常敏
- 作品数：3 被引量：32H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院饲料研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基本科研业务费更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 重组大肠杆菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺研究被引量：11
- 2012年
- 以表达普鲁兰酶的重组大肠杆菌作为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立了大肠杆菌工程菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺。通过测定细胞密度、细胞干重、分离菌体可溶性成分与不溶性成分及SDS-PAGE电泳,分析重组大肠杆菌的生长和普鲁兰酶的表达情况。摇瓶试验使用合成培养基和LB培养基,重组大肠杆菌在合成培养基生长较慢,诱导5h的普鲁兰酶表达量高于LB培养基,包涵体比例低于LB培养基。重组大肠杆菌的高密度发酵使用合成培养基,补料阶段采用指数流加的工艺,在设定细胞的比生长速率为0.12的前提下,限制补料中碳源的供应,以阻止乙酸的产生。当细胞密度OD600达到70.0开始诱导,最终细胞密度为每升53.3g细胞干重,细胞内可溶性普鲁兰酶为每升1.35g。
- 乔宇丁宏标闫俊艳常敏
- 关键词：高密度发酵重组大肠杆菌普鲁兰酶
- 普鲁兰酶的研究进展被引量：21
- 2011年
- 普鲁兰酶是一类淀粉脱支酶,能够专一性切开支链淀粉分支中的α-1,6糖苷键,形成直链淀粉。普鲁兰酶可与其他淀粉酶协同作用,在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。本文就普鲁兰酶的结构与催化机理、酶学性质、来源和应用进行了综述。
- 乔宇丁宏标王海燕常敏
- 关键词：普鲁兰酶脱支酶
- 谷氨酸棒杆菌麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆与表达
- 2011年
- 从谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)基因组中克隆到麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因(treZ),将其插入大肠杆菌表达载体pRSET-B并转化宿主菌E.coliBL21(DE3)pLysS获得重组基因工程菌。经IPTG诱导表达,得到麦芽寡糖基海藻糖水解酶,溶解表达的目的蛋白约占胞内总蛋白的40%,有部分目的蛋白形成包涵体。经薄层层析与离子色谱共同检测证实,该麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)与麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)共同作用于糊精溶液,可得到产物海藻糖,具有工业应用前景。
- 常敏乔宇丁宏标
- 关键词：糊精
