高鹏华
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西南林业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 月月粉TGAs基因结构及RcTGA2抗灰葡萄孢菌功能分析被引量：1
- 2021年
- TGA(TGACG motif-binding factor)转录因子是bZIP转录因子家族中重要的一组,对植物病原菌侵染具有广谱抗性。本研究鉴定了月月粉月季(Rosa chinensis Jacq.Old Blush)TGA家族成员,并对其理化性质、亚细胞定位、进化特征和表达模式进行分析。鉴定获得7个RcTGAs,均包含bZIP1(cl21462)和DOG1(pfam14144)的保守结构域,氨基酸大小为324-545aa,分子量在36.68-60.17KD之间,等电点在5.52-8.96之间,二级结构主要为α-螺旋,均为亲水性蛋白,主要位于细胞核内。进化分析将来自月月粉月季、拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.)、野草莓(Fragaria vesca L.)、水蜜桃(Prunus persica(L.)Batsch)、苹果(Malus domestica(Suckow)Borkh.)的TGAs分为6个亚组。qPCR实验表明,灰葡萄孢菌侵染月季花瓣RcTGA4表达量无显著变化,RcTGA6随侵染时间的延长表达量呈下降趋势。RcTGA1/2表达呈显著上升的趋势,RcTGA5/7呈现先上升后下降的趋势,表明RcTGA1/2/3/5/7可能在月季-灰霉菌互作过程中发挥了重要作用,这5个基因可作为进一步抗病研究和功能分析的候选基因。通过VIGS沉默RcTGA2基因,灰葡萄孢菌侵染48 h后,月季花瓣病斑直径显著增大,表明RcTGA2与月季对灰葡萄孢菌的抗性有关。
- 高鹏华张颢晏慧君陈宇春范元兰鄢波邱显钦
- 关键词：灰葡萄孢菌生物信息学分析实时荧光定量PCRVIGS
- RcMPK3正向调控月季对灰霉病菌的响应被引量：1
- 2022年
- 灰霉病是月季采后和运输过程中危害最严重的真菌病害。MPK3基因参与植物对逆境的响应。基于古老月季品种‘月月粉’(Rosa chinensis‘Old Blush’Jacq.)全基因组数据,利用RT-PCR技术获得了包含完整ORF区的RcMPK3基因,并对其进行生物信息学分析和功能检测。结果显示:RcMPK3基因ORF序列长1113 bp,编码370个氨基酸,系统进化树分析结果表明RcMPK3蛋白与FvMPK3蛋白聚为一支;对基因全长序列分析发现,RcMPK3由6个外显子和5个内含子构成,启动子序列包含10类响应激素和逆境相关的顺式元件;qPCR分析表明,RcMPK3受SA和JA诱导表达,同时,在灰霉病菌(Botrytis cinerea)侵染过程中,RcMPK3基因表达量也显著提高;VIGS分析发现,基因沉默株系病斑直径显著大于对照组株系,表明RcMPK3基因可能正向调控月季对灰霉病菌的抗性。
- 高鹏华张颢张颢晏慧君王其刚鄢波晏慧君邱显钦
- 关键词：月季灰霉病启动子植物激素VIGS
- 外源激素对灰霉菌胁迫下月季花器官生理生化指标的影响被引量：2
- 2022年
- 【目的】由灰霉菌引起的月季灰霉病是月季采后危害最严重的真菌性病害。据统计由灰霉病造成的月季采后损害在30%~70%,严重制约了月季产业的发展。因此,探索月季花器官对灰霉病的抗性机制,了解月季切花对灰霉菌胁迫的适应性具有重要意义。【方法】利用酶联免疫试剂盒测定感染灰霉菌的月季花器官超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),几丁质酶(CHT),多酚氧化酶(PPO)和β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性随时间的变化情况;并对其PPO、POD和GLU合成关键酶RcPPO,RcPOD和RcBGLU的基因表达量进行分析;最后利用茉莉酸(JA),脱落酸(ABA),水杨酸(SA),2,4表油菜素内酯(BR)和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)5种外源激素作为诱导剂,测定月季花器官5种酶活性在不同激素处理后灰霉菌胁迫下的变化情况。