于志慧
- 作品数：11 被引量：34H指数：3
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-MC1R的构建及在羊驼毛囊干细胞中的表达被引量：3
- 2015年
- 旨在构建含有MC1R基因的pcDNA3.1(+)真核重组表达载体,为进一步研究MC1R的生物学功能奠定基础。应用RT-PCR技术从羊驼皮肤cDNA文库中扩增MC1R基因全长cDNA,然后通过双酶切将MC1R基因全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),然后采用脂质体法转染体外培养的羊驼毛囊干细胞后,通过G418筛选培养,建立稳定的转染体系,直接荧光观察pcDNA3.1/MC1R融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过Western Blot方法检测MC1R在羊驼毛囊干细胞中的表达。结果表明,成功构建了pcDNA3.1/MC1R重组表达载体,并且发现试验组的毛囊干细胞中表达MC1R蛋白显著高于空白组(P<0.05)。成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1/MC1R,且MC1R基因在羊驼毛囊干细胞中获得表达。
- 白瑞王振华尹志红弓慧敏于志慧庞全海
- 关键词：羊驼毛囊干细胞真核表达载体转染
- 羊驼皮肤黑素细胞体外培养鉴定被引量：8
- 2013年
- 旨在探讨羊驼皮肤黑素细胞体外培养和鉴定的方法,为建立羊驼皮肤黑素细胞系奠定基础,也为毛色基因功能和体细胞克隆等研究提供理想的生物材料。采用DispaseⅡ酶和胰酶/EDTA两步消化法获取羊驼皮肤黑素细胞,并进行体外原代和传代培养。观察细胞各个阶段的形态,通过生长曲线等手段研究羊驼皮肤黑素细胞的增殖能力,利用多巴(Dopa)染色、免疫细胞化学染色、电镜、及RT-PCR等方法对所获得的细胞进行鉴定。在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;多巴染色、电镜、RT-PCR及免疫组化染色结果均表明培养黑素细胞的生物学功能正常,保持了正常的生物学特性。本研究体外成功建立了羊驼皮肤黑素细胞培养体系。
- 白瑞于志慧范瑞文杨刚董彦君贺俊平董常生
- 关键词：羊驼黑素细胞体外培养
- α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响被引量：15
- 2010年
- 旨在研究α-黑素细胞刺激素(α-Melanocyte stimulating hormone,α-MSH)对羊驼皮肤黑素细胞(Melano-cyte,MC)增殖和黑素合成的影响。体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度α-MSH(0、10-9、10-8、10-7mol·L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、表皮黑皮素-1受体(Melanocortin1receptor,MC1R)基因、小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcription factor,MITF)和酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因表达量的影响。结果表明,α-MSH处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、MC1R和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10-8mol·L-1组最为显著,MITF基因表达量也明显增加(P<0.05),以10-7mol·L-1组最为显著。α-MSH能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长、黑素合成增加、MC1R、MITF和TYR基因表达量增高。
- 于志慧白瑞范瑞文杨刚董彦君贺俊平董常生
- 关键词：Α-MSH羊驼黑素细胞MC1R
- 不同代次羊驼皮肤黑素细胞TYR基因表达变化的研究被引量：1
- 2016年
