刘倩
- 作品数：38 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- CRISPR/Cas9介导的嗜热毁丝霉基因组多位点编辑技术研究
- 嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)是一种能够快速降解纤维素和高产纤维素酶的工业丝状真菌，其分泌的木质纤维素水解酶的种类和数量相当丰富，而且高温稳定性好，因此该菌在纤维素酶生产和生物基燃料研...
- 刘倩田朝光
- 一种促进宿主细胞生长速率及其底物利用的方法及应用
- 本发明提供了一种促进丝状真菌生长速率及其底物利用的方法及其在微生物发酵中的应用，属于基因工程领域。利用敲除、突变等基因工程方法对丝状真菌调控因子LaeA进行改造，所得到的重组菌株，获得生长速率和底物利用速率显著提高的能力...
- 田朝光李金根赵祯顾淑莹刘倩王涵玉孙涛孙文良
- 一种提高丝状真菌有机酸合成能力的方法
- 本发明提供了一种提高丝状真菌重组菌的有机酸合成能力的方法，及其得到和重组菌和生产有机酸的方法。本发明的重组菌株导入有机酸合成正调控基因，和/或下调表达了有机酸合成负调控基因，且所述的重组菌株与其出发菌株相比，有机酸生产能...
- 田朝光李金根陈炳琛赵祯顾淑莹刘倩孙涛孙文良
- 新的二元有机酸生产菌株及其制备和应用
- 本发明提供了新的二元有机酸生产菌株及其制备和应用。具体地，本发明提供了一种遗传改造的用于二元有机酸合成的工程菌株，所述的工程菌株导入了外源性二元有机酸合成正调控基因，和/或下调了二元有机酸合成负调控基因，且所述的工程菌株...
- 田朝光李金根龙传南许晶林良才孙涛杨惠冀京枭刘倩马延和
- 文献传递
- 一种调控sgRNA转录的启动子、表达载体，及其基因组编辑系统和应用
- 本发明涉及一种调控sgRNA编码DNA转录的启动子、表达载体，及其基因组编辑系统和应用。本发明提供的具有调控sgRNA编码DNA转录的启动子含有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列，可利用该启动子构建调控sgRNA编码...
- 田朝光李金根顾淑莹赵祯刘倩孙文良
- 文献传递
- 一种生产乙醇的重组丝状真菌及其构建和应用
- 本发明公开一种丝状真菌的基因工程菌的构建方法，通过基因工程方法使得所述丝状真菌过表达乙醇合成正调控基因，和/或下调了内源乙醇合成负调控基因获得基因工程菌株。所获得的基因工程菌株与其出发菌株相比，乙醇合成能力得到提高。
- 田朝光张永利李金阳李金根孙涛刘倩孙文良
- 基于CRISPR系统对嗜热真菌基因组进行多轮编辑的研究
- 嗜热毁丝霉（Myceliophthora thermophila）是一种能够快速降解纤维素和高产纤维素酶的工业丝状真菌,其分泌的木质纤维素水解酶的种类和数量相当丰富,而且高温稳定性好,因此该菌在纤维素酶生产和生物基燃料研...
- 刘倩张永利李金根田朝光
- 关键词：嗜热真菌纤维素酶
- 文献传递
- 产纤维素酶的突变菌株、高效表达目的蛋白的突变菌株及其构建方法与应用
- 本发明公开了产纤维素酶的基因工程菌和高效表达目的蛋白的工程菌及其构建方法与应用。本发明通过改造微生物三个β-葡萄糖苷酶基因NCU00130、NCU04952、NCU08755得双基因突变菌株BG13(NCU00130×N...
- 田朝光姜永生刘倩马延和
- 文献传递
- 嗜热毁丝霉果胶酯酶MtCE12-1的克隆表达及其酶学性质和应用研究
- 2024年
- 【目的】挖潜新型果胶酯酶的酶资源,在嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)中高水平表达烟草生物质诱导显著上调的同源果胶酯酶,对其进行酶学性质研究,并探究该果胶酯酶在协同降解烟草生物质过程中的作用。【方法】利用RTqPCR的方法分析嗜热毁丝霉在烟草生物质中果胶酯酶MtCE12-1的表达水平,通过2A肽介导的表达筛选系统,在嗜热毁丝霉菌株ATCC 42462中高表达果胶酯酶基因Mtce12-1,对高活性的阳性转化子进行产酶培养和蛋白纯化,表征了果胶酯酶MtCE12-1的酶学性质;以两种烟草生物质烟草压棒和烟草梗丝为底物,通过检测纤维素的剩余含量,分析了与纤维素酶的协同作用效果。【结果】与葡萄糖培养条件相比较,烟草生物质条件下果胶酯酶基因Mtce12-1的转录水平显著上调109-110倍,SDS-PAGE电泳分析、拷贝数和Western检测显示,重组蛋白MtCE12-1成功进行了表达和分泌,表达水平达到464.08 U/mL。该酶在75℃、pH 8.0时表现出最佳酶活力,在50-85℃和pH 7.0-9.0的范围内表现出较好的酶活力,具有良好的热稳定性。将100-300μg的MtCE12-1添加至降解体系后,烟草生物质中纤维素降解效率分别提高了18.5%-30.7%和14.6%-30.5%。【结论】用2A肽介导的表达系统在嗜热毁丝霉中可以高效表达和纯化制备目标蛋白,碱性果胶酯酶MtCE12-1不仅具有良好的温度稳定性,在烟草生物质降解过程中也具有突出的作用效果,为烟草工业生产应用提供了潜在的优质酶资源。
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- 关键词：果胶酯酶酶学性质
- 一种基于流式细胞术的免涂板操作的菌株工程改造的方法及应用
- 本发明构建了一种基于流式细胞术的免平板操作的菌株工程改造的方法，将将带有选择性标记基因的DNA序列的转化进入目的真菌原生质体基因组中、流式细胞仪分选、深孔板培养、以及表型快速分析步骤结合起来。可直接用于丝状真菌遗传转化后...
- 田朝光王兴吉刘倩杨玉净刘音刘丹丹郭文柱孙涛孙文良
