卢开阳
- 作品数：2 被引量：15H指数：1
- 供职机构：云南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于16S rRNA序列分析南糯山不同生境茶树根际土壤细菌群落分布多样性被引量：14
- 2016年
- 采用平板涂布分离法,探究南糯山古茶树和台地茶根际土壤细菌群落结构的多样性和差异性.针对不同种植环境下的大叶种茶树根际土样20份,采用6种培养基分离纯化共得到800株菌,通过形态学特征去重复后,得到250株代表菌株进行16S rRNA基因序列分析鉴定,共分布于17个科26个属,分属于放线菌门(Actinobacteria),厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria).其中古茶树生境分离到20个属,台地茶生境分离到17个属,在属一级水平,古茶树生境具有更高的多样性.两生境共有类群在属一级有11个,占42%.基于属间相对分离频率(RF)的t检验P=0.03(<0.05),不同生境下的细菌群落组成差异性显著,而丰富的链霉菌(Streptomyces)类群则是该区域茶树根际细菌群落组成的一个显著特征.
- 卢开阳张云峰贾鳗高林瑞田飞唐蜀昆
- 关键词：根际土壤
- 灯盏花CHI基因的再克隆及其绿色荧光蛋白表达载体构建被引量：1
- 2016年
- 根据灯盏花转录组所注释的CHI unigene片段,设计了RACE相关引物,克隆到灯盏花CHI的cDNA全长序列,序列全长717bp,编码238个氨基酸.该氨基酸序列与我们前期所克隆的灯盏花CHI cDNA序列相比,在345、351位点发生了突变,碱基均由C突变为T,两个位点的突变均属于同义突变,编码的氨基酸分别为115、117位异亮氨酸、酪氨酸.同时将CHI基因片段插入到pDM 18-T,构建pDM 18-T-eBCHI中间载体.经测序验证后,根据pBI121-EGFP图谱,设计带有SalI、SpeI酶切位点的引物,以pDM 18-T-eBCHI中间载体为模板,扩增带酶切位点的CHI序列,扩增产物经回收、纯化后与双酶切的pBI121-EGFP链接,构建了重组表达载体pBI121-EGFP-CHI,CHI基因插入植物表达载体pBI121-EGFP的6xHis组氨酸标签与GFP基因间.经SalI、SpeI双酶切和PCR验证重组质粒,均能得到约750bp的目的片段,通过进一步测序证明,CHI基因已成功地连接到pBI121-EGFP-eBCHI中.采用电击转化法将重组质粒导入根癌农杆菌GV3101,用叶盘法转化灯盏花叶片,筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,经PCR扩增和叶绿素荧光成像检测证明,重组基因已成功地转化到灯盏花愈伤组织中.为利用转基因技术研究CHI基因的表达及其亚细胞定位打下基础.
- 木佳应宇翔张云峰何凤明卢开阳官会林严胜柒
- 关键词：灯盏花查尔酮异构酶绿色荧光蛋白
