- Lipofectamine 2000介导重组siRNA质粒载体转染SGC7901的条件优化被引量：2
- 2012年
- 目的寻求Lipofectamine 2000介导外源基因体外转染胃癌细胞SCG7901的最佳条件,建立有效的转染体系。方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,统计分析在不同质粒与脂质体的用量比、培养基选择、转染作用时间等条件下脂质体介导外源基因导入胃癌细胞的效率。结果用24孔板培养细胞时,在细胞融合度约90%,质粒用量为0.6μg,脂质体用量1.2μl(两者质量/体积比为1:2),转染作用时间为8 h时,转染效率为465%%,细胞存活率约78%。结论按以上转染体系,可获得较为满意的结果。
- 张涛白飞虎
- 关键词：LIPOFECTAMINESIRNA转染SGC7901
- HO-1 siRNA表达载体的构建及其稳定转染SGC7901细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:构建携带绿色荧光蛋白的HO-1基因siRNA表达载体,通过将载体转染入胃癌细胞株SGC7901筛选稳定转染细胞株。方法:参照前期工作,构建可用于筛选阳性克隆并带有绿色荧光的HO-1基因siRNA表达载体,采用脂质体转染法将载体转入SGC7901细胞中,并用G418进行阳性克隆筛选,获得稳定转染细胞系。结果:经酶切和测序验证,证实表达载体构建成功,将HO-1 siRNA表达载体转入SGC7901后,通过G418筛选获得稳定转染细胞系,经检测HO-1的表达水平明显低于为未转染的细胞。结论:本实验成功地构建了HO-1基因siRNA表达载体,筛选出HO-1基因沉默的稳定转染胃癌细胞系,为今后研究HO-1基因的作用机制提供了实验基础。
- 张涛白芳云白飞虎
- 关键词：胃癌HO-1基因SIRNA
