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燕国清
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青岛大学医学院附属医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张志伟
青岛大学医学院附属医院
徐鹏
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pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒构建腺相关病毒包装(英文)
2012年
背景:实验为基因治疗退变椎间盘实验的前期部分,旨在构建含免疫荧光的pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒并应用腺相关病毒包装,为后期体内外实验打下基础。目的:构建人SOX9基因过表达腺相关病毒pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato的包装。方法:用酶切法将质粒pAAV-IRES-tdTomato和质粒pUC57-hSOX9连接成pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato,用质粒共转染方法包装腺相关病毒,感染293AAV细胞,腺相关病毒纯化及用生物学滴度测定法进行滴度测定。结果与结论:经测序结果BLAST比对分析,pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato完全与合成的基因序列hSOX9相符,滴度为1×107TU/mL。结果表明,人SOX9基因过表达腺相关病毒pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato包装成功。
刁泽正
燕国清
张志伟
房晶
徐鹏
西永明
任山
刘勇君
隋爱华
关键词:
腺相关病毒
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转染
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