王红娟
- 作品数：12 被引量：92H指数：6
- 供职机构：南京农业大学园艺学院中药研究所更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金江苏省科技支撑计划项目国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 桔梗同源四倍体诱导及其基因组DNA甲基化差异分析被引量：7
- 2016年
- 为探究桔梗同源四倍体与二倍体试管苗外观形态差异的表观遗传变化,先将桔梗二倍体不定芽用不同浓度的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液浸泡后进行组织培养,并通过流式细胞仪和根尖染色体鉴定相结合的方法鉴定倍性。在获得桔梗同源四倍体的基础上,采用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术探究二倍体与四倍体植株之间的DNA甲基化水平及其模式变化。结果表明0.2%的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液处理桔梗不定芽12 h是诱导桔梗同源四倍体的最适条件,其诱导率达到32.0%;四倍体与二倍体植株在外观形态上存在明显差异,经过DNA甲基化差异分析,20对引物扩增的1 586条带中二倍体有764条,四倍体有822条。二倍体总甲基化率、全甲基化率和半甲基化率分别为92.15%,61.52%,30.65%,而四倍体为86.13%,54.38%,31.75%,与二倍体相比,其同源四倍体总甲基化率降低6.02%,全甲基化率降低7.14%,而半甲基化率升高1.6%,说明染色体加倍后其DNA表观遗传模式发生了变化。
- 韩盼盼王红娟向增旭
- 关键词：桔梗同源四倍体DNA甲基化MSAP
- 铁皮石斛同源四倍体与二倍体基因组及甲基化差异分析被引量：5
- 2015年
- 采用扩增片段长度多态性(AFLP)和甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术,探讨铁皮石斛二倍体经染色体加倍后得到四倍体的过程中,遗传差异和基因组DNA甲基化水平及模式变化情况,分析了铁皮石斛二倍体与同源四倍体的基因组变异及甲基化差异。AFLP结果显示,在25对引物组合扩增的1006条带中,474条为多态性带,多态率为47.12%;在甲基化水平上,二倍体铁皮石斛总甲基化率为92.64%,全甲基化率为62.06%,半甲基化率为30.58%,同源四倍体对应的甲基化率分别为88.68%、64.50%、24.17%。甲基化模式分析显示,铁皮石斛同源四倍体有28.63%的位点发生了去甲基化,30.63%的位点发生了过甲基化。铁皮石斛同源四倍体DNA碱基序列发生改变,总甲基率低于其二倍体,且其甲基化模式发生了较大调整。本研究为进一步探索四倍体铁皮石斛的表观遗传调控机制与基因组变异机理奠定了基础。
- 李雅婷王红娟向增旭
- 关键词：铁皮石斛同源四倍体DNA甲基化AFLPMSAP
- 茅苍术同源四倍体离体诱导与鉴定被引量：7
- 2015年
- 本研究通过离体诱导的方式进行茅苍术同源四倍体新种质的创制,采用正交设计法优化茅苍术无菌快繁体系,以茎尖为外植体进行四倍体的离体诱导,采用形态鉴别、根尖染色体鉴定和流式细胞仪分析相结合的方法进行同源四倍体的鉴定。结果表明:茅苍术最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.20mg·L-1;用0.20%的秋水仙素处理12h为诱导茅苍术同源四倍体的理想条件,四倍体诱导率高达36%。本试验共诱导鉴定获得了23个茅苍术同源四倍体株系,为进一步开展优质高产茅苍术同源四倍体新品种的选育奠定了基础。
- 王红娟杨岚李雅婷向增旭
- 关键词：茅苍术快繁体系秋水仙素同源四倍体
- 白术四倍体试管苗形态学及AFLP分析被引量：4
- 2015年
