梁华敏
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 相关领域：医药卫生社会学更多>>
- IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及发育依赖性变化被引量：1
- 2023年
- 目的白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心肌细胞损伤后心脏微环境中重要的细胞因子,可以提高心肌细胞自身的增殖能力从而促进心脏修复。本研究旨在探索IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及其发育依赖性变化。方法用酶解法获得胚胎发育早期(early embryonic developmental stage,EDS)和发育晚期(late embryonic developmental stage,LDS)的单个心肌细胞,心肌细胞分别在20%DMEM培养液中培养24 h,然后再分别加入10 ng/mL和50 ng/mL IL-6处理24 h;用免疫荧光技术定位α-actinin^(+)心肌细胞并统计BrdU^(+)α-actinin^(+)细胞核数目/α-actinin^(+)细胞核百分比和BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞数目/α-actinin^(+)单核心肌细胞数目百分比,研究IL-6对心肌细胞增殖能力的影响;利用Western blot技术检测关键信号通路中关键蛋白的磷酸化水平。结果10 ng/mL IL-6不改变EDS心肌增殖能力,但对LDS心肌细胞增殖能力有显著促进作用;50 ng/mL IL-6显著抑制EDS BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞比例,增加LDS BrdU^(+)α-actinin^(+)细胞核和BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞比例。10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制EDS心肌细胞Akt的磷酸化、对STAT3和ERK的磷酸化水平无显著影响;但在LDS,10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制心肌细胞的Akt的磷酸化,增加STAT3的磷酸化,对ERK的磷酸化水平无显著影响。检测这3个蛋白质的基础磷酸化状态发现:STAT3、Akt和ERK的总蛋白量和磷酸化水平均呈发育依赖性下降。结论IL-6影响胚胎心肌细胞的自我更新能力,且具有发育依赖性和浓度依赖性。这可能与胚胎发育不同时期的关键蛋白及其磷酸化水平存在差异,因而IL-6在不同发育阶段靶向不同的信号通路有关。这些发现为细胞替代疗法的研究在心肌微环境层面提供了重要线索。
- 顾浩南王淇王淇周易梁华敏
- 关键词：白细胞介素6心肌再生
- 单细胞/单细胞核RNA测序分析心脏细胞转录谱推进心脏细胞类型和心脏发育研究
- 2023年
- 以单细胞RNA测序(single cell RNA sequencing,scRNA-seq)和单细胞核RNA测序(single-nucleus RNA sequencing,snRNA-seq)进行单细胞/单细胞核转录组学分析,为组织在稳态维持或动态变化过程(如疾病的发展、分化和发育)中提供了一个全面的组织细胞统计可视图。与传统批量分析相比,单细胞/单细胞核为中心的转录组分析更准确地揭示组织内细胞的异质性和细胞内基因调控网络。该文总结了应用sc/snRNA-seq技术分析心脏细胞转录谱的新发现,以及心血管发育的重要新分子机制。
- 文莉雅雅各布·马西卡王子赫王松王松
- 关键词：心脏发育
- 生理学教学中提高翻转课堂教学法教学效果的探索被引量：2
- 2023年
- 目的:探索生理学教学中提高翻转课堂教学法教学效果的可行性方式。方法:依据问卷调查和形成性评价结果发现翻转课堂教学法中的问题,针对问题改变教学实施方式或方案。结果及结论:监督课前预习环节增加学生的自主学习行为,提高教学考核成绩;小课教学模式增加学生自主学习行为和学生满意度,但不影响课堂教学成绩考核。
- 梁华敏梁华敏朱敏洁宋元龙
- 关键词：教学效果评价
- IL-6促进小鼠胚胎干细胞多能性并以发育依赖的方式调控心肌分化被引量：1
- 2023年
- 白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心脏微环境的重要组成部分。在不同模型中,IL-6通过促进心肌细胞再生帮助心脏修复。胚胎干细胞是心脏修复中心肌再生的良好来源。本研究旨在探讨IL-6对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)及其心肌分化的影响。IL-6处理mESCs两天,用CCK-8法检测mESCs增殖情况,用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测干性和胚层分化基因mRNA表达水平,用Western blot检测干细胞相关信号通路的磷酸化水平,用siRNA干扰STAT3磷酸化功能。通过检测搏动拟胚体(embryoid bodies,EBs)比例和qPCR检测心脏前体细胞标记物和心肌细胞离子通道mRNA表达水平来评估mESCs的分化能力。从胚胎干细胞分化第1天(EB0)开始使用IL-6中和抗体阻断内源性IL-6的作用,分别在EB7、EB10和EB15检测心肌细胞分化;在EB15用免疫组织化学染色法示踪心肌细胞,并用Western blot检测干细胞相关信号通路的磷酸化情况。在EB4、EB7、EB10和EB15时给予短期IL-6抗体处理,观察发育后期搏动EBs比例。结果显示,外源性IL-6促进mESCs增殖和多能性的维持,表现为上调癌基因c-fos、c-jun和干性标志物oct4、nanog mRNA表达水平,下调胚层分化标记物branchyury、FLK-1、pecam、ncam和sox17 mRNA表达水平,提高ERK1/2和STAT3磷酸化水平;针对JAK/STAT3的siRNA可部分减弱IL-6对细胞增殖和c-fos、c-jun mRNA表达水平的作用。在分化过程中,IL-6中和抗体的长期作用可减小搏动EBs比例,下调ISL1、GATA4、α-MHC、cTnT、kir2.1和cav1.2 mRNA水平,降低EBs和单个细胞的心肌αactinin荧光强度,下调STAT3磷酸化水平。此外,从EB4开始的短期(2 d)IL-6抗体处理显著降低发育后期搏动EBs的比例,而从EB10开始的短期IL-6抗体处理显著提高EB16搏动EBs的比例。以上结果提示,外源性IL-6促进mESCs增殖,有利于干细胞干性维持;内源性IL-6对mESCs心肌分化的影响呈发育依赖性。这些
- 季思琦赵亚楠周建霞陈宗海梁华敏
- 关键词：胚胎干细胞心肌分化白细胞介素6心肌再生
- 心脏成纤维细胞旁分泌能力影响小鼠胚胎干细胞的命运被引量：1
- 2020年
- 本研究旨在探讨心脏成纤维细胞旁分泌能力对小鼠胚胎干细胞的影响。新生小鼠和成年小鼠成纤维细胞的条件培养基(ConM-NCF、ConM-ACF)分别稀释50倍(1:50)或5倍(1:5),通过RT-real time PCR技术、ELISA、细胞增殖检测以及计数心肌分化过程中跳动拟胚体(embryoid body, EB)的比例,观察这些条件培养基对小鼠胚胎干细胞的影响。结果显示,成纤维细胞细胞因子的分泌能力在发育过程中发生显著变化,其中白细胞介素6 (interleukin 6, IL6)随发育成熟显著增加。ConM-NCF抑制干细胞的增殖,但高、低浓度对干性基因表达的作用不同。Con M-ACF 1:50促进干细胞增殖并上调干性基因,但Con M-ACF1:5作用相反。ConM-NCF和ConM-ACF都能抑制干细胞的心肌细胞分化能力,但又各有特点:ConM-NCF 1:50抑制早期心肌分化但不影响晚期心肌细胞标记物的表达;ConM-ACF 1:50抑制早期心肌分化比ConM-NCF 1:50更显著,阻碍心肌成熟并上调分化晚期的心肌细胞标记物表达水平。此外,IL6中和抗体抑制ConM-ACF 1:50对干细胞的促增殖作用,但不影响ConMNCF 1:50的作用。干细胞分化过程中长期应用IL6中和抗体,抑制早期心肌细胞分化,但对晚期分化不产生影响。以上结果提示,心脏成纤维细胞分泌的细胞因子种类和浓度都对小鼠胚胎干细胞的增殖、干性基因表达和心肌分化有重要意义,其中ConM-ACF分泌的IL6是干细胞干性维持和心肌细胞分化的有利因素。
- 沈丹亚陈宗海赵亚楠周建霞关秀文梁华敏
- 关键词：小鼠胚胎干细胞微环境旁分泌细胞移植白细胞介素6
- M受体对小白鼠胚胎心肌细胞的I<,f>及I<,Ca-L>的影响和调节
- 我们用全细胞膜片钳技术研究了M受体对不同发育阶段的小白鼠胚胎心肌细胞的I<,f>及I<,Ca-L>的影响和调节.结果发现(1)M-受体对I<,f>电流的调节具有发育依赖性降低:随着胚胎逐渐发育成熟,M受体逐渐失去对I<,...
- 梁华敏
- 关键词：腺苷酸环化酶
