吴莹莹
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金浙江省重点科技创新团队项目浙江省农业科技成果转化资金项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 副溶血性弧菌PMA-LAMP方法的建立被引量：9
- 2016年
- 副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,在海鲜等食物中检出率很高,食用没有煮熟的带菌食物或者腌制品,极易引起食物中毒。目前用以检测副溶血性弧菌的快速检测方法都不能区别死活菌,容易出现假阳性结果。本研究基于DNA结合染料叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA),利用荧光染料钙黄绿素(Calcein)的特性,建立了一种实时的可视化环介导等温扩增方法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并与q PCR方法进行比较。实时可视化LAMP方法的反应结果,既可以肉眼直接观测,也可以借助荧光分析设备实时监测,并对半定量分析进行初探,为之后向定量分析深入研究打下基础。实验结果表明,实时可视化PMA-LAMP方法的灵敏度可达5.0×102 CFU/m L,模拟食样灵敏度为1.9×102 CFU/m L,与PMA-q PCR方法结果一致。除去前增菌时间,整个检测过程只需2 h,且准确率高,为副溶血性弧菌快速检测的开展提供了有效的技术支持。
- 马骉吴莹莹戴明雁方结红张明洲
- 关键词：副溶血性弧菌实时荧光定量PCR
- 庆大霉素人工抗原及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2014年
- 为研究建立庆大霉素的免疫分析技术，合成庆大霉素人工抗原：采用碳二亚胺法将庆大霉素（gentamicin，GM）偶联到牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清蛋白（OVA）上，分别合成免疫原GM-BSA和包被原GM-OVA。通过紫外扫描和SDS-PAGE垂直电泳鉴定证明人工抗原偶联成功。以GM．BSA为免疫原，采用新的动物免疫方案免疫新西兰大白兔，获得抗庆大霉素抗血清。在本次免疫新方案中，在动物的生命周期内获得了多于普通免疫的血清量，在多抗血清的制备上是一次抗体工程上的尝试。通过间接酶联免疫对抗血清效价和灵敏度进行跟踪检测，结果表明抗血清效价在九免后稳定在1：20000左右，IC50则稳定在3ng／mL左右。并在八免血清基础上建立了GM间接竞争ELISA法。结果表明，庆大霉素浓度在0．3-243ng／mL，方法的线性回归方程为y=-0．10091nx＋0．6093和R2=0．9845，方法的检测灵敏度IC50=2．954ng／mL，最低检测限IC10=0．056ng／mL。该研究结果为多抗血清制备在量上的突破提供了思路，同时为研制庆大霉素试剂盒提供了良好的基础。
- 许耀心龚云飞陈宗伦奚茜戴明雁吴莹莹刘啊敏张明洲
- 关键词：庆大霉素人工抗原多克隆抗体