- 为探明白术四倍体试管苗形态变异的遗传基础，以白术二倍体试管苗为试验材料，采用抽滤灭菌的秋水仙素浸泡0．5～1．0cm的白术幼芽，在获得白术四倍体的基础上，比较其与二倍体在外观形态和气孔方面的差异，并采用AFLP技术探究两者基因组DNA的多态性。结果表明用0．1％的秋水仙素处理白术幼芽36h，为获得白术同源四倍体的最适条件，四倍体诱导率高达32．0％；四倍体与二倍体植株在叶面积指数、叶长、叶宽等形态指标及保卫细胞叶绿体数、气孔大小、气孔密度等方面均存在显著差异；筛选出24对引物获得451条位于80～500bp的DNA片段，多态性位点占总检测位点的32．59％。白术染色体加倍前后DNA碱基序列在AFLP水平上发生了改变，二倍体和四倍体试管苗在形态上的差异是DNA多态性反映的结果。
- 王红娟李雅婷向增旭
- 关键词：白术四倍体AFLP
- 水杨酸对高温胁迫下铁皮石斛幼苗耐热性的影响被引量：30
- 2013年
- 为研究不同浓度水杨酸对铁皮石斛幼苗耐热性的诱导效应,以移栽半年的铁皮石斛幼苗为实验材料,对不同浓度水杨酸诱导高温胁迫下铁皮石斛幼苗的耐热性进行外观评价及叶绿素、可溶性蛋白质、可溶性糖、丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的动态测定,观察其动态变化趋势并筛选最佳施用浓度。结果显示:在高温胁迫环境下,随着胁迫时间的延长,不同浓度SA处理均能有效缓解高温对铁皮石斛植株伤害;1.5～2.0mmol·L-1 SA处理使铁皮石斛叶片中SOD、POD活性显著提高,0.5～1.5mmol·L-1 SA处理叶片中CAT、APX活性显著提高;1.5～2.0mmol·L-1 SA处理可显著促进叶片Pro、可溶性糖和可溶性蛋白的积累,有效抑制MDA含量的增加,且不同浓度处理之间差异显著。研究表明,适宜浓度水杨酸处理能提高铁皮石斛幼苗的耐热性,并以1.5mmol·L-1浓度处理效果最好。
- 杨岚师帅王红娟向增旭
- 关键词：铁皮石斛水杨酸高温胁迫耐热性
- 华重楼种子休眠相关miRNA的鉴定和差异表达分析被引量：1
- 2020年
- 探究华重楼种胚休眠过程中miRNA的表达模式,为miRNA调控种子休眠与萌发机制提供参考资料。利用高通量测序技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分别对处于休眠和休眠解除时期的华重楼种胚的miRNA进行高通量测序、筛选和鉴定。结果显示华重楼种胚休眠、休眠解除时期4个样本文库中分别有23811977,24276695,20611876,20601811条unique序列。miRNA主要分布在21~24 nt,其中在休眠状态长度为24 nt的miRNA数量最多,在休眠解除后的生长发育阶段19 nt的最多。共鉴定出31个已知的miRNA,属于13个不同的家族,并利用生物信息学软件预测到了93个新的miRNA,比较分析休眠维持到休眠释放过程中差异表达的miRNA,筛选出10个差异表达的miRNA(miR156a-5p,miR160a-5p,miR160h-1,miR169a-5p,miR157d,miR159a-1,miR395-3,miR156f-5p,miR156-2,miR171a-3p)。该研究共鉴定出10个与华重楼种子休眠解除相关的miRNAs,GO与KEGG功能富集分析表明,差异表达的miRNA靶基因主要通过碳水化合物代谢、植物激素信号转导、细胞分裂和生长等途径调控种子休眠和萌发,qRT-PCR验证结果显示测序结果和实际结果一致。
- 张成才王红娟梁晖辉高真罗丽娜何超向增旭
- 关键词：华重楼休眠MIRNA生物信息学
- 甜叶菊二倍体与同源四倍体生理特征及AFLP分析被引量：15
- 2015年
