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王英翔
王英翔
作品数:
1
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供职机构:
中国人民解放军66284部队
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
胡川闽
第三军医大学
罗阳
第三军医大学西南医院
陈安
第三军医大学
何莹
第三军医大学
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2013
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人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白真核表达载体的构建和鉴定
2013年
目的构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达。方法从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/His A-NGAL,经测序鉴定正确后用脂质体转染HEK293T细胞,用Western blot和ELISA方法鉴定表达产物。结果获得长度597bp的NGAL蛋白基因并构建pcDNA3.1/His A-NGAL真核表达载体,测序正确后转染,用Western blot和ELISA方法证实HEK293T细胞可以表达NGAL重组蛋白并分泌出胞。结论成功构建人NGAL重组蛋白真核表达载体,转染HEK293T细胞表达出相应蛋白,为下一步的研究奠定了基础。
何莹
罗阳
王英翔
陈安
胡川闽
关键词:
中性白细胞
载脂蛋白类
明胶酶类
逆转录聚合酶链反应
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