其下游细胞凋亡相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达.实验结果表明:根皮素诱导前列腺癌LNCaP细胞周期阻滞在G2/M期,并呈浓度依赖性降低细胞活性、增加细胞核凝缩破裂,显著提高前列腺癌细胞的凋亡率.在分子机制上,根皮素呈现浓度依赖性下调PI3K/AKT的活性,从而影响细胞凋亡相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达.因此,根皮素对前列腺癌细胞的生长有显著的抑制作用,对治疗前列腺癌具有潜在的临床应用价值.
- 康丹吴朝蒙曹润怿王方方田倩刘平
- 关键词：细胞凋亡细胞周期PI3K/AKT信号通路前列腺癌
- CXCL13参与AR促进前列腺癌细胞体内异种移植瘤的生长被引量：2
- 2018年
- CXCL13作为受AR调节的靶基因之一,参与AR在几株前列腺癌细胞系中的调节功能已有报道.本研究进一步探讨在裸鼠皮下异种移植瘤模型中CXCL13参与AR对前列腺癌增殖作用的调节,从而验证体外实验的结果.选用CRPC细胞系CWR22Rv1筛选稳定表达AR-N或CXCL13的细胞株,分为CWR22Rv1(对照)、CWR22Rv1/AR-N、CWR22Rv1/AR-N+si CXCL13、CWR22Rv1/CXCL13 4个组别,裸鼠皮下成瘤30 d后,解剖取瘤.其中CWR22Rv1/AR-N+si CXCL13组为用CWR22Rv1/AR-N细胞成瘤至100 mm^3后,再瘤内注射si CXCL13,每3 d一次,共注射3次.通过形态学观察、测定裸鼠体重和肿瘤大小,发现过表达AR和CXCL13组肿瘤明显大于对照组,而过表达AR再抑制CXCL13组肿瘤明显小于过表达AR组,也比过表达CXCL13组略小,但各组小鼠的体重没有明显变化; Western blot和免疫组织化学结果显示过表达AR-N或CXCL13均能提高ETS-1、Cyclin B1和Snail的表达,而敲减CXCL13后显著削弱AR的调节作用.表明CXCL13参与AR调节前列腺癌细胞小鼠体内异种移植瘤的生长.
- 田倩曹润怿王方方董佳杰柯敏卢山刘平
- 关键词：CXCL13ETS-1CYCLIN前列腺癌
- 根皮素诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡并抑制其裸鼠移植瘤的生长
- 2017年
- 目的 :探讨根皮素对前列腺癌PC-3细胞凋亡和周期的影响,及对其裸鼠移植瘤生长的影响。方法 :不同浓度的根皮素(0、20、50和100μmol/L)分别作用于人正常前列腺基质细胞WPMY-1和前列腺癌PC-3和DU145细胞24 h后,倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化,并采用CCK-8法检测各组细胞活性的变化。用不同浓度的根皮素(0、20、50和100μmol/L)处理PC-3细胞24 h后,采用DAPI染色法观察细胞核破裂的情况,FCM法检测根皮素处理后前列腺癌PC-3细胞凋亡率和细胞周期分布的变化;同时,采用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(cleaved-poly ADP-ribose polymerase-1,cleaved-PARP-1)、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8、cleaved-caspase 9、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、survivin、Bcl-2、Bax以及细胞周期蛋白cyclin B1表达水平的变化。建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察根皮素腹腔注射治疗后小鼠移植瘤生长体积以及体质量的变化,并计算抑瘤率。采用蛋白质印迹法检测小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达水平。结果:根皮素浓度为50和100μmol/L时,对人正常前列腺基质细胞WPMY-1的形态没有影响,仅对前列腺癌PC-3和DU145细胞的形态有影响。与空白对照组相比,根皮素浓度为20、50和100μmol/L时对前列腺癌PC-3和DU145细胞活力均有明显的抑制作用(P值均<0.01)。采用浓度为20、50和100μmol/L的根皮素处理PC-3细胞24 h后,PC-3细胞的核破裂率分别为(27.0±2.0)%、(47.0±1.5)%和(63.0±3.0)%,明显高于空白对照组的(3.0±1.0)%(P值均<0.001);凋亡率分别为(20.0±1.0)%、(32.0±2.0)%和(42.6±1.5)%,明显高于空白对照组的(4.0±1.0)%(P值均<0.001)。根皮素(100μmol/L)处理PC-3细胞24 h后,细胞中cleaved-PARP-1、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8和cleaved-caspase 9蛋白的表达水平均较空白对照组明显升高(P值均<0.01
- 康丹尹莹莹王方方曹润怿田倩卢山刘平
- 关键词：前列腺肿瘤细胞周期细胞凋亡