- 为了探讨TYR基因在体外培养的羊驼皮肤黑素细胞不同代次间表达变化差异,根据Gen Bank中已发现的序列(EU293064)设计引物和探针,以羊驼皮肤黑素细胞的RNA为模板,采用QRT-PCR Taq Man探针法研究羊驼酪氨酸酶基因在不同代次间羊驼皮肤黑素细胞中m RNA表达量.结果表明,经过内参基因校正后,第10代羊驼黑素细胞中TYR基因的相对表达量是第3代细胞相对表达量的25倍(P<0.01),第10代细胞与第5代细胞表达差异不明显(P>0.05)。表明TYR基因表达量的差异与羊驼皮肤黑素细胞传代可能存在一定的相关性。
- 白瑞程志学于志慧尹志红范瑞文庞全海董常生
- 关键词：QRT-PCRTAQ基因表达水平
- 羊驼皮肤中肌钙蛋白C(TnC)基因表达分析
- 2014年
- 从羊驼皮肤cDNA文库中筛选到TnC基因的克隆,经PCR鉴定并测序得知:克隆大小为722 bp,含有一个完整的开放阅读框(ORF)。并利用生物信息学方法对该基因进行分析,发现该基因编码160个氨基酸,为膜蛋白,部分具有高度同源性,并还有一个EFh家族的保守区域,是该蛋白的功能区域。
- 白瑞曹靖于志慧范瑞文李鹏飞董常生
- 关键词：羊驼CDNA文库
- 氟中毒对小鼠脾脏组织形态学研究被引量：7
- 2009年
- 本文研究了氟中毒对小鼠免疫器官的影响。研究结果表明:与对照组相比,三个氟剂量组随着氟剂量的增加脾脏系数呈梯度减少,但是它们之间的差异并无统计学意义。通过HE染色表明,正常对照组小鼠脾脏皮髓交界明显,白髓和红髓中有密集的淋巴细胞分布。而氟剂量组皮髓交界不明显,白髓和红髓中淋巴细胞减少,排列稀疏,淋巴小结也很少形成,且形状不规则。提示氟对小鼠的免疫器官有一定的损害作用,且随着氟剂量的增加,病理变化更加严重。
- 张广和于志慧杜小平王俊东
- 关键词：氟中毒脾脏组织形态学
- 羊驼核糖体蛋白L41(RPL41)基因cDNA克隆及序列分析
- 2012年
- 利用Southern blotting技术从羊驼皮肤cDNA文库里筛选核糖体蛋白L41(RPL41)基因,测序结果表明该片段大小为429 bp,含有一个完整的开放阅读框(ORF)。并利用生物信息学方法对该基因进行了分析,发现该基因编码的氨基酸含有3个β折叠结构域,该结构域对RPL41基因功能的体现起决定作用。
- 白瑞于志慧范瑞文李鹏飞程志学韩红燕董常生
- 关键词：羊驼SOUTHERNBLOTTINGCDNA文库
- 羊驼皮肤中核糖体蛋白L41的表达
- 2012年
- 为了研究羊驼皮肤中核糖体蛋白L41(RPL41)基因的序列结构特点及功能,用Southern blot技术从羊驼皮肤cDNA文库中筛选出RPL41基因,测序后通过生物信息学方法对该基因进行了相关分析。经分析发现羊驼RPL41基因序列中存在CCGG位点,推测羊驼RPL41基因在此位点发生甲基化。表明RPL41基因可能参与皮肤细胞凋亡及毛生长周期的调节。
- 白瑞于志慧李鹏飞朱芷葳程志学范瑞文董常生
- 关键词：羊驼黑色素
- 不同消化酶对羊驼皮肤黑素细胞分离的影响被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在探讨羊驼皮肤黑素细胞的分离、培养及鉴定方法,为进一步研究色素沉积提供合适的细胞模型。取1～3岁的青年羊驼皮肤,用胰酶、胰酶∶EDTA、DispaseⅡ酶3种不同的消化酶消化羊驼皮肤,再用胰酶∶EDTA消化,分离得到羊驼黑素细胞,接种于多种促进黑素细胞生长的营养成分DMEM/F12培养基中,通过观察黑素细胞的生长、细胞接种数和细胞贴壁数检验黑素细胞的纯度。结果表明,DispaseⅡ组处理的羊驼皮肤,分离得到的黑素细胞明显多于其它2个组(P<0.01)。综上所述,选用DispaseⅡ酶作为分离羊驼皮肤的消化酶,可获得较纯的黑素细胞。
- 白瑞于志慧杨刚王海东范瑞文董常生
- 关键词：羊驼黑素细胞
- 生长分化因子9及其受体在成年狗睾丸中的表达与定位被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在探讨生长分化因子9(GDF9)及其受体在雄性成年狗睾丸中的定位与表达。采用RT-PCR、免疫组织化学法、免疫印迹法检测GDF9及其受体ALK5蛋白在成年狗睾丸中的表达与定位。GDF9蛋白在成年狗睾丸中的表达显示,GDF9阶段特异性地定位在成年狗睾丸生精上皮的圆形精细胞和粗线期精母细胞胞质。GDF9I型膜受体ALK5蛋白在成年狗睾丸中的表达显示,ALK5主要定位在圆形精细胞。本研究显示,GDF9及其膜受体ALK5在成年狗睾丸中均有表达,提示,GDF9由圆形精细胞和粗线期精母细胞特异性分泌,通过旁分泌形式调控支持细胞间紧密连接及支持细胞与生殖细胞间的细胞连接,并以自分泌形式调控生殖细胞的生长与迁移。
- 白瑞赵鹂李栋于志慧贺俊平
- 关键词：睾丸精子发生
