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微生态制剂规模化猪场的应用: 随着抗生素在畜禽生产当中的广泛应用乃至滥用,其所产生的负面效应逐渐明显,研发和推广绿色环保的抗生素替代品对消除抗生素负面效应及推动我过养猪业的绿色可持续发展具有重要意义。本文综述了微生态制剂在规模化猪场的应用。; 刘存刘琪刘畅罗亚坤王静崔尚金; 关键词：微生态制剂规模化猪场抗生素; 文献传递

PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用被引量：6: 2017年; 本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重纳米PCR(nanodPCR)方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。; 梁琳逄春华罗亚坤罗亚坤王静周灵刘琪王静; 关键词：病原检测

在美国与致命性新生幼犬肠炎相关的犬冠状病毒的基因型特征: <正>据欧盟报道新出现的犬冠状病毒(canine coronavirus,CCoV)变异株可导致全身感染,然而,美国的犬冠状病毒病并未出现这一症状。本项研究以2008年至2013年期间,由五个州的九个犬养殖厂送至康奈尔大...; 王静崔尚金; 关键词：冠状病毒感染抗原分布; 文献传递

CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用被引量：6: 2017年; 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。; 刘畅刘畅刘存王静刘存梁琳王静钱爱东刘琪; 关键词：多重PCR 犬瘟热病毒犬细小病毒犬副流感病毒

A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断研究进展被引量：1: 2020年; 为了进一步了解A型猪塞内卡病毒的特征,通过查阅并总结A型猪塞内卡病毒文献,对A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断方法等方面进行综述,以期提高人们对A型猪塞内卡病毒的认识和防控意识。; 刘存刘畅刘畅王静刘琪崔尚金王静; 关键词：小RNA病毒

A型塞内卡病毒病原学、流行病学和诊断研究进展被引量：8: 2018年; 为了进一步了解A型塞内卡病毒的特征,通过查阅与A型塞内卡病毒相关的文献,对A型塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断方法等方面进行综述,以期提高人们对A型塞内卡病毒的认识及防控意识。; 刘存刘畅刘畅王静刘琪崔尚金王静; 关键词：小RNA病毒

脑心肌炎病毒VP2基因编码蛋白的生物信息学分析及纳米PCR快速检测方法的建立: 本研究以脑心肌炎病毒(Encphalomyocarditis virus,EMCV) HB10株VP2基因为目的基因,建立EMCV快速诊断方法；并对VP2基因进行克隆、测序并用生物信息学技术分析EMCV-HB10-VP2...; 罗亚坤王静史利军梁琳蔺文成崔尚金; 关键词：脑心肌炎病毒 VP2基因生物信息学分析

猪脑心肌炎病毒纳米PCR快速检测方法的建立: 引言脑心肌炎是由脑心肌炎病毒（Encphalomyocarditis virus,EMCV）引起的猪、某些哺乳动物乃至灵长类动物以脑炎、心肌炎或心肌周围炎为主要临床特征的一种急性传染病。EMCV分布广泛,呈世界范围分布,...; 罗亚坤王静史利军梁琳蔺文成崔尚金; 关键词：猪脑心肌炎病毒 PCR; 文献传递

猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用被引量：17: 2017年; 试验旨在建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增方法(LAMP),为诊断PEDV提供简便、敏感、准确可靠的工具。参考GenBank中PEDV基因序列(登录号:KT799997),针对PEDV N基因设计了6条引物,对所建立的LAMP反应体系、反应温度进行优化,建立可特异性扩增PEDV的LAMP方法。结果显示,本试验成功建立了PEDV LAMP检测方法,在60℃恒温下反应60min,能特异性地检测PEDV,检测限量为91拷贝/μL,比常规PCR方法的敏感性高100倍。对比75份临床样本的LAMP和常规RT-PCR法检测结果,显示两种方法符合率为97.3%。综上所述,本试验建立的LAMP方法具有特异性强、敏感性高,操作简单,设备要求低的特点,适用于PEDV临床样本的快速检测。; 罗亚坤梁琳王静刘存刘琪刘畅蔺文成崔尚金; 关键词：猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增技术

水貂肠炎细小病毒及犬瘟热病毒灭活后的联合免疫效果被引量：2: 2018年; 目的探讨水貂肠炎细小病毒(mink enteritis virus,MEV)和犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)灭活后的联合免疫效果。方法用甲醛灭活MEV-L和CDV-L弱毒株,固定MEV-L的血凝效价为2~6,与CDV-L病毒液(CDV-L TCID_(50)10^(-5.29)/mL)分别按1∶1(Ⅰ组)、1∶2(Ⅱ组)、1∶3(Ⅲ组)的量混合,加入10%氢氧化铝胶,充分混匀后免疫大鼠,均为1 m L/只。分别于免疫前及免疫后第7、14、30、60、90天采血,分离血清,采用血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)试验和间接ELISA检测血清MEV抗体效价,血清中和试验和间接ELISA检测血清CDV抗体效价。结果大鼠在免疫后7 d时产生MEV和CDV抗体,30 d时抗体效价最高,随后下降,90 d时抗体效价仍较高;Ⅰ组CDV抗体效价较其他两组高。结论3组不同比例的CDV和MEV联合免疫大鼠均可产生较高的抗体水平,其中以1∶1比例的免疫效果最佳。; 高窦梁琳卞赛赛周灵王静杨双双雷程红崔尚金刘维全; 关键词：水貂肠炎细小病毒犬瘟热病毒病毒灭活联合免疫

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王静