陈俊
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 供职机构：云南农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 金黄色葡萄球菌耐盐生长的形态观察及机理的初步研究被引量：7
- 2010年
- 为阐明金黄色葡萄球菌特有的耐盐生长特性的机理,试验将该菌分别培养于含低盐(1.0%NaCl)和高盐(10.0%NaCl)的LB液体培养基及卵黄琼脂培养基,观察发现高盐液体条件下该菌呈絮状生长,细菌个体形态明显增大,在高盐固体条件下菌落形态较小,菌落形成单位(CFU)数量也明显减少;对菌体裂解产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,发现金黄色葡萄球菌在高盐与低盐培养条件下的蛋白表达谱存在差异,前者比后者被诱导多表达出至少一个蛋白质条带(MW 22 ku);将相同数量的该菌接种于含0.5 IU/mL青霉素作为细胞壁合成抑制剂及不同氯化钠浓度(1.0%,2.5%,4.0%,5.5%,7.0%,8.5%和10.0%)的卵黄琼脂培养基上培养,发现随着NaCl浓度的升高,CFU数量逐渐减少。结果表明,金黄色葡萄球菌的耐盐生长特性与其细胞壁合成和盐应激蛋白表达有关,并伴随有菌落、菌体形态的变化。
- 陈俊张惠萍朱希贵黎琼艳陈培富
- 关键词：金黄色葡萄球菌青霉素
- 犬瘟热病毒昆明分离株的生物学特性被引量：4
- 2010年
- 从1只曾接种过犬瘟热弱毒疫苗但又发病的宠物犬血样中分离到1株犬瘟热病毒(CDV),命名为CDV昆明分离株(CDV-KM)。该毒株可使Vero细胞产生以细胞融合及空泡化为特征的细胞病变,病毒效价为105.8TCID50/mL或1.76×106PFU/mL,并能在鸡胚绒毛尿囊膜、鸡胚成纤维细胞及MDCK细胞上增殖。微量中和试验结果发现,自制的犬抗CDV-KM株同份血清对CDV-KM株与参考毒株CDV-Onder-stepoort的中和抗体效价即半数保护量分别为1:142和1:132,显示二者未存在明显的中和表位差异。RT-PCR、RFLP和DNA测序分析结果显示,使用参照组合引物CDV-P2/P3/P4扩增,均可得到被认为指示弱毒株特征的177bp核酸片段;而H蛋白全长基因扩增产物未见能指示野生毒株特征的NdeⅠ和SspⅠ酶切位点;H蛋白基因与Onderstepoort小空斑变异株、鸡胚适应株和大空斑变异株的核酸序列同源性分别为98.84%、98.90%和100%。表明该分离株属于疫苗基因群。
- 李红芳陈俊陈培富肖雷
- 关键词：犬瘟热病毒抗原性毒力
- 麻疹疫苗预防犬瘟热的试验研究被引量：4
- 2009年
- 为调查麻疹疫苗用于预防犬瘟热的可行性,选择同窝8只土种幼犬,按2～2.5人份/犬的剂量对A组幼犬（n=3）进行2次麻疹弱毒疫苗接种,应用微量中和试验测定免疫前及每次免疫后第7 d血清中的犬瘟热病毒（CDV）中和抗体效价,并转移加强免疫犬外周循环全血[（3.2～3.5）mL/犬]给未免疫B组犬（n=3）,3 d后用Vero细胞分离培养的第3代CDV昆明分离株,以2000个TCID50（相当于5600 PFU）/犬的剂量对上述2组犬和对照C组犬（n=2）进行肌肉注射或滴鼻攻毒。结果发现：不论是否接种麻疹弱毒疫苗,所有犬只均未产生可检测到的CDV中和抗体（效价低于1∶4）;攻毒后连续观察14 d,A组与B组均未出现犬瘟热临床症状,C组出现明显的犬瘟热症状但未死亡。以上结果表明：麻疹弱毒疫苗不能诱导犬产生CDV中和抗体,但可诱导产生有效的抗CDV感染的细胞免疫力。
- 李红芳何明丽鲁琼芬陈俊陈培富
- 关键词：麻疹疫苗犬瘟热病毒微量中和试验
- 胸腺肽α_1的温度诱导原核可溶性表达与简易纯化被引量：3
- 2012年
- 将人工合成的人胸腺肽α1(Tα1)基因插入到载体pBV222,转化大肠杆菌DH5α菌株并置42℃诱导表达可溶性融合蛋白。融合蛋白经镍亲和层析柱纯化,加入肠激酶切割,再将酶切反应体系回到镍亲和层析柱。所获穿过液中的重组胸腺肽α1(rTα1),经十二烷基硫酸钠-聚苯烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离及分析,纯度分别为94.5%和72%。以癌症患者外周血淋巴细胞开展玫瑰花环试验,所获rTα1纯品显示出与化学合成Tα1(sTα1)相同的生物学活性。
- 陈培富李红芳鲁琼芬陈俊
- 关键词：胸腺肽Α1原核表达系统反相高效液相色谱
