王法松
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 固定化重组大肠埃希菌催化合成利巴韦林被引量：1
- 2016年
- 构建了一株能高效表达嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21(p ET-His-pup G)。选择不同包埋剂进行细菌细胞固定化,结果显示明胶的包埋效果较好。进一步确定明胶包埋细胞的最适反应条件:温度55℃,菌体包埋浓度200 g/L,固定化细胞用量20 g/L,催化周期20 h。在p H 7.6的磷酸盐缓冲液中,底物鸟苷和1,2,4-三唑-3-甲酰胺(TCA)浓度均为100 mmol/L,采用上述固定化细胞催化合成利巴韦林,连续反应8次后,固定化细胞仍具有较高的酶活力。
- 王法松曹化杰徐庆阳陈宁谢希贤
- 关键词：利巴韦林明胶固定化细胞催化合成
- 利巴韦林发酵过程中腺嘌呤限量供应的初步研究被引量：1
- 2015年
- 解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）TA208-LM是腺嘌呤缺陷型突变株,腺嘌呤浓度过低会影响菌体生长,过高又会反馈阻遏关键酶的合成。首先对腺嘌呤供体的种类和用量进行了研究,摇瓶发酵结果表明Springer 2506是最佳的腺嘌呤供体,用量在15 g/L时最有利于利巴韦林积累,但发酵后期腺嘌呤浓度过高。因此在降低Springer 2506的初始浓度的基础上,额外添加腺嘌呤,结果发现初始腺嘌呤总量为47.95 mg/L时,发酵液中腺嘌呤含量维持在40~50 mg/L,PRPP转酰胺酶活力最高,合成利巴韦林的量最大。实验表明,控制腺嘌呤供体酵母抽提物的初始用量,在发酵过程中流加酵母抽提物可能是维持适宜腺嘌呤浓度的有效手段。在7.5 L发酵罐上对Springer 2506分批补料发酵方式进行研究,结果发现以7.5 g/L Springer 2506为底物,流加7.5 g/L的Springer 2506,比一次性添加15 g/L的Springer 2506,利巴韦林的积累量提高11.29%。
- 刘莉王法松李燕军谢希贤陈宁
- 关键词：酵母抽提物利巴韦林腺嘌呤
