李峰
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胃癌组织HER-2基因扩增和蛋白表达检测及临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的探讨免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法检测胃癌HER-2蛋白表达和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)法检测HER-2基因扩增的临床意义。方法收集256例胃癌患者手术切除及胃镜活检的胃癌组织标本,分别采用IHC法及FISH法检测胃癌组织HER-2蛋白表达及基因扩增状态,并对结果进行统计学分析。结果 256例胃癌组织标本中,有26例HER-2蛋白表达阳性,阳性率为10.16%;46例HER-2基因有扩增,阳性率17.97%。26例HER-2蛋白表达(3+)的标本中,24例有HER-2基因扩增,2例无扩增;95例HER-2蛋白表达(2+)的标本中,20例有基因扩增,75例无扩增;90例HER-2蛋白表达(1+)的标本中,2例有基因扩增,88例无扩增;45例HER-2蛋白表达(0)的标本中,HER-2基因均无扩增。IHC法和FISH法检测HER-2表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IHC法检测胃癌HER-2蛋白表达可作为临床治疗的初筛,HER-2蛋白表达(2+)的患者应常规行FISH法,以确定HER-2基因扩增状态。FISH法检测结果具有较高的稳定性和可靠性,联合IHC法可更准确和客观评价胃癌预后,并指导临床选用靶向药物治疗。
- 潘丹玲陈小岩林洁李峰陈新
- 关键词：胃癌HER-2基因免疫组织化学荧光原位杂交
- eEF1A2在原发性肝细胞癌的表达被引量：1
- 2015年
- 目的:研究真核翻译延长因子1A2(e EF1A2)在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达,以及e EF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法:应用real-time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织e EF1A2的mRNA和蛋白表达,应用real-time PCR法与Western blot法分别检测几种HCC细胞株e EF1A2的mRNA与蛋白表达。构建GV287-e EF1A2表达慢病毒感染低表达e EF1A2的HCC细胞,应用real-time PCR法和Western blot法分别检测细胞e EF1A2的mRNA和蛋白表达;应用MTT法、DNA倍体法和real-time PCR法分别检测细胞活力、细胞周期和白蛋白mRNA的表达。结果:HCC癌组织e EF1A2的mRNA表达水平和蛋白表达阳性率明显高于配对癌旁组织与正常肝脏组织(P<0.01);e EF1A2的mRNA和蛋白在HCC细胞株SMMC-7721和BEL-7402高表达,在SK-HEP-1低表达。构建的GV287-e EF1A2表达慢病毒可感染SK-HEP-1细胞使e EF1A2过表达;与阴性对照组相比,GV287-e EF1A2组SK-HEP-1细胞的活力升高,白蛋白的mRNA表达水平降低,G0/G1期的细胞比例显著减少,而S期和G2/M期的细胞比例显著升高。结论:e EF1A2在HCC癌组织存在异位高表达;e EF1A2可能是HCC的一种潜在癌蛋白,其过表达可增强HCC细胞的增殖能力,降低HCC细胞的分化程度,并促使细胞周期通过G0/G1期,进入S期和G2/M期。
- 黄毅邱福南陈敦雁伍严安李峰黄肖利吴文冰
- 关键词：肝细胞癌细胞增殖细胞周期
- eEF1A2基因沉默的原发性肝细胞癌BEL-7402细胞株的建立被引量：1
- 2017年
- 目的本研究旨在构建针对高表达真核翻译延长因子1A2(eEF1A2)的原发性肝细胞癌(HCC)BEL-7402细胞株的eEF1A2-RNAi的细胞模型,为从基因沉默基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用的功能奠定实验基础。方法通过针对eEF1A2基因的shRNA与线性化的GV115-GFP载体进行连接转化,对获得的重组子(GV115-GFP-eEF1A2-shRNA)进行PCR和测序鉴定。采用慢病毒载体系统将pHelper 1.0载体、pHelper 2.0载体与GV115-GFP-eEF1A2-shRNA共转染293T细胞,包装成eEF1A2-RNAi-LV,并感染高表达eEF1A2的BEL-7402细胞。采用Real time PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平验证eEF1A2-RNAi-LV对BEL-7402细胞eEF1A2表达的抑制作用。结果成功构建了重组真核表达载体GV115-GFP-eEF1A2-shRNA,并通过慢病毒载体系统包装成eEF1A2-RNAi-LV;将eEF1A2-RNAi-LV转染至BEL-7402细胞后,细胞eEF1A2 mRNA和蛋白的表达水平分别下降了84.1%和64.5%,与阴性对照组相比较具显著性差异(P<0.01),表明转染后的BEL-7402细胞eEF1A2基因被特异性沉默。结论成功构建了eEF1A2-RNAi的BEL-7402细胞模型,为进一步从基因敲除层面研究eEF1A2在HCC潜在的致癌作用奠定了良好的实验基础。
- 陈敦雁黄毅邱福南伍严安黄肖利李峰吴文冰
- 关键词：原发性肝细胞癌BEL-7402细胞RNA干扰慢病毒载体
