贺海燕
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 内蒙古锡林郭勒盟地区优势蜱种及其基因多样性分析被引量：5
- 2019年
- 为了解内蒙古锡林郭勒盟地区的优势蜱种及其存在的基因多态性,应用传统形态学和分子生物学相结合的方法,对该地区14个主要牧区采样点进行蜱虫种型的鉴定和基因多态性分析。通过传统形态学鉴定方法,对蜱虫样品进行显微镜观察以初步确定蜱属。采用聚合酶链式反应(PCR)对蜱虫的16S rRNA基因序列进行扩增,测序后对蜱种进行分子鉴定和基因序列同源性分析,确定蜱种多样性。应用Mega 6.06软件构建系统进化树,与GenBank数据库中已知蜱虫的16S rRNA进行聚类分析,以确定蜱进化的规律。结果显示14个不同地区的蜱虫均属于草原革蜱,为锡林郭勒盟地区的优势蜱种之一,但不同地区的蜱虫之间存在明显的基因多态性。
- 黄芳黄天鹏贺海燕吴咪朝木丽格王云冲格日勒图
- 关键词：RRNA草原革蜱基因多样性
- PEDV S基因的B细胞表位嵌入型乳杆菌S-层蛋白的原核表达及其鉴定被引量：1
- 2019年
- 利用生物软件和在线数据库中筛选出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的B细胞表位,通过overlap PCR方法将其嵌入到嗜酸性乳杆菌的S-层蛋白基因中,获得融合基因SLP-EpitopeS。将该融合基因导入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建了原核表达载体pGEX-SLP-EpitopeS。经过双酶切和PCR方法以及基因测序方法验证融合表达载体pGEX-SLP-EpitopeS的正确性。应用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物,其中SDS-PAGE结果显示:融合蛋白质的大小约为77000,与理论值相符;Western blot结果显示:融合蛋白SLP-EpitopeS被GST血清所识别,而B细胞表位分别被表位特异的鼠源单克隆抗体(McAb)和表位合成多肽所识别。本试验为进一步嵌入型蛋白SLP-EpitopeS的免疫原性研究奠定了基础。
- 朝木丽格侯殿文韩佳黄天鹏吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因B细胞表位原核表达
- 一种蜱源性耐盐耐碱菌株Oceanobacillus oncorhynchi IMH的首次分离与鉴定被引量：3
- 2019年
- 【目的】本试验以源自呼伦贝尔地区的优势蜱种草原革蜱为材料,从其体内分离得到可疑细菌,应用常规方法和分子生物学方法对该菌株进行分离及鉴定,并对其致病性进行探索,为内蒙古地区蜱虫生物多样性和环境相关性研究奠定了基础。【方法】首先,通过形态学观察,生理生化试验、药物敏感试验以及16S r RNA序列分析,并构建系统发育树,确定该菌株的分类地位;其次对昆明小鼠进行致病性实验。【结果】该菌株革兰氏染色呈G+杆菌,在高盐培养基(5%Na Cl)和p H为9的碱性培养基中生长良好;该菌对不同糖类发酵能力非常有限,只利用部分糖类(如西蒙氏枸橼酸盐试验结果为阳性)产气,但是不产酸;对个别化学药(如环丙沙星)和多数抗生素(如复方新诺明、庆大霉素、红霉素及头孢噻肟等)显示为敏感,而对抗生素卡那霉素和阿莫西林表现为耐药性;经16S r RNA基因序列和系统发育树分析发现,该菌株与GenBank数据库中已注册的多株Oceanobacillus oncorhynchi的同源性为99%以上;该菌在血平板溶血试验中呈现出不完全α溶血,而感染昆明小鼠,观察7 d无明显致病性。【结论】本试验首次分离鉴定了一株蜱源性O.oncorhynchi,并对上述菌株重新命名为O.oncorhynchi IMH,并在Gen Bank中进行注册(LC213016.1),更加丰富了Gen Bank中相关数据。
- 朝木丽格额尔敦宝力高黄天鹏吴咪贺海燕金凤格日勒图
- 关键词：草原革蜱RRNA
- 多型FMDV VP1表位嵌入型载体pMG-SLPMultiVP1的构建及其表达产物鉴定被引量：1
- 2016年
- 构建出表达载体pMG-SLPMultiVP1,并对其进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒转入到发酵乳杆菌中进行表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot和IFAT鉴定。多型FMDV VP1表位嵌入的SLPMultiVP1融合基因成功克隆入穿梭质粒pMG36e中,其表达产物大小约为35ku,部分表达产物位于发酵乳杆菌表面。成功构建了一个乳杆菌嵌入型表达载体pMG-SLPMultiVP1,为以发酵乳杆菌为活菌载体的表位疫苗研究奠定了基础。
- 陆继爽黄天鹏吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：S-层蛋白发酵乳杆菌表位疫苗
- 内蒙古呼伦贝尔地区优势蜱种的鉴定及其基因多态性分析被引量：4
- 2017年
- 为掌握内蒙古呼伦贝尔地区硬蜱的优势蜱种类,对该地区15个调查点的蜱进行考查和采集蜱虫1 349只样本,在形态学鉴定方法初步进行分类的基础上,设计1对简并引物,从蜱虫基因组DNA样品中,采用PCR扩增得到蜱虫16SrRNA基因序列,测序后进行基因序列同源性分析。用Mega 6.06软件绘出系统进化树,与GenBank数据库中已知蜱虫16SrRNA进行聚类。结果显示:15个考察点蜱虫种类均为草原革蜱,属于呼伦贝尔地区常见优势蜱虫之一。但是,不同地区的蜱虫之间也存在基因序列的差异性。
- 黄天鹏张金宝陆继爽吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：草原革蜱形态学鉴定RRNA同源性分析
- 一种蜱源性粪产碱杆菌内蒙古株的分离与鉴定被引量：5
- 2018年
- 从内蒙古呼伦贝尔地区自然放牧的羊群中采集蜱虫样本，分离出可疑细菌，并采取常规方法和分子生物学方法对其进行种型鉴定。采用高盐普通琼脂培养基从收集的蜱虫体内分离和纯化培养可疑细菌，并进行革兰染色；对纯化的可疑细菌进行生理生化、药物敏感试验及对盐的耐受性鉴定；PCR方法扩增和测序16SrRNA基因序列并应用Mega6．0生物软件绘制出该细菌系统发育进化树。结果显示，分离菌革兰染色呈革兰阴性短杆菌；溶血性试验结果呈现α-溶血；药物敏感试验对头孢类抗生素敏感，对青霉素、两性霉素B耐药；该菌具有运动性并可在含有10％的NaCl的培养基中生长；蔗糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、葡萄糖等糖分解试验、吲哚试验、硝酸盐（还原）试验、明胶液化试验等结果为阴性；脲酶试验、氧化型与发酵型试验、西蒙氏枸橼酸盐试验、氧化酶试验结果为阳性；根据16S rRNA基因绘制的系统发育树可看出，本试验分离株与粪产碱杆菌遗传距离近，处在相同分支。本试验成功分离出1株新的蜱源性粪产碱杆菌（Alcaligenes faecalis），重新命名为Alcaligenes faecalisIMH（简称为A．faecalis IMH），其16SrRNA基因重新注册于GenBank中，注册号为：LC213619．1。本试验为进一步研究该菌的致病性奠定基础。
- 贺海燕黄天鹏黄芳吴咪朝木丽格格日勒图
- 关键词：草原革蜱粪产碱杆菌生物学特征
