钟建辉
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带，Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。
- 钟建辉银巍藏林泉江伟健邱鹏新颜光美
- 关键词：腺病毒载体PC12细胞
- 大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建
- 2006年
- 目的构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体。方法提取大鼠脑组织总RNA,用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。酶切鉴定,重组腺病毒质粒(pAd-polb)和Lipofectamine2000转染293细胞,用293细胞扩增重组腺病毒。结果 8个TA克隆中有2个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLB cDNA序列完全一致。DNA序列正确的POLB重组腺病毒质粒 Ad-polb转染293细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光。结论用TA克隆和AdEasy系统,成功构建了大鼠 DNA多聚酶β的腺病毒重组体。
- 钟建辉邱鹏新颜光美
- 关键词：逆转录PCRTA克隆腺病毒载体
- 持续性非卧床腹膜透析患者血清可溶性粘附分子检测及其与营养状况、慢性炎症因子的相关性
- 目的可溶性粘附分子是内皮功能失调的重要指标, 其与系统慢性炎症也有十分重要的相关关系。近期研究证实腹膜透析患者血清sVCAM-1(soluble vascular cell adhe- sion molecule-1)水...
- 郭群英钟建辉冯敏彭文兴阳晓林健雄张晓丹胡丽琼姜宗培毛海萍余学清
- 文献传递
