金沧海
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 利用慢病毒介导hTERT基因建立永生化髓核细胞系被引量：2
- 2020年
- 目的以慢病毒介导人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染体外培养的人髓核细胞,建立永生化髓核细胞系,为后期转基因与动物实验提供种子细胞。方法利用机械与酶消化的方法获得正常的人椎间盘髓核细胞,将构建好的重组慢病毒-hTERT(pLVX-hTERT)转染第2代体外单层培养的髓核细胞。用重组慢病毒-增强型绿色荧光蛋白作为标记物,在荧光电镜下观察细胞转染效率,按感染复数(MOI)40、60、80、100设组,选择出病毒转染的最佳MOI;设立pLVX-hTERT转染组、空病毒转染对照组及空白细胞对照组。在倒置显微镜下观察髓核细胞的形态,用反转录聚合酶链反应、细胞免疫荧光技术检测转染后hTERT基因在髓核细胞内的表达情况,用反转录聚合酶链反应检测髓核细胞Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达情况。结果慢病毒转染细胞后第6天,MOI为100时转染效率最高,可达82.9%。pLVX-hTERT转染组在转染后第7、15、30、60、90天均可检测到hTERT基因的表达,而两对照组则未见表达。pLVX-hTERT转染组保持了髓核细胞的形态,两对照组的细胞则出现返祖现象。pLVX-hTERT转染组细胞的蛋白多糖及Ⅱ型胶原基因表达水平较其他两组均明显增高(F=173.5、111.1,P<0.05),而两对照组之间则无明显差异(P>0.05)。结论pLVX-hTERT成功转染人椎间盘髓核细胞,转染pLVX-hTERT后的髓核细胞持续表达hTERT,获得永生化的能力,且分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖的量增加。
- 李大鹏徐从艳金沧海刘勇
- 关键词：慢病毒属髓核蛋白聚糖类
- 转基因髓核细胞移植治疗腰椎间盘退变的实验研究
- 目的：研究体内移植腺相关病毒(adeno-assoeiated virus 2,AAV2)介导的转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGFβ1)和结缔组织生长因子(connecti...
- 金沧海
- 关键词：腰椎间盘退变TGF-Β1CTGF转基因髓核细胞
- rAAV2-TGF β1-CTGF对永生化髓核细胞合成Ⅱ型胶原及蛋白多糖的影响
- 目的研究腺相关病毒介导的转化生长因子β1(transforming growth factor..β1,FGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)双基因,...
- 刘勇李大鹏金沧海
- 文献传递
- 两种术式治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折效果比较被引量：6
- 2016年
- 目的比较经皮椎体后凸成形术（PKP）与经皮椎体成形术（PVP）治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的效果。方法我院骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折住院病人106例,随机分为两组,分别采用PKP及PVP进行治疗。比较两组病人治疗后椎体前缘高度、椎体后凸角度及疼痛强度视觉模拟评分（VAS）的变化。结果两组病人术后3d及3月各项指标均较术前有明显改善（F=236.68～6 232.42,P〈0.05）;两组病人术后3d及3月VAS评分比较差异无显著性（P〉0.05）。术后3d及3月PKP组椎体前缘高度和椎体后凸角度指标改善情况好于PVP组（F=37.40～45.36,P〈0.05）。结论 PKP与PVP治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折,均能有效地改善病人疼痛,但在病人畸形矫正方面PKP优于PVP。
- 金沧海刘勇刘风霞王蔚
- 关键词：腰椎椎体后凸成形术椎体成形术
- 经皮椎体后凸成形术治疗椎体压缩性骨折的效果被引量：5
- 2013年
- 目的探讨经皮椎体后凸成形术(PKP)治疗椎体压缩性骨折的效果。方法椎体压缩性骨折病人42例,采用PKP进行治疗。比较病人术前3d、术后3d及末次随访时疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry评分、椎体前缘高度及椎体后凸角度变化。结果术后3d及末次随访时病人VAS评分、Oswestry评分、椎体前缘高度、椎体后凸角度与术前3d比较,差异有显著性(F=1898.88～5089.17,q=31.30～138.80,P<0.05)。结论 PKP是治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折较好的方法。
- 李大鹏刘勇宋建防金沧海
- 关键词：腰椎压缩性骨折椎体后凸成形术
