杨秀芬
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：长江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因的原核表达被引量：1
- 2016年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列设计2对引物,通过PCR扩增得到了PRRSV M基因的全长片段和N-末端截短67个氨基酸序列的MNd67基因片段,分别将这些片段插入到表达质粒pET-28a(+)的多克隆位点上构建重组表达质粒,PCR、酶切及测序鉴定表明,成功构建了2种重组表达质粒(pET28a-PRRSV M和pET28a-PRRSV MNd67)。重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)后利用α-乳糖诱导其表达,SDS-PAGE电泳分析表明,E.coli BL21(DE3)/pET28a-PRRSV MNd67成功表达分子质量为14ku的重组蛋白,而E.coli BL21(DE3)/pET28a-PRRSV M未见明显的表达蛋白。试验结果表明已成功表达截短的PRRSV M蛋白,可为PRRSV诊断抗原和疫苗研究奠定基础。
- 杨秀芬荣俊李国攀黄巧珍
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒M蛋白原核表达
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因工程亚单位疫苗免疫保护试验被引量：3
- 2018年
- 为了探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）N蛋白基因工程亚单位疫苗的免疫保护效果,试验利用大肠杆菌表达并纯化了重组PRRSV N蛋白,添加佐剂制成亚单位疫苗进行免疫保护试验。试验猪分为2个不同佐剂制备的PRRSV N蛋白亚单位疫苗免疫组,1个PRRSV TJM-F92株减毒活疫苗免疫组和1个攻毒对照组。首免5周后,用PRRSV NVDC-JXA1强毒株攻击,观察临床表现并在攻毒后21 d对试验猪进行剖检。结果表明：首免3周后2个亚单位疫苗组和减毒活疫苗组抗体全部转阳,组间无显著性差异（P〉0.05）;攻毒后PRRSV N蛋白亚单位疫苗免疫1#组有2/3的猪只、2#组有1/3的猪只的临床症状、体征和解剖病变较攻毒对照组猪只轻微,转归较好且成活,但保护作用不及PRRSV TJM-F92株减毒活疫苗组;剩余的亚单位疫苗免疫1#组1/3的猪只和亚单位疫苗免疫2#组2/3的猪只,与攻毒对照组猪只一样表现为比较典型的PRRS症状,并在8-12 d内死亡。说明PRRSV N蛋白亚单位疫苗能够引起机体的体液免疫反应,具有部分保护作用,但不能提供完全的保护,单独使用达不到减毒活疫苗的效果。
- 刘义杨秀芬冯云飞黄巧珍荣丽丽蓝胜芝荣俊
- 关键词：N蛋白亚单位疫苗攻毒
