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高活性酯酶突变体及其应用: 本发明属于酶工程与基因工程领域，提供了一种高活性BHET水解的酯酶突变体，由在氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的野生型酯酶（lg4）基础上，经过氨基酸位点突变S206T、P232A或G233A得到。本发明还提供了编...; 刘卫东李志帅高健韩旭韦泓丽李倩李金山马延和

来源于Exophiala aquamarina的新型玉米赤霉烯酮水解酶的性质及底物结合中心关键氨基酸的功能研究被引量：1: 2021年; 目的:开发一种对α-玉米赤霉烯醇(α-zearalenol,α-ZOL)催化活性高的水解酶,以促进玉米赤霉烯酮的酶法完全脱毒,推动玉米赤霉烯酮降解酶在饲料业和畜牧业的应用。方法:在NCBI数据库中通过基因挖掘获得一个来源于Exophiala aquamarina CBS 119918的新型玉米赤霉烯酮水解酶EaZHD,基因全长792 bp。构建重组质粒pET46-Eazhd,并在大肠杆菌中成功表达。经NiNTA亲和层析和DEAE阴离子交换柱纯化后,利用HPLC测定残余底物浓度的方法来表征其酶学性质。结果:EaZHD对玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的酶活力为0.764 U/mg,而对α-ZOL的酶活力为1.529 U/mg,是对底物ZEN降解活力的2倍。Ea ZHD在p H 8.6和温度40℃条件下的活性最高,并具有较好的热稳定性和碱性条件下较高的p H稳定性。通过对Ea ZHD活性中心附近的氨基酸进行突变和活性分析,确定了对催化活性起关键作用的三个氨基酸,以及对底物特异性有影响的两个关键氨基酸。结论:为推动饲料业和畜牧业中玉米赤霉烯酮的酶法脱毒奠定了基础。; 梁爱玲刘文婷武攀李倩高健张洁刘卫东贾士儒郑迎迎; 关键词：酶学性质

一种双烯内脂水解酶突变体及其应用: 本发明公开了一种双烯内脂水解酶突变体及其应用。本发明公开的双烯内脂水解酶突变体，为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列4的蛋白质；A2)将序列表中序列4中第162位外的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取...; 刘卫东高健韩旭韦泓丽李倩赵夷培李金山马延和

高活性PET水解酶突变体及其应用: 本发明公开了高活性PET水解酶突变体及其应用。本发明提供了蛋白，为如下1)‑11)中任一种：1)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸，且将第251位的精氨酸突变丙氨酸，其他位置的氨基酸残基不变...; 韩旭刘卫东郑迎迎高健商娜李倩韦泓丽黄建文陈纯琪郭瑞庭; 文献传递

羧酸酯酶突变体及其应用: 本发明公开了羧酸酯酶突变体及其应用。本发明公开的羧酸酯酶突变体为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列4的蛋白质；A2)将序列表中序列4中第429位外的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或...; 刘卫东韩旭高健韦泓丽李倩武攀李金山马延和

工业应用导向的蛋白质结构与功能研究进展被引量：5: 2022年; 在蛋白质工程、绿色生物制造以及合成生物学等研究领域中,对重要催化反应的重塑和合成路径的优化搭建,都依赖于对相关蛋白质结构与功能的深入了解。合成生物技术近年来的飞速发展对关键菌种及生物催化过程中的蛋白质的性能提出了更高要求,相关研究的关键是获得大批量、高纯度目的蛋白,并进行快速、准确的构效关系研究。中国科学院天津工业生物技术研究所建所10年来,在工业蛋白质领域进行了多年的积累,成功搭建成了蛋白质结构生物学平台;并在植物天然产物合成相关萜类合成酶、白色污染降解的聚对苯二甲酸乙二酯(polyethylene terephthalate,PET)塑料降解酶以及生物质转化利用相关酶等方面获得了一些进展,通过对这些蛋白进行结构和功能的研究,为许多研究工作提供了理论依据。蛋白质结构功能研究相关技术的不断发展,将加速合成生物学的学术和工业应用研究,推动我国生物制造领域的科技创新升级。; 韩旭李倩韦泓丽郑迎迎商娜陈纯琪郭瑞庭郭瑞庭刘卫东; 关键词：蛋白质工程

高活性PET水解酶突变体及其应用: 本发明公开了高活性PET水解酶突变体及其应用。本发明提供了蛋白，为如下1)‑11)中任一种：1)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸，且将第251位的精氨酸突变丙氨酸，其他位置的氨基酸残基不变...; 韩旭刘卫东郑迎迎高健商娜李倩韦泓丽黄建文陈纯琪郭瑞庭; 文献传递

双烯内酯酶突变体及其应用: 本发明公开了双烯内酯酶突变体及其应用。本发明提供了蛋白质，将序列表中序列2所示的氨基酸序列上第194位氨基酸残基突变，其他位置的氨基酸残基不变，得到具有PET水解酶活性的蛋白；本发明利用定点突变技术将原有双烯内酯酶(Ht...; 刘卫东高健陈阳阳韩旭张洁李倩徐娜娜顾群李金山马延和

一种脂肪酶突变体及其应用: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其应用。本发明公开的脂肪酶突变体为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列4的蛋白质；A2)将序列表中序列4中第188和279位外的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺...; 刘卫东高健韩旭李倩韦泓丽陈阳阳李金山马延和

重组固氮菌腈水合酶催化3-(4-氯苯基)戊二腈的选择性水解: 2013年; 通过基因数据挖掘方法(genome mining)获得了来源于固氮菌Herbaspirillum seropedicae SmR1中的腈水合酶基因hsn1。构建了hsn1/pETDuet-1/BL21的大肠杆菌共表达重组菌,经IPTG诱导获得了具有良好催化能力的Co2+依赖型腈水合酶HSN1。利用全细胞反应研究了HSN1的底物谱,发现HSN1对底物3-(4-氯苯基)戊二腈有良好的区域选择性及一定的对映选择性,它可以选择性地水解1个腈基得到3-(4-氯苯基)-4-氰基丁酰胺,该化合物可通过一步化学反应合成巴氯芬。; 李倩任杰冯进辉吴洽庆朱敦明; 关键词：腈水合酶

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李倩