【结果】在灰霉菌胁迫下,月季花器官PPO、GLU和POD活性呈持续显著上升趋势,CHT活性在60 h后显著升高,SOD活性呈持续显著下降的趋势;RcPPO,RcPOD和RcBGLU基因表达量持续显著升高;月季花器官经JA和BR处理灰霉菌胁迫后PPO和GLU活性持续显著升高(P<0.05),ACC处理能持续显著增高其CHT活性,ABA和SA处理能在灰霉菌侵染前期显著增强其POD活性,并显著降低其SOD活性。对5种酶活性的Pearson相关性分析结果显示,SOD和其他4种酶活性呈负相关。【结论】外源BR、JA和ACC通过直接诱导PPO,CHT和GLU活性的变化增强月季花器官抗灰霉病的能力,外源ABA和SA则能够降低SOD活性,提高POD活性。本研究为今后研究月季花器官对灰霉菌的抗性机制和防治方法提供了理论基础。
- 高鹏华王其刚王其刚蹇洪英晏慧君鄢波蹇洪英邱显钦
- 关键词：月季防御酶活性外源激素
- 4种藤本月季品种综合评价被引量：1
- 2016年
- 采用灰色关联度分析和模糊综合评判,分别对2016年从美国引进的4个藤本月季品种进行综合评判。结果表明,‘萨朗波’综合性状表现最好,其次为‘红龙’‘欢迎’,‘金璀璨’综合性状表现最差。2种评估方法的综合评判结果相同,且与品种实际表现相吻合。
- 高鹏华
- 关键词：灰色关联度分析模糊综合评判综合评估藤本月季
- 十二个藤本月季品种的适生性评价与筛选被引量：5
- 2017年
- 以12个引自美国的藤本月季品种为试材,测定了不同品种植株的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、叶绿素a(Chl-a)含量、叶绿素b(Chl-b)含量、叶绿素总量(T-chl)、可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量等7个与适生性相关的生理指标。采用主成分分析、隶属函数分析以及聚类分析法对相关变量进行分析,对引种藤本月季原株适生性进行评价和筛选。结果表明:利用主成分分析将7个相关指标可转化为3个主成分,累计贡献率达到82.626%;并通过聚类分析将12个供试藤本月季品种的适生性分为适生性强、适生性中等和适生性较弱3个等级。初步筛选出‘Super Excelsa’‘Eden Rose′88’‘Handel’‘Alchymist’‘Aloha’等5个适生性较好的品种,可为藤本月季引种和园林应用提供借鉴。
- 于文剑高鹏华熊阳阳王锦
- 关键词：藤本月季适生性主成分分析隶属函数
- 垫状卷柏SpLEA1基因克隆及干旱胁迫下的表达分析被引量：1
- 2023年
- 晚期胚胎发育丰富蛋白(late embryogenesis abundant,LEA),广泛存在于生物体内,与植物抗逆性密切相关,可在干旱胁迫下保护植物细胞,减少植物损伤。垫状卷柏(Selaginella pulvinata)是一种在干旱胁迫下生存能力极强的蕨类植物,具有很强的恢复能力。为探究垫状卷柏SpLEA 1基因在耐旱植物中的分子机制与表达特征,该研究以高耐旱性植物垫状卷柏为实验材料,基于转录组测序结果,采用RT-PCR技术获得SpLEA 1基因cDNA序列,采用HiTail-PCR技术获得启动子序列,利用生物信息学对序列进行了分析,并采用qRT-PCR技术分析了SpLEA 1基因在干旱胁迫下的表达模式。结果表明:(1)垫状卷柏SpLEA 1全长为476 bp,开放阅读框(ORF)为279 bp,共编码92个氨基酸,通过在线工具预测到蛋白分子量为9491.46 Da,等电点为5.45,蛋白结构预测分析表明该蛋白为亲水性蛋白,含有10个磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。(2)预测到SpLEA1蛋白的保守结构域为Lea-5,来源于LEA1家族。基于系统发生树和遗传距离矩阵,发现垫状卷柏SpLEA1与来自鹰嘴豆(Cicer arietinum)和红车轴草(Trifolium pratense)的Lea-5蛋白同源性较高。(3)对启动子序列进行顺式作用元件的预测分析发现SpLEA 1基因启动子含有5类激素响应元件和与干旱胁迫响应有关的功能元件。(4)在自然干旱处理下SpLEA 1基因表达上调,并在12 h时达到峰值,在24 h干旱后进行复水处理,表达量显著下调。综上所述,SpLEA 1基因在垫状卷柏中很可能参与了干旱胁迫响应机制的相关调控。该结果为进一步研究垫状卷柏SpLEA 1基因在干旱胁迫下的功能及其表达调控机制提供了参考。
- 周璇高鹏华鄢波
- 关键词：基因克隆启动子克隆
