周微
- 作品数：2 被引量：22H指数：2
- 供职机构：东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 荧光定量PCR方法快速检测原料乳中的大肠杆菌被引量：20
- 2009年
- 利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术建立一种快速检测原料乳中大肠杆菌数量的方法。根据大肠杆菌的ITS保守序列设计特异性引物,应用常规PCR方法确定引物特异性,然后优化SYBR GreenⅠ的添加量和Mg2+的额外添加量,确定对原料乳中大肠杆菌的最低检测限。结果表明,引物具有很强的特异性,最终确定的SYBR GreenⅠ(20×)的添加量为0.75μL,Mg2+的额外添加量为0.875mmol/L;在不增菌的前提下,对原料乳中大肠杆菌的最低检测限为1.7×103mL-1。检测的10份样品中有四份样品的大肠杆菌数超过103mL-1,与平板菌落计数结果无显著差异。该方法特异性强,灵敏度高,操作简便快捷,整个检测过程仅需3h,具有较大的推广及应用价值。
- 周微张伟钦付宇贡汉生孟祥晨
- 关键词：大肠杆菌原料乳荧光定量PCR
- Taqman荧光实时PCR快速检测原料乳中EPEC被引量：2
- 2009年
- 建立可对原料乳中肠致病性大肠埃希氏菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)进行快速检测的Taqman荧光实时PCR方法。以eae致病基因为靶基因,用特异性引物和Taqman探针进行实时PCR扩增,研究反应的特异性和检测限,并用所建立的方法对16份市售原料乳进行EPEC检测。结果表明,所用引物和探针可高效扩增出目的片段,与原料乳中其他常见致病菌无交叉反应,经2h增菌后检测限为8.8mL-1。对16份市售原料乳样品,检出2份含有EPEC,血清型分别为O111:K58(B4)和O127a:K63(B18)。全部检测过程只需5h,可用于原料乳中EPEC的快速检测和污染调查。
- 张伟钦付宇周微贡汉生孟祥晨
- 关键词：TAQMAN原料乳
