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董靖
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1
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中国药科大学生命科学与技术学院
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发文基金:
上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
刁华
上海市计划生育科学研究所
林东海
厦门大学化学化工学院
郭晨云
厦门大学化学化工学院
于合国
上海市计划生育科学研究所
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人β-防御素DEFB113的重组表达及活性鉴定
2012年
DEFB113为人β-防御素家族新成员,其生物学功能尚不清楚。为了探索一种可以较低成本和较高产量表达活性DEFB113多肽的方法,将编码DEFB113成熟肽的序列克隆到载体pTWIN1上,并转化至E.coliBL21(DE3)中进行表达。结果表明融合蛋白主要以可溶形式存在;重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成。最终得到DEFB113多肽的产率为6~7 mg/LLB。经活性鉴定,该重组DEFB113多肽对于S.aureus,E.coli K12D31和C.albicans均表现出较强的抑制作用;另外DEFB113无明显的溶血活性,是一种较理想的多肽抗生素。该研究为进一步研究DEFB113的生理功能以及其它人β-防御素结构与功能奠定了基础。
董靖
于合国
刁华
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林东海
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原核表达
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