张宁
- 作品数:8 被引量:21H指数:3
- 供职机构:遵义医药高等专科学校更多>>
- 发文基金:贵州省教育厅高等学校人文社会科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 短乳杆菌来源重组β-半乳糖苷酶初步分离纯化与酶学特性研究
- 2020年
- 将实验室克隆得到的E.coli BL21/p ET28a-bgaB-18重组菌株在IPTG的诱导下进行表达,对其表达的β-半乳糖苷酶性质进行研究.首先,通过离心收取重组菌菌体;其次,通过超声破碎菌体细胞,再用镍柱对重组蛋白质进行亲和层析;最后,收集层析液,再利用紫外分光光度计测定重组β-半乳糖苷酶活性,并研究其酶学性质.结果表明:该酶的最适反应温度为37℃,最适pH值为7.5;在温度30~50℃、pH 6.0~8.0范围内酶稳定性较好;Mg^2+、Mn^2+为其激活剂,Cu^2+为其抑制剂;测得K m=0.816 mmol/L,V max=45.87 mmol/(L·min).
- 李洁宫路路柳陈坚崔霖芸张宁
- 关键词:Β-半乳糖苷酶分离纯化酶学性质
- 硒多糖抗肝细胞癌效应与硫氧还蛋白1的关系被引量:2
- 2020年
- 目的探讨硒多糖抗肝细胞癌(HCC)效应与硫氧还蛋白(Trx)-1的关系。方法设置0、50、100、200和400μg/ml共计5组浓度梯度,利用MTT细胞毒活性检测法在细胞水平研究硒多糖对HepG2细胞活力的影响;在分子水平,使用Western印迹检测硒多糖对HepG2细胞内Trx-1表达的影响,并进一步检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达。结果硒多糖200μg/ml、400μg/ml组的细胞活力较其他浓度显著下降(P<0.05),显著抑制HepG2细胞活性;200μg/ml、400μg/ml组的硒多糖处理使HepG2细胞Trx-1表达量显著降低(P<0.01);凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达量分别在200μg/ml及100μg/ml时开始显著变化(P<0.05)。结论硒多糖可能是通过下调Trx-1的表达诱导HepG2细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞的生长。
- 张宁邱佳张安龑宫路路
- 关键词:肝细胞癌硒多糖细胞凋亡
- 凯里酸汤研究现状分析被引量:6
- 2020年
- 凯里酸汤有着地方特色,其特有的风味和营养价值功能,越来越得到人们的喜爱和认同。本文对近年来凯里酸汤的国内研究状况做一综述,以期给参与贵州酸汤研究的科技工作者提供参考。
- 李洁宫路路陈芳勇张宁崔霖芸
- 关键词:微生物有机酸抗氧化
- 一种电泳法分离血清蛋白质实验方法优化
- 本发明公开了一种电泳法分离血清蛋白质实验方法优化,使用的兔血清替代人血清,一定程度上杜绝了电泳材料的安全风险;使用使用浓度95%的乙醇进行替代含有甲醇的漂洗液,降低甲醇对环境的污染以及对实验人员健康的损害;使用硼酸缓冲液...
- 宫路路李洁董亚云张子萍张宁李琳琳
- 大肠埃希菌β-半乳糖苷酶重组菌株的筛选和培养条件研究
- 2019年
- 目的筛选含有目的基因E. coli BL21/pET28a-bgaB-18(以下简称18号重组菌株)的β-半乳糖苷酶重组菌株并对其产酶条件进行优化。方法采用Kan琼脂平板培养基筛选和菌落PCR验证,得到整合短乳杆菌β-半乳糖苷酶基因的重组大肠埃希菌菌株。通过改变碳源、氮源的种类及其浓度,结合改变IPTG诱导剂浓度、重组菌株培养时间,摇床培养振荡速度等多种因素,在不同条件下采用液体振荡培养法培养重组大肠埃希菌。收集培养的重组菌液经离心后超声破碎,取上清液,测定重组菌株破碎细胞上清液酶活性,并根据酶活大小确定培养条件。结果筛选得到1株稳定表达β-半乳糖苷酶基因的重组菌株E. coli BL21/pET28a-bgaB-18。通过测定不同培养条件下破碎细胞上清液酶活性,确定该重组菌株最佳培养条件为:碳源为蔗糖,浓度7.0%;氮源为酵母粉,浓度2.0%;培养时间为7 h,诱导剂IPTG浓度为1.5 mg/ml,摇床转速为220 r/min。经优化的条件培养的重组菌酶活达156.2 U/ml,较诱导前酶活性为16.5 U/ml,提高约8.5倍。结论重组菌E. coli BL21/pET28a-bgaB-18在适宜碳源、氮源种类、浓度,IPTG浓度及培养时间条件下能稳定表达β-半乳糖苷酶,在食品和乳品加工等方面具有较好的应用前景。
- 宫路路柳陈坚张宁李洁
- 关键词:大肠埃希菌Β-半乳糖苷酶短乳杆菌重组菌株
- 硒多糖的合成及药理研究被引量:5
- 2020年
- 硒多糖是多糖的硒化产物,结合了硒和多糖类的优点。具有抗癌,提高免疫力的作用。本文就硒多糖的药理及合成研究进行了综述。
- 张宁宫路路
- 关键词:硒多糖药理研究