谢文绮 作品数:4 被引量:12 H指数:2 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 浙江省教育厅科研计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
猪“高热病”源嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因的克隆和系统发育分析 被引量:1 2009年 根据NCBI中已报道的嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,对两株来源于猪"高热病"病料中的疑似嗜麦芽窄食单胞菌PSM-5、PSM-6进行PCR扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,并转化到DH5α中。抽取质粒模板,进行PCR和双酶切鉴定并测序,从分子水平上予以鉴定。两株菌的16S rDNA基因扩增片段的核苷酸序列(GenBank登录号为GQ267816和GQ267817)与已经报道的嗜麦芽窄食单胞菌分离株的16S rDNA序列的相似性均在96.78%以上,最高达99.93%。本试验对通过16S rDNA鉴定嗜麦芽窄食单胞菌提供一定参考,同时对猪"高热病"的诊断治疗奠定细菌学方面的基础,对其发病机制的探讨提供依据。 谢文绮 李蜜 冯迎春 颜其贵关键词:嗜麦芽窄食单胞菌 基因克隆 分子分析 猪瘟病毒石门株E2蛋白的单抗制备及抗原表位鉴定 被引量:1 2012年 用猪瘟病毒石门株E2(SM-E2)的BC区原核表达蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单抗,测定其效价并鉴定抗原表位。结果表明,制备了1株持续、稳定分泌抗SM-E2的单克隆抗体2B10,效价在1∶600~1∶1 000之间。单抗2B10能与常规SDS-PAGE转膜的SM-E2蛋白发生反应,表明其识别的是线性表位,并且该单抗只能识别石门毒株,而不能与C株疫苗及2型流行毒株发生反应。点突变E2蛋白ELISA分析结果表明,该单抗不与707、709、711、713和714位突变蛋白发生反应,表明单抗2B10识别的线性表位为707I-X-P-X-G-X-G-G714。该单抗对猪瘟病毒抗原多样性分析和致病机制研究有一定的应用价值。 谢文绮 李得江 陈宁 廖迅 童超 方维焕关键词:猪瘟病毒 囊膜糖蛋白E2 单克隆抗体 “高热病”病猪嗜麦芽窄食单胞菌的分离鉴定 被引量:6 2009年 从"高热病"猪的鼻液、支气管和肺组织分泌物的11份病料中,按常规方法进行病原菌分离鉴定,经亚胺培南分离筛选到7株疑似细菌。通过生化试验、16 S rDNA基因序列分析等,鉴定出其中2株为嗜麦芽窄食单胞菌(命名为PSM-1、PSM-2)。与GenBank中临床和环境中分离的嗜麦芽窄食单胞菌分离株相比,两株菌的16 S rDNA基因扩增片段的核苷酸序列同源性均在99%以上。动物试验证实,2株细菌具有一定致病性;药敏试验表明,分离菌株对大多数抗生素具有较强耐药性且呈现多重耐药性。 陈龙 谢文绮 王礼兴 李蜜 颜其贵 何曼莉 冯迎春关键词:嗜麦芽窄食单胞菌 药敏试验 猪瘟病毒浙江分离株体外生长特性及其囊膜糖蛋白E2分子的变异分析 被引量:4 2011年 为了研究分离于浙江省衢州和杭州的2株猪瘟病毒基因2型流行毒株QZ-07、HZ1-08在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)中的生长特性及其囊膜糖蛋白E2的分子进化特征,采用间接免疫荧光、效价测定和进化分析等分子生物学方法将基因2型流行毒株与基因1型石门株进行了比较。结果表明,石门株在PK-15细胞中的增殖效率明显高于ST细胞;感染PK-15细胞后第48小时,细胞内的效价可达107TCID50/mL,而在ST细胞中的效价只有105.25 TCID50/mL。基因2型毒株在PK-15细胞中的增殖水平明显低于ST细胞,尤其以HZ1-08株更为明显;感染ST细胞后第48小时,细胞内的效价为105 TCID50/mL,而PK-15细胞中的效价只有102.75 TCID50/mL。两基因型毒株E2的核苷酸同源性低于90%,氨基酸同源性约为90%。表明,基因2型毒株的体外生长特性及其E2的分子特性均与基因1型毒株存在差异。 万婧 陈宁 童超 廖迅 谢文绮 李肖梁 方维焕关键词:猪瘟病毒 囊膜糖蛋白E2 分子变异