邹林樾
- 作品数:13 被引量:18H指数:3
- 供职机构:首都医科大学更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 利用BD FACSAria Ⅲ二次分选法纯化低比例细胞群体的流式细胞技术被引量:3
- 2020年
- 目的:利用BD FACSAriaⅢ流式细胞仪,通过两次分选获得高纯度的GFP阳性HEK293T细胞。方法:GFPpx458空载质粒转染的293T细胞,通过流式细胞仪yield结合purity模式对细胞进行两次分选,比较二次分选后阳性细胞的纯化率与细胞分别经yield和purity单次分选的差异并对分选后细胞进行7-AAD染色鉴定分选后细胞的活性。结论:使用BD FACSAriaⅢ型流式细胞仪的yield加purity模式可将低表达量3.1±1.0%且分群不明显的GFP+293T纯化至96.5±1.1%,且活性良好,是一种可靠的获取高纯度目的细胞的方法。
- 户乃丽徐晓雪邹林樾赵君朋
- 关键词:流式细胞
- 用7-AAD检测细胞DNA含量的流式细胞技术
- 2011年
- 目的:探索利用荧光染料7-AAD检测细胞DNA含量的流式细胞技术。方法:利用7-AAD和PI两种荧光染料标记小鼠胸腺T淋巴细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较2种方法测定结果。结果:通过流式细胞仪对细胞周期进行分析显示:用7-AAD和PI两种荧光染料标记的小鼠胸腺T淋巴细胞呈现完整的细胞周期,G0/G1期细胞含量为73.2%±1.93%、73.9%±1.79%,S期细胞含量为23.6%±1.04%、22.6%±1.50%,G2/M期细胞含量为3.2%±0.28%、3.5%±0.21%,两种标记方法测定结果基本一致。结论:本文探讨的7-AAD染色检测DNA含量法与常用的PI标记法相比较结论一致,且操作上更为简单快捷,是一种值得推广的DNA周期分析染色方法。
- 户乃丽邹林樾徐晓雪
- 关键词:流式细胞术细胞周期
- 成人骨髓基质细胞体外培养及鉴定被引量:3
- 2004年
- 目的 :探讨简易的成人成骨细胞体外培养方法 ,为进一步研究成骨细胞及骨组织工程提供技术平台。方法:手术中抽取健康成人骨髓组织 ,采用全骨髓培养法在体外进行培养 ,细胞汇合后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素 C的条件培养基进行传代培养 ,观察细胞增殖和分化情况 ,并对细胞进行鉴定。结果:培养的成人成骨细胞表现出成骨细胞的形态特征 ,细胞碱性磷酸酶 (AL P)阳性率为 6 8% ,经 Von Kossa's染色证实其能最终形成钙结节。结论:全骨髓培养法所培养的细胞具有成骨细胞的特性 ,可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法。
- 王振斌艾合麦提.玉素甫邹林樾李靖扬朱良
- 关键词:骨髓基质细胞细胞培养成骨细胞
- 成骨细胞的体外培养及其生物学特性被引量:5
- 2004年
- 目的 :建立体外分离、培养兔和人成骨细胞的生物学模型 ,并对其生物学特性进行观察。方法 :抽取新西兰兔骨髓 ,采用全骨髓法培养 ;人髂骨松质骨经胰酶消化获得成骨细胞 ,以 1× 10 6 / ml的细胞浓度进行培养 ,约10 d左右得到贴壁生长的单层细胞。随后传代培养 ,对所获得的细胞进行生物学特性观察。 结果 :获得的细胞呈多种形态 ,有长短不一、粗细不均、互相连接的胞浆突起 ,细胞可相互重叠呈复层生长 ,并形成钙结节。经连续传代 ,细胞形态与功能不变 ,具有典型成骨细胞的生物学特性。结论:无论采用兔骨髓基质细胞全骨髓法 ,还是人松质骨经胰酶消化法均能在体外培养出大量高纯度成骨细胞 ,方法简便、易行 ,为成骨细胞复合生物降解材料移植修复骨缺损奠定了基础 ,而且培养的成骨细胞可作为生物学模型 ,供干预研究使用。
- 邹林樾王振斌艾合麦提.玉素甫
- 关键词:骨髓基质细胞成骨细胞细胞培养
- mRNA差异显示法在维吾尔族和哈萨克族2型糖尿病患者白细胞差异基因筛选中的应用被引量:1
- 2008年
- 目的选择、研究三代内未和其他民族通婚的维吾尔族2型糖尿病患者与维吾尔族正常人,哈萨克族2型糖尿病患者与哈萨克族正常人之间外周血白细胞mRNA差异表达,寻找致糖尿病基因和抑糖尿病基因。方法应用荧光mRNA差异显示技术分析、鉴定外周血白细胞的差异表达片段,测序后进行同源性分析。结果Z5、Z8、Z15三个差异表达明显的cDNA片段在正常人中高表达,而在2型糖尿病患者中低表达或不表达。其中Z5、Z8与CREG1基因同源,Z15基因未知。结论三个在两个民族正常人高表达,而患者缺乏或低表达的基因,可能与抑糖尿病基因有关,可能是2型糖尿病的病因之一。
