寻晓红 作品数:8 被引量:4 H指数:1 供职机构: 湖南理工学院化学化工学院 更多>> 发文基金: 湖南省教育厅优秀青年基金 国家自然科学基金 湖南省科技厅科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 化学工程 更多>>
DSCR1抗体制备与应用 2006年 本实验利用Fmoc固相多肽合成的方法合成DSCRI氨基端一个多肽片段(55-70AA),经HPLC纯化后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、纯化、经Westem blotting、免疫沉淀证实得到的抗体为抗DSCR1的特异抗体。谊抗体即能检测人源DSCR1蛋白,又能检测小鼠的DSCR1蛋白。运用获得的DSCR1多克隆抗体进行功能研究。发现DSCR1广泛存在泛素化,参与泛素化-蛋白酶体途径。 寻晓红 刘宇 聂东宋关键词:阿尔茨海默病 免疫沉淀 泛素化 弹性蛋白样多肽融合胸腺肽α1的原核表达方法 2011年 目的建立一种低成本生产胸腺肽α1(Tα1)的方法。方法采用融合表达方式表达Tα1基因,通过人工合成Tα1和弹性蛋白多肽(ELP)基因,构建Tα1-G-ELPn/pET41a(+),同时构建RimJ-pACYCDuet1载体,共转BL21,采用自诱导表达培养基进行蛋白表达,表达蛋白通过变温自动聚合沉淀获得高纯度融合蛋白,将融合蛋白羟胺裂解,变温沉淀,收集上清,最终获得目标蛋白。结果 1L培养基最终获得纯度为98%的目标蛋白29.5mg。结论建立了一种不需色谱和亲和纯化的生产胸腺肽α1的方法。 刘宇 吴喆 寻晓红 向阳 聂东宋关键词:胸腺肽Α1 纯化 运用生物质谱分析磷酸化多肽合成中的主产物 被引量:1 2006年 蛋白质磷酸化是生物体内非常重要的翻译后修饰,磷酸化多肽及其类似物对研究和阐明蛋白质磷酸化修饰对生命活动的调节机制具有十分重要的作用,采用4-磺酸苯异硫腈酸酯修饰,源后衰减基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(PSD-MALDI)模式分析合成磷酸化多肽,建立了一种简便易行的磷酸化多肽鉴定及定位方法。 寻晓红 刘宇关键词:生物质谱 蜈蚣粗毒中多肽毒素组分生理活性初步分析 被引量:3 2013年 几乎所有蜈蚣都是肉食动物,都依靠其毒液来捕杀和消化猎物,蜈蚣粗毒为混合物,其主要成分为蛋白质.本文以蜈蚣粗毒为原料,通过反相高效液相色谱进行分离纯化,将纯化产物进行MALDI-TOF-MS鉴定,发现蜈蚣粗毒中具有多肽组分.收集多肽组分在DRG细胞上进行全细胞膜片钳电生理实验研究,发现其中4个组分具有抑制电压门控钠通道电流活性、4个组分具有抑制电压门控钾通道电流活性.表明蜈蚣毒素具有很好的开发应用前景,为后续工作打下了良好的实验基础. 刘宇 寻晓红关键词:反相高效液相色谱 MALDI 电压门控钠通道 电压门控钾通道 唐氏综合症决定域蛋白1泛素化分析 2006年 利用Fm oc固相多肽合成的方法合成DSCR1羧基端一个多肽片段(55-70AA),经HPLC纯化后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、纯化、经W estern b lotting、免疫沉淀证实得到的抗体为抗DSCR1的特异抗体。该抗体即能检测人源DSCR1蛋白,又能检测小鼠的DSCR1蛋白。运用获得的DSCR1多克隆抗体进行功能研究,发现DSCR1广泛存在泛素化,参与泛素化-蛋白酶体途径。 寻晓红 刘宇 聂东宋关键词:阿尔茨海默病 免疫沉淀 泛素化 抗人Cx31第234位磷酸丝氨酸抗体的制备 2008年 利用磷酸化多肽合成技术合成Cx31羧基端磷酸多肽片段(CSPSSSApSRAST),经HPLC纯化、质谱证实后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并经过特异性纯化、经Western blotting检测,证实得到的抗体为抗间隙连接蛋白31第234位丝氨酸的特异抗体. 寻晓红 刘宇关键词:WESTERN BLOTTING 抗人Connexin31单克隆抗体的获得与应用 2006年 间隙连接蛋白31(Connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(Connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少。本实验利用多肽合成的方法合成Cx31羧基端一个多肽片段(250-266AA),经HPLC纯化后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫Balb/c小鼠、采血检测产生阳性抗体、脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合、筛选阳性克隆建株、分泌的抗体经Westernblotting、细胞免疫荧光染色证实得到的抗体为抗间隙连接蛋白31的特异抗体。 刘宇 寻晓红 聂东宋关键词:多肽合成 单克隆抗体 小鼠Connexin31蛋白磷酸化定位 2009年 间隙连接蛋白31(Connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(Connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少.本文通过免疫沉淀、SDS-PAGE分离、蛋白质条带回收、蛋白质胶块酶解、4-磺酸苯异硫氰酸酯修饰、PSD-MALDI-TOF质谱分析、数据分析、确定小鼠Cx31磷酸化位点. 刘宇 寻晓红