王爱东
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非肺孢子菌肺炎患者支气管肺泡灌洗液肺孢子菌检出情况被引量：3
- 2015年
- 目的利用常规PCR、巢式PCR(Nest PCR,n PCR)和定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)方法,调查非肺孢子菌肺炎(Non-Pneumocystis pneumonia,non-PCP)患者支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)的检出情况。方法入选non-PCP患者50例留取BALF,分别以线粒体大亚基r RNA(Mi-tochondrial large subunit r RNA,mt LSUr RNA)为靶基因进行常规PCR(Mt-PCR)和巢氏PCR(Mt-nPCR),以主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因进行常规PCR(Msg-PCR),检测Mt-PCR,Mt-nPCR和Msg-PCR三种方法的Pj特异性核酸片段检出率,并对PCR检出为阳性的样本分别用以mt LSU r RNA和Msg为靶基因的qPCR来检测相应Pj核酸片段拷贝数。结果 50例BALF中,Mt-n PCR、Mt-PCR及Msg-PCR的检出率分别为56%(28/50)、36%(18/50)和26%(13/50),其中三种检测方法同时阳性5例(10%),任意两种方法阳性13例(26%),任意一种方法阳性18例(36%),三种方法均为阴性14例(28%)。36例PCR检测结果阳性的标本分别进行mtLSUrRNA定量PCR(Mt-qPCR)和Msg定量PCR(Msg-qPCR)检测,其中Mt-qPCR检测结果为:1 000拷贝/μL^9 999拷贝/μL有36例(100%);Msg-qPCR检测结果为:100拷贝/μL^999拷贝/μL有3例(8.3%),1 000拷贝/μL^9 999拷贝/μL有16例(44.4%),10 000拷贝/μL^99 999拷贝/μL有9例(25%),105拷贝/μL以上8例(22.2%)。36例配对检测qPCR样本中,Msg-qPCR拷贝数大于Mt-qPCR拷贝数样本28例(77.8%)。结论在non-PCP患者BALF中,Pj核酸扩增方法的检出率为72%,Mt-qPCR拷贝数主要位于103拷贝/μL数量级,Msg-qPCR拷贝数主要分布于103至105拷贝/μL。用核酸扩增方法在BALF中检测出Pj时,临床意义解读需要谨慎。
- 任珊珊田小军齐志群安亦军范东瀛王爱东任翊
- 关键词：支气管肺泡灌洗液
- 脑瘤手术患者咽喉部吸取液中耶氏肺孢子菌的筛查被引量：1
- 2015年
- 目的采用常规PCR、巢式PCR（Nest PCR,nPCR）和定量PCR（Quantitative PCR,qPCR）检测耶氏肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii,Pj）特异性核酸片段,调查脑瘤手术患者咽喉部吸取液中的Pj。方法选取无肺炎脑瘤手术患者108例,留取手术咽喉部吸取液,分别以线粒体大亚基rRNA（Mitochondrial large subunit rRNA,mtLSUrRNA）为靶基因的常规PCR（Mt-PCR）和巢氏PCR（Mt-nPCR）,以及主要表面糖蛋白（Major surface glycoprotein,Msg）为靶基因的常规PCR（Msg-PCR）,检查咽喉部吸取液中Pj特异性核酸片段,阳性标本进行qPCR,检测分别以mtLSUrRNA和Msg为靶基因的拷贝数。结果 108例脑瘤手术患者咽部吸取液Mt-nPCR、Msg-PCR及Mt-PCR扩增阳性率率分别为41.7%（45/108）、15.7%（17/108）和4.6%（5/108）,其中3种检测方法同为阳性1例（占0.9%）,任意2种方法阳性11例（占10.2%）,Mt-nPCR和Msg-PCR任意1种方法阳性42例（占38.9%）,3种方法均阴性54例（占50.0%）。54例PCR检测阳性的标本同时进行mtLSUrRNA定量PCR（Mt-qPCR）和Msg定量PCR（Msg-qPCR）检测,其中MtqPCR检测为100-999拷贝/μl 2例（占3.7%）,1 000-9 999拷贝/μl有49例（占90.7%）,≥104拷贝/μl有3例（占5.6%）;Msg-qPCR检测为1 000-9 999拷贝/μl 14例（占25.9%）,10 000-99 999拷贝/μl 21例（占38.9%）,100 000-999 999拷贝/μl 14例（占25.9%）,≥106拷贝/μl有5例（占9.3%）。54例中Msg-qPCR拷贝数〉Mt-qPCR拷贝数51例（占94.4%）,
- 任珊珊宋营改吴赵永栗绍钢范东瀛王爱东任翊
- 关键词：常规PCR定量PCR