- 邹林樾张朝霞张琼魏琴卓菲娅.克依木
- 关键词:维吾尔族哈萨克族2型糖尿病MRNA差异显示
- 鸡红细胞标准品在胶质瘤细胞DNA周期检测中的意义被引量:1
- 2015年
- 目的自制鸡红细胞标准品在脑胶质瘤细胞周期检测中的应用。方法选2例病理2级和2例4级脑胶质瘤患者术中切除的新鲜肿瘤组织提取单细胞悬液,加入自制鸡红细胞做内参,70%乙醇过夜,用PI荧光染料标记细胞,用流式细胞仪检测DNA含量。结果鸡红细胞替代正常二倍体细胞与肿瘤细胞同时染色,4例脑胶质瘤DNA检测结果为1例2级患者可见肿瘤细胞和鸡红细胞G0/G1期峰荧光道数值分别为83.411和27.779,DI值1.000 9;另1例2级患者为82.545和27.811,DI值0.989 4。1例胶质瘤WHO 4级患者肿瘤细胞和鸡红细胞G0/G1期峰道数值分别为87.562和26.275,DI值1.111 0。这3例患者的DNA直方图上除鸡红细胞G0/G1期峰外只见1个患者细胞的G0/G1期峰。另1例胶质瘤WHO 4级患者直方图上可见鸡红细胞和三个倍体峰,G0/G1期峰道数值分别为81.682、96.075、120.243和23.806,DI值分别为1.143 7、1.345 2、1.686 1。结论鸡红细胞为内参,可以准确计算并识别脑胶质瘤细胞DNA各个倍体,甚至内参照是计算DI值必不可少的参照物。这4例DNA周期分析结果和病理结果完全吻合,是一种客观的辅助诊断手段,可以推广至各种肿瘤的检测中,并可用于仪器的评估和校准。
- 邹林樾徐晓雪户乃丽
- 关键词:流式细胞术鸡红细胞脑胶质瘤
- 407nm激光流式细胞仪检测小鼠骨髓侧群细胞效果研究被引量:1
- 2011年
- 流式细胞仪分选Hoechst 33342拒染侧群细胞是获得高纯度干细胞的重要方法,但由于检测技术单一,实验受客观条件限制大,无法广泛开展,本研究探讨了一种利用紫色激光和适当接收通道代替紫外激光检测侧群细胞的新方法,通过比较利血平阻断染料排出前后的检测结果验证这一方法的可靠性,结果提示此方法可以有效识别侧群细胞,可以作为紫外检测的替代方法。
- 徐晓雪邓君邹林樾户乃丽
- 关键词:流式细胞术干细胞侧群细胞
- 维吾尔族和哈萨克族2型糖尿病患者白细胞mRNA差异显示比较分析
- 2007年
- 目的:寻找维吾尔族2型糖尿病人与维吾尔族正常人、哈萨克族2型糖尿病人与哈萨克族正常人以及2个民族2型糖尿病人之间外周血白细胞mRNA差异表达的基因。方法:应用荧光mRNA差异显示技术分析2个民族2型糖尿病人和正常人外周血白细胞,分离差异表达的基因片段后测序,测序结果提交GenBank进行同源性分析。差异条带经反向Northern blot验证。结果:发现2个民族糖尿病人与正常人之间均存在差异片段,但差异并不集中在某个民族的正常人或2型糖尿病人中,而是离散分布。筛选出的12个差异表达明显的cDNA片段高度同源于人类染色体上的某些区域,但50%以上功能目前尚不清楚。结论:发现的12个在维吾尔族和哈萨克族2型糖尿病人与正常人外周血白细胞中差异表达的基因可能与2型糖尿病有关。
- 邹林樾张朝霞卓菲娅.克依木魏琴
- 关键词:维吾尔族哈萨克族2型糖尿病MRNA差异显示外周血白细胞
- 维吾尔族和哈萨克族2型糖尿病患者白细胞的mRNA差异表达初探
- 目的:通过选择、研究纯正的维吾尔族2型糖尿病人与维吾尔族正常人,哈萨克族2型糖尿病人与哈萨克族正常人之间外周血白细胞mRNA差异表达,寻找致糖尿病基因和抑糖尿病基因。方法:应用荧光mRNA差异显示技术/(Differen...
- 邹林樾
- 关键词:维吾尔族哈萨克族2型糖尿病MRNA差异显示外周血白细胞
- 文献传递
- pLentiLox3.7完整慢病毒颗粒对HEK-293细胞的生物学影响
- 2013年
- 目的通过实验观察无外源基因的慢病毒颗粒对HEK-293细胞产生的生物学影响,为选择以何种方式获得重组慢病毒感染的目的细胞提供基础依据。方法以pLentiLox3.7慢病毒核心空载体和包装质粒VSVG、RSV-REV和pMDLg/pRRE按一定比例混合,采用脂质体共转染,将慢病毒载体系统的4质粒共转染HEK-293T细胞,收获病毒原液,再以浓缩的病毒原液或等体积的培养基加入培养中的HEK-293细胞,观察细胞的形态变化,分析其染色体并采用流式细胞术分析细胞周期。结果按照本实验中慢病毒包装的质粒比例及包装过程获得的浓缩病毒液使得HEK-293细胞具有融合趋势,染色体分析后表明细胞尚未真正融合,但流式分析显示一定量的慢病毒可使得S期的细胞比例显著增多。结论一定量的慢病毒对细胞具有融合趋势,建议取低浓度含有荧光筛选标签的重组慢病毒感染目的细胞,培养之后再进行流式无菌分选以获得较纯的目的细胞。
- 邹林樾霍丽蓉
- 关键词:慢病毒转染细胞融合细胞周期