- 为阐述甜叶菊同源四倍体与二倍体表观性状及光合特性的调控机理,以甜叶菊同源四倍体及其二倍体为材料,对2个倍性品种的形态特征、光合特性及AFLP分子标记等进行比较研究。结果表明,甜叶菊四倍体植株茎干粗壮、叶片加厚、叶面积增大,植株变矮;甜叶菊四倍体植株叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)均显著高于二倍体,且光补偿点(LCP)、表观量子效率(AQY)和CO2补偿点(CCP)分别比其二倍体增加了28.66%、1 181.81%、11.74%,而光饱和点(LSP)、暗呼吸速率(Rd)和羧化效率(CE)均显著低于二倍体;在AFLP水平上,甜叶菊染色体加倍前后DNA碱基序列发生了显著变化。二倍体和同源四倍体甜叶菊在表观形态和光合特性上的差异是DNA多态性反映的结果。本研究为甜叶菊倍性育种提供了参考。
- 李雅婷王红娟向增旭
- 关键词：甜叶菊同源四倍体AFLP
- 甜叶菊同源四倍体与二倍体基因组差异分析
- 2015年
- 为探究甜叶菊二倍体经染色体加倍后得到四倍体的过程中,基因组序列的变化情况,采用ISSR分子标记技术对1个甜叶菊二倍体及其5个同源四倍体株系的遗传差异进行分析。ISSR结果显示：从60个ISSR引物中筛选出多态性强、重复性好的5个引物进行扩增,共扩增出34条谱带,其中有19条呈多态性,多态性占55.88%;6个甜叶菊株系间Nei＇s基因多样性指数范围在0.0059-0.2778之间;利用聚类分析,发现CK与5个四倍体最先分开,这说明聚类分析可以很好的将甜叶菊二倍体和同源四倍体区分开,1和2、4和5两两株系最先聚在一起,这表明2组株系各自间遗传相似度高。甜叶菊不同倍性间遗传差异较大,同一倍性不同株系间也存在一定的遗传差异。
- 李雅婷王红娟向增旭
- 关键词：甜叶菊同源四倍体ISSR
- 12种不同产地铁皮石斛指纹图谱研究及重金属元素含量测定被引量：11
- 2014年
- 以12种不同产地铁皮石斛新鲜茎段为材料,以Ultimate XB C18 （4.6 mmx250 mm,5μm）乙腈0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温30℃.通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（国家药典委员会）进行相似度分析,并建立12个不同产地铁皮石斛指纹图谱.经微波消解处理材料后,采用ICP-AES原子吸收光谱法测定不同产地铁皮石斛新鲜茎段中重金属铜、镉、铅、汞的含量,分析不同产地铁皮石斛质量,为建立铁皮石斛质量标准提供理论依据.结果表明：（1）不同产地铁皮石斛指纹图谱共有23个特征峰,相似度为0.918～0.987,其中产自安徽大别山、云南文山的铁皮石斛相似度分别为0.918、0.935,相比其他产地具有一定的差异性.（2）通过聚类分析将12种不同产地铁皮石斛分为4类：安徽霍山、江苏南京、云南石屏、云南玉溪、云南思茅为一类,云南文山、浙江仙居为一类,云南红河、广西天峨、安徽大别山、福建宁化为一类,浙江天台单独为一类.（3）产自云南玉溪的铁皮石斛茎段中铜含量超标26.25％,产自福建宁化和江苏南京的镉含量分别超标27.33％和122.30％,其它产地铜、镉、铅、汞含量在国家现行安全值以内.
- 杨岚王红娟师帅向增旭
- 关键词：铁皮石斛指纹图谱微波消解重金属含量
- 二倍体与同源四倍体茅苍术基因组DNA甲基化水平与模式的MSAP分析被引量：3
- 2015年
- 为探究二倍体和同源四倍体茅苍术表观遗传差异,以不同倍性的茅苍术为试验材料,应用MSAP技术研究其基因组DNA甲基化水平及模式变化。本试验选用20对选扩引物,在茅苍术二倍体和同源四倍体中检测到的基因位点数分别为520和527,其相应的扩增总甲基化率为56.92%和55.03%,四倍体基因组DNA半甲基化率高于二倍体,而全甲基化率低于二倍体;四倍体与二倍体相比,DNA甲基化模式发生调整的基因位点占总检测位点的52.53%。本研究为深入揭示四倍体茅苍术的表观遗传调控机制奠定了基础。
- 王红娟巢建国李雅婷李颖硕向增旭
- 关键词：茅苍术同源四倍体
