赵利军
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北卡罗来纳大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗淋巴样增强因子-1羧基端单克隆抗体的制备及其表位的初步鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的制备抗淋巴样增强因子-1(LEF-1)羧基端86个氨基酸(Lct86)特异性单克隆抗体,并初步明确其表位,为进一步研究LEF-1C端特异序列的功能奠定基础。方法从Jurkat细胞株中扩增LEF-1C端特异序列cDNA,并克隆入PQE40、pET32a原核表达载体;分别转化入M15、BL21(DE3)感受态菌,IPTG诱导表达;纯化PQE40-Lct86融合蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体,以pET32a-Lct86融合蛋白鉴定单克隆抗体特异性。LEF-1C端特异序列不同长度的基因片段定向克隆入PQE40,鉴定各片段的表达,利用Western blotting初步鉴定单克隆抗体的表位。结果成功构建了PQE40-Lct86、pET32a-Lct86重组原核表达载体;纯化获得PQE40-Lct86融合蛋白;得到一株特异性的抗LEF-1C端单克隆抗体TMAb1,证实其表位位于437aa^454aa。结论成功制备了一株特异性的抗LEF-1C端单克隆抗体TMAb1,并鉴定其抗原识别表位位于437aa^454aa,为进一步研究LEF-1C端的功能奠定基础。
- 杨明珍李鹏张竹君易维京李淑慧赵利军胡川闽
- 关键词：单克隆抗体表